本文關鍵詞： 家蠶 攝食性 遺傳模式 SSR分子標記 人工飼料 食性相關基因　出處：《山東農(nóng)業(yè)大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：用人工飼料養(yǎng)蠶是今后我國蠶業(yè)發(fā)展的方向,但缺乏人工飼料適應性蠶品種嚴重制約了該技術的生產(chǎn)應用。探明家蠶對人工飼料攝食性的遺傳方式及分子機理,對于選育人工飼料適應性蠶品種及改良飼料配方均具有重要的理論和實踐意義。為此,本研究以對人工飼料攝食性不同的家蠶品種(品系)為材料,探討了不同蠶品種對人工飼料攝食性的遺傳模式,并利用SSR標記和圖位克隆技術對家蠶食性相關的基因進行了定位,采用半定量PCR技術測定了有差異的分子標記間14個預測基因在廣食性品種中廣04(ZG04)與低食性品種魯七(L7)間的表達差異。主要獲得如下結果:1.利用對人工飼料攝食性存在極顯著差異的3對家蠶品種(品系)為材料,分別組配成P1、P2、F1、F2及BC1共10個世代,以人工飼料育收蟻36?h疏毛率為攝食性指標,應用聯(lián)合尺度檢驗等方法進行攝食性遺傳模式研究。結果表明:通過多代歧化選擇選育的菁松A、菁松B的高食性與低食性品系對人工飼料的攝食性符合加性遺傳;廣食性品種ZG04對低食性品種L7為顯性-加性-母性遺傳模式。2.用ZG04和L7作為親本組建F1代及BC1F回交群體(ZG04×L7)×L7和BC2F回交群體[(ZG04×L7)×L7]×L7,利用SSR技術對人工飼料攝食性相關基因進行定位和連鎖分析,結果顯示在第7連鎖群上發(fā)現(xiàn)2個與食性連鎖的SSR多態(tài)性標記S0709和S0710,遺傳距離為1.1 cM。利用SSR Hunter 1.3軟件在S0709和S0710之間搜索潛在的SSR位點,并根據(jù)PCR擴增結果和攝食性表現(xiàn)型對比,結果找到5個新的多態(tài)性SSR標記,這5個標記在BC2F群體中的電泳圖譜中,低食性個體與L7基因型與表現(xiàn)型一致。利用KAIKObase家蠶數(shù)據(jù)庫中的有關信息分析S0709-S0710間的堿基序列及預測基因,結果在S0709與S0710間有14個預測基因。根據(jù)標記位點與基因位點,繪制出14個基因與7個分子標記的連鎖圖。遺傳連鎖圖的遺傳距離為226720 bp,Gene8與S3標記間距離最近,為241 bp。3.分別用ZG04與L7的蟻蠶、2齡起蠶、3齡起蠶、3齡蠶頭部為材料,采用半定量PCR技術,測定在S0709-S0710之間預測出的13個基因的表達情況。結果表明,其中10個基因在ZG04與L7間的表達無顯著差異,但Gene1和Gene3在ZG04的蟻蠶、2齡起蠶、3齡起蠶及3齡蠶頭部中的表達水平均顯著高于L7。Gene4在ZG04中不表達,但是在L7不同齡期均有表達。關于這些基因的具體功能及其與食性的關系有待進一步研究。
[Abstract]:Silkworm rearing with artificial feed is the direction of sericulture development in China in the future, but the lack of artificial feed adaptive silkworm varieties seriously restricts the production and application of this technology. The genetic mode and molecular mechanism of silkworm feeding on artificial feed are investigated. It has important theoretical and practical significance for breeding artificial feed adaptive silkworm varieties and improving feed formula. The genetic model of feeding on artificial diet of different silkworm varieties was discussed, and SSR markers and map cloning techniques were used to localize the genes related to silkworm feeding. Semiquantitative PCR technique was used to determine the expression differences of 14 predictive genes among differential molecular markers between Guang04ZG04 and L7. The main results were as follows: 1. Three pairs of silkworm varieties (lines) with very significant differences were used as materials. A total of 10 generations of P1P2P2F1F1F 2 and BC1 were prepared, and 36? H the hair thinning rate is a feeding index, The genetic model of ingestion was studied by means of joint scale test. The results showed that the high and low diet lines of Pinus cyanine B selected by multiple generation disproportionation were in accordance with additive inheritance. ZG04 was dominant additive-maternal inheritance model for low feeding variety L7. Using ZG04 and L7 as parents, F1 generation and BC1F backcross population (ZG04 脳 L7) 脳 L7 and BC2F backcross population [ZG04 脳 L7] 脳 L7 were established. Using SSR technique, the genes related to feed intake were studied. Location and linkage analysis, The results showed that two SSR polymorphic markers S0709 and S0710 were found in the 7th linkage group, with a genetic distance of 1.1 cm. SSR Hunter 1.3 software was used to search for potential SSR loci between S0709 and S0710. The results of PCR amplification and feeding phenotype were compared. Results five new polymorphic SSR markers were found in the electrophoretic map of BC2F population. The results showed that there were 14 predicted genes between S0709 and S0710 by using the relevant information in KAIKObase silkworm database, the results showed that there were 14 predicted genes between S0709 and S0710, according to the marker loci and gene loci, there were 14 predicted genes in S0709 and S0710, and there were 14 predicted genes in S0709 and S0710. A linkage map of 14 genes and 7 molecular markers was drawn. The genetic distance of genetic linkage map was 226720 BP Gene8 and S3 markers, the distance was 241bp.3.The ZG04 and L7 ants were used as materials from the 2nd instar to the 3rd instar of silkworm, and from the 3rd instar to the 3rd instar of silkworm. The expression of 13 genes between S0709-S0710 and S0709-S0710 was determined by semi-quantitative PCR. The results showed that there was no significant difference in the expression of 10 genes between ZG04 and L7. However, the expression levels of Gene1 and Gene3 were significantly higher in the second instar silkworm from the 2nd instar and the 3rd instar silkworm head than in L7.Gene4 in ZG04. However, the specific function of these genes and their relationship with diet need to be further studied.
【學位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：S883.9

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本文編號：1504633