本文關(guān)鍵詞： 家蠶 攝食性 遺傳模式 SSR分子標(biāo)記 人工飼料 食性相關(guān)基因　出處：《山東農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：用人工飼料養(yǎng)蠶是今后我國(guó)蠶業(yè)發(fā)展的方向,但缺乏人工飼料適應(yīng)性蠶品種嚴(yán)重制約了該技術(shù)的生產(chǎn)應(yīng)用。探明家蠶對(duì)人工飼料攝食性的遺傳方式及分子機(jī)理,對(duì)于選育人工飼料適應(yīng)性蠶品種及改良飼料配方均具有重要的理論和實(shí)踐意義。為此,本研究以對(duì)人工飼料攝食性不同的家蠶品種(品系)為材料,探討了不同蠶品種對(duì)人工飼料攝食性的遺傳模式,并利用SSR標(biāo)記和圖位克隆技術(shù)對(duì)家蠶食性相關(guān)的基因進(jìn)行了定位,采用半定量PCR技術(shù)測(cè)定了有差異的分子標(biāo)記間14個(gè)預(yù)測(cè)基因在廣食性品種中廣04(ZG04)與低食性品種魯七(L7)間的表達(dá)差異。主要獲得如下結(jié)果:1.利用對(duì)人工飼料攝食性存在極顯著差異的3對(duì)家蠶品種(品系)為材料,分別組配成P1、P2、F1、F2及BC1共10個(gè)世代,以人工飼料育收蟻36?h疏毛率為攝食性指標(biāo),應(yīng)用聯(lián)合尺度檢驗(yàn)等方法進(jìn)行攝食性遺傳模式研究。結(jié)果表明:通過(guò)多代歧化選擇選育的菁松A、菁松B的高食性與低食性品系對(duì)人工飼料的攝食性符合加性遺傳;廣食性品種ZG04對(duì)低食性品種L7為顯性-加性-母性遺傳模式。2.用ZG04和L7作為親本組建F1代及BC1F回交群體(ZG04×L7)×L7和BC2F回交群體[(ZG04×L7)×L7]×L7,利用SSR技術(shù)對(duì)人工飼料攝食性相關(guān)基因進(jìn)行定位和連鎖分析,結(jié)果顯示在第7連鎖群上發(fā)現(xiàn)2個(gè)與食性連鎖的SSR多態(tài)性標(biāo)記S0709和S0710,遺傳距離為1.1 cM。利用SSR Hunter 1.3軟件在S0709和S0710之間搜索潛在的SSR位點(diǎn),并根據(jù)PCR擴(kuò)增結(jié)果和攝食性表現(xiàn)型對(duì)比,結(jié)果找到5個(gè)新的多態(tài)性SSR標(biāo)記,這5個(gè)標(biāo)記在BC2F群體中的電泳圖譜中,低食性個(gè)體與L7基因型與表現(xiàn)型一致。利用KAIKObase家蠶數(shù)據(jù)庫(kù)中的有關(guān)信息分析S0709-S0710間的堿基序列及預(yù)測(cè)基因,結(jié)果在S0709與S0710間有14個(gè)預(yù)測(cè)基因。根據(jù)標(biāo)記位點(diǎn)與基因位點(diǎn),繪制出14個(gè)基因與7個(gè)分子標(biāo)記的連鎖圖。遺傳連鎖圖的遺傳距離為226720 bp,Gene8與S3標(biāo)記間距離最近,為241 bp。3.分別用ZG04與L7的蟻蠶、2齡起蠶、3齡起蠶、3齡蠶頭部為材料,采用半定量PCR技術(shù),測(cè)定在S0709-S0710之間預(yù)測(cè)出的13個(gè)基因的表達(dá)情況。結(jié)果表明,其中10個(gè)基因在ZG04與L7間的表達(dá)無(wú)顯著差異,但Gene1和Gene3在ZG04的蟻蠶、2齡起蠶、3齡起蠶及3齡蠶頭部中的表達(dá)水平均顯著高于L7。Gene4在ZG04中不表達(dá),但是在L7不同齡期均有表達(dá)。關(guān)于這些基因的具體功能及其與食性的關(guān)系有待進(jìn)一步研究。
[Abstract]:Silkworm rearing with artificial feed is the direction of sericulture development in China in the future, but the lack of artificial feed adaptive silkworm varieties seriously restricts the production and application of this technology. The genetic mode and molecular mechanism of silkworm feeding on artificial feed are investigated. It has important theoretical and practical significance for breeding artificial feed adaptive silkworm varieties and improving feed formula. The genetic model of feeding on artificial diet of different silkworm varieties was discussed, and SSR markers and map cloning techniques were used to localize the genes related to silkworm feeding. Semiquantitative PCR technique was used to determine the expression differences of 14 predictive genes among differential molecular markers between Guang04ZG04 and L7. The main results were as follows: 1. Three pairs of silkworm varieties (lines) with very significant differences were used as materials. A total of 10 generations of P1P2P2F1F1F 2 and BC1 were prepared, and 36? H the hair thinning rate is a feeding index, The genetic model of ingestion was studied by means of joint scale test. The results showed that the high and low diet lines of Pinus cyanine B selected by multiple generation disproportionation were in accordance with additive inheritance. ZG04 was dominant additive-maternal inheritance model for low feeding variety L7. Using ZG04 and L7 as parents, F1 generation and BC1F backcross population (ZG04 脳 L7) 脳 L7 and BC2F backcross population [ZG04 脳 L7] 脳 L7 were established. Using SSR technique, the genes related to feed intake were studied. Location and linkage analysis, The results showed that two SSR polymorphic markers S0709 and S0710 were found in the 7th linkage group, with a genetic distance of 1.1 cm. SSR Hunter 1.3 software was used to search for potential SSR loci between S0709 and S0710. The results of PCR amplification and feeding phenotype were compared. Results five new polymorphic SSR markers were found in the electrophoretic map of BC2F population. The results showed that there were 14 predicted genes between S0709 and S0710 by using the relevant information in KAIKObase silkworm database, the results showed that there were 14 predicted genes between S0709 and S0710, according to the marker loci and gene loci, there were 14 predicted genes in S0709 and S0710, and there were 14 predicted genes in S0709 and S0710. A linkage map of 14 genes and 7 molecular markers was drawn. The genetic distance of genetic linkage map was 226720 BP Gene8 and S3 markers, the distance was 241bp.3.The ZG04 and L7 ants were used as materials from the 2nd instar to the 3rd instar of silkworm, and from the 3rd instar to the 3rd instar of silkworm. The expression of 13 genes between S0709-S0710 and S0709-S0710 was determined by semi-quantitative PCR. The results showed that there was no significant difference in the expression of 10 genes between ZG04 and L7. However, the expression levels of Gene1 and Gene3 were significantly higher in the second instar silkworm from the 2nd instar and the 3rd instar silkworm head than in L7.Gene4 in ZG04. However, the specific function of these genes and their relationship with diet need to be further studied.
【學(xué)位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S883.9

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本文編號(hào)：1504633