本文關(guān)鍵詞： 蘋(píng)果 Mal d 表達(dá)分析 轉(zhuǎn)基因 斑點(diǎn)落葉病菌　出處：《園藝學(xué)報(bào)》2017年02期 　論文類(lèi)型：期刊論文

【摘要】：以蘋(píng)果葉片總RNA為模板,通過(guò)克隆獲得抗蘋(píng)果斑點(diǎn)落葉病基因Mal d 1。Mal d 1開(kāi)放閱讀框長(zhǎng)度為480 bp,編碼159個(gè)氨基酸殘基,包含2個(gè)外顯子和1個(gè)內(nèi)含子。蛋白結(jié)構(gòu)分析顯示,Mal d 1蛋白包含bet v 1-like結(jié)構(gòu)域。熒光定量PCR分析結(jié)果表明,Mal d 1在蘋(píng)果葉、花、果皮、果肉中均有表達(dá),但各器官中表達(dá)水平存在差異;在不同發(fā)育時(shí)期的果皮中都有表達(dá),表達(dá)水平隨時(shí)間呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì);在抗性品種葉片中表達(dá)水平較高;在葉片人工接種病菌條件下表達(dá)量隨時(shí)間的延長(zhǎng)明顯高于對(duì)照組。利用PRI101-AN載體和農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化方法轉(zhuǎn)化蘋(píng)果愈傷組織,轉(zhuǎn)基因愈傷組織的抗病鑒定結(jié)果顯示,Mal d 1過(guò)量表達(dá)增強(qiáng)愈傷組織對(duì)蘋(píng)果斑點(diǎn)落葉病的抗性。
[Abstract]:With the total RNA of apple leaves as the template for resistance to Alternaria leaf spot of apple Mal gene D 1.Mal d 1 and an ORF of 480 BP by cloning, encoding 159 amino acid residues, including 2 exons and 1 introns. Analysis showed that the protein structure, Mal d 1 Bet v 1-like domain containing protein. Quantitative PCR analysis showed that Mal d 1 in apple leaves, flowers, fruit, the flesh is expressed, but the expression levels were different in different organs; at different developmental stages in the pericarp were expressed, expression levels over time showed a downward trend after rising; high expression level in leaves of resistant varieties; extended amount with time was significantly higher than the control group expressed in the leaves inoculated with the pathogen. Under the condition of transformation of Apple callus by genetic transformation method of PRI101-AN vector and Agrobacterium mediated resistance, the identification results of transgenic callus showed that Mal The overexpression of D 1 enhanced the resistance of callus to Apple spotted deciduous disease.

【作者單位】： 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹(shù)研究所農(nóng)業(yè)部園藝作物種質(zhì)資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金項(xiàng)目(CARS-28) 國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2013BAD02B01)
【分類(lèi)號(hào)】：S436.611.1
【正文快照】： 蘋(píng)果斑點(diǎn)落葉病(Apple Alternaria Blotch)又稱褐紋病,最早發(fā)現(xiàn)于美國(guó)(Roberts,1924),是一種在世界范圍內(nèi)發(fā)生,在亞洲產(chǎn)區(qū)危害最為嚴(yán)重的病害之一(Miyamoto et al.,2009;Li et al.,2011)。目前全球50%的蘋(píng)果生產(chǎn)受到該病威脅(Zhao et al.,2008)。近年來(lái),該病在中國(guó)北方蘋(píng)果主

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本文編號(hào)：1462189