本文關(guān)鍵詞： 瓦氏雅羅魚(yú) 碳酸鹽堿度 耗氧率 排氨率 血氨含量 Rh基因 氧氮比 免疫組化　出處：《上海海洋大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：瓦氏雅羅魚(yú)(Leuciscus waleckii,以下簡(jiǎn)稱雅羅魚(yú))隸屬鯉形目(Cypriniformes)鯉科(Cyprinidae)雅羅魚(yú)亞科(Leuciscus),俗稱東北雅羅魚(yú)、華子魚(yú)、白魚(yú),是我國(guó)北方知名的土著魚(yú)類,也是東北人民喜食的“三花五羅”之一[1]。雅羅魚(yú)主要分布在我國(guó)黑龍江流域、遼河及內(nèi)蒙古一些內(nèi)陸鹽堿湖泊中,在黃河流域沿岸的周邊省區(qū)(河南、山西、陜西、甘肅和青海等)也有分布。瓦氏雅羅魚(yú)具有極強(qiáng)的耐受碳酸鹽堿度(Carbonate alkalinity,CA)特性,能夠在內(nèi)陸高鹽堿湖泊達(dá)里湖(CA53.57,pH 9.6)中生存。這些天然優(yōu)勢(shì)使其成為開(kāi)展魚(yú)類鹽堿適應(yīng)性進(jìn)化及耐鹽堿分子生理機(jī)制研究理想的實(shí)驗(yàn)材料。1、本研究所用實(shí)驗(yàn)魚(yú)為人工繁育獲得的F3,通過(guò)采用封閉流水式呼吸室法對(duì)6個(gè)碳酸鹽堿度梯度(分別為CA10、30、50、70、90、110 mmol·L-1)和1個(gè)淡水對(duì)照組(CA0.44 mmol·L-1)的瓦氏雅羅魚(yú)做堿耐受實(shí)驗(yàn),結(jié)果發(fā)現(xiàn),隨著堿度的升高,瓦氏雅羅魚(yú)的耗氧率和排氨率均為先下降后上升,且都顯著低于對(duì)照組(P0.05)。在CA90時(shí),耗氧率和排氨率均達(dá)到最低值,表明CA90可能是達(dá)里湖瓦氏雅羅魚(yú)所能承受的最大堿度脅迫。相反地,隨著堿度的升高,瓦氏雅羅魚(yú)的血氨含量呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì),在CA90時(shí)達(dá)到峰值。然而在CA0-50時(shí),瓦氏雅羅魚(yú)血氨含量無(wú)顯著差異(P0.05),表明達(dá)里湖瓦氏雅羅魚(yú)進(jìn)化出特殊的排氨機(jī)制,使其體內(nèi)能夠保持較低的氨氮含量以此規(guī)避氨中毒。定量PCR顯示,參與氨轉(zhuǎn)運(yùn)的4種Rh基因在不同堿度處理組均有不同程度的上調(diào)表達(dá);其中Rhcg1和Rhcg2在高堿度CA110最為顯著(P0.05),表明Rhcg1和Rhcg2可能在達(dá)里湖瓦氏雅羅魚(yú)高堿脅迫下的排氨過(guò)程中發(fā)揮重要作用。能量代謝研究(O:N)發(fā)現(xiàn),在CA0-70時(shí),雅羅魚(yú)無(wú)需消耗過(guò)多能源物質(zhì)即可實(shí)現(xiàn)高堿度脅迫下的能量需求;而在堿度為CA90-110時(shí),則主要消耗脂肪和碳水化合物供能,減少蛋白質(zhì)耗能,以此降低毒氨的產(chǎn)生。依據(jù)上述研究結(jié)果,本文深入探討了達(dá)里湖瓦氏雅羅魚(yú)在高堿脅迫下的排氨策略及其可能的生理和分子機(jī)制,為推動(dòng)達(dá)里湖瓦氏雅羅魚(yú)在不同類型鹽堿水域的增養(yǎng)殖提供科學(xué)依據(jù)。2、本實(shí)驗(yàn)選用15尾達(dá)里湖瓦氏雅羅魚(yú)人工繁育F3,采用靜水密閉的方法,旨在通過(guò)對(duì)雅羅魚(yú)在高堿度(NaHCO3 50 mmol/L)和高氨(NH4CO3 1.5 mmol/L)脅迫下處理4個(gè)時(shí)間點(diǎn)(2 h、4 h、6 h和8 h)耗氧率和排氨率變化的研究,初步了解達(dá)里湖雅羅魚(yú)對(duì)不同環(huán)境脅迫的適應(yīng)能力。耗氧率實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:與淡水組相比,高堿度和高氨顯著抑制了雅羅魚(yú)的耗氧率(P0.05);高堿度組與高氨組相比,雅羅魚(yú)耗氧率除了在監(jiān)測(cè)的第1個(gè)時(shí)間點(diǎn)內(nèi)存在顯著性差異外(P0.05),其它時(shí)間點(diǎn)無(wú)明顯差異(P0.05)。排氨率實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:與淡水組相比,高堿度和高氨均顯著抑制了雅羅魚(yú)的排氨率(P0.05)。其中高氨組排氨率在所監(jiān)測(cè)的4個(gè)時(shí)間點(diǎn)內(nèi)全部下降,并與淡水組和高堿度組相比存在極顯著差異(P0.01)。本研究通過(guò)比較達(dá)里湖雅羅魚(yú)在淡水、高碳酸鹽堿度(模擬自然水體)和高氨脅迫下的耗氧率、排氨率的變化,初步了解達(dá)里湖雅羅魚(yú)對(duì)不同環(huán)境脅迫的適應(yīng)能力,為該物種在內(nèi)陸三北地區(qū)的養(yǎng)殖開(kāi)發(fā)提供基礎(chǔ)資料。3、本實(shí)驗(yàn)以堿度為50mmol/L脅迫下瓦氏雅羅魚(yú)作為處理組,淡水作為對(duì)照組。通過(guò)免疫組化技術(shù),對(duì)Rhcg1蛋白在雅羅魚(yú)鰓組織中的定位和表達(dá)情況。結(jié)果表明,與對(duì)照組相比,堿度組雅羅魚(yú)鰓組織鰓小片周圍熒光強(qiáng)度高,這說(shuō)明高堿度可能促使Rhcg1基因高表達(dá)。
[Abstract]:The Cyprinidae ( Cyprinidae ) Cyprinidae ( Cyprinidae ) Cyprinidae ( Cyprinidae ) Cyprinidae ( Cyprinidae ) Cyprinidae ( Cyprinidae ) Cyprinidae ( Cyprinidae ) Cyprinidae ( Cyprinidae ) Cyprinidae ( Cyprinidae ) Cyprinidae ( Cyprinidae ) is a famous indigenous fish in the north of China . The results showed that , with the increase of alkalinity , the oxygen consumption rate and ammonia excretion rate of Yarrowfish were higher than those in the control group ( P0.05 ) . The experimental results showed that the high alkalinity and high ammonia significantly inhibited the oxygen consumption rate ( P0.05 ) . Compared with the fresh water group , the high alkalinity and the high ammonia significantly inhibited the oxygen consumption rate ( P0.05 ) . Compared with the fresh water group , the high alkalinity and the high ammonia significantly inhibited the ammonia excretion rate ( P0.05 ) . Compared with the control group , the high alkalinity and the high ammonia had significantly different fluorescence intensity around the branchial gill of the fish branchial gill , which suggested that the high alkalinity could promote the high expression of Rhcg1 gene .

【學(xué)位授予單位】：上海海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S917.4

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本文編號(hào)：1510073