本文關(guān)鍵詞： 組織工程 干細(xì)胞 股骨 骨髓干細(xì)胞 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 股骨注射 生物發(fā)光 紅熒光蛋白 綠熒光蛋白 培養(yǎng) 尾靜脈注射 熒光素酶 小鼠 體內(nèi)分布 國家自然科學(xué)基金　出處：《中國組織工程研究》2017年05期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：背景:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞大多經(jīng)靜脈途徑輸注且歸巢至骨髓的比例極低,而經(jīng)股骨途徑輸注的研究較少。目的:觀察經(jīng)不同途徑輸注的熒光素酶基因修飾的紅熒光蛋白轉(zhuǎn)基因骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在體內(nèi)的分布情況。方法:生物發(fā)光法觀察不同數(shù)量級的熒光素酶基因修飾的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(5×10~6,1×10~6,1×10~5,1×10~4)在體外孔板及游離股骨內(nèi)的熒光成像情況,篩選出最佳濃度。分別經(jīng)小鼠股骨和尾靜脈途徑輸注最佳濃度的熒光素酶基因修飾的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,通過生物發(fā)光、病理切片、流式細(xì)胞術(shù)和熒光定量PCR法觀察不同時間點兩組小鼠體內(nèi)熒光分布及細(xì)胞數(shù)量有無差異。結(jié)果與結(jié)論:(1)熒光素酶基因修飾的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的熒光強度:在體外,熒光素酶基因修飾的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞熒光強度與細(xì)胞濃度成正相關(guān)關(guān)系;在體內(nèi),細(xì)胞輸注后股骨組熒光細(xì)胞首先出現(xiàn)在股骨,后迅速擴散至肺,尾靜脈組熒光細(xì)胞輸注后迅速擴散至肺,24 h后兩組熒光細(xì)胞均在脾臟、肝臟等處可見;(2)細(xì)胞分布和遷移情況:生物發(fā)光法能夠?qū)崿F(xiàn)細(xì)胞在小鼠體內(nèi)分布和遷移的活體觀察,細(xì)胞輸注后5 min,在兩組小鼠的肺臟處開始出現(xiàn)熒光,15 min后雙肺熒光強度達(dá)到高峰,24 h后可擴散至肝、脾等組織。經(jīng)股骨途徑與尾靜脈途徑輸注的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在小鼠體內(nèi)的分布差異無顯著性意義;(3)結(jié)果證實,經(jīng)骨髓腔注射和尾靜脈注射均不能促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞歸巢至骨髓。
[Abstract]:Background: most of the bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) are infused via vein and the proportion of homing to bone marrow is very low. Objective: to observe the distribution of erythrofluorescence gene modified bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) modified by luciferase gene in vivo. Observation of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) modified by luciferase gene with different orders of magnitude by bioluminescence. 5 脳 10 ~ (6). Fluorescence imaging of 1 脳 10 ~ (6) and 1 脳 10 ~ (5) ~ (1 脳 10 ~ (4)) in external foramen plate and free femur. The best concentration was obtained. The best concentration of luciferase gene modified bone marrow mesenchymal stem cells was infused through femur and tail vein of mice respectively, and then the bone marrow mesenchymal stem cells were stained by bioluminescence and pathology. Flow cytometry and fluorescence quantitative PCR were used to observe the difference of fluorescence distribution and cell number between the two groups at different time points. Fluorescent intensity of luciferase gene modified bone marrow mesenchymal stem cells: in vitro. The fluorescence intensity of mesenchymal stem cells modified with luciferase gene was positively correlated with cell concentration. In vivo, the fluorescence cells of the femur group first appeared in the femur and then spread to the lung after the infusion of the cells, and the fluorescence cells of the tail vein group spread to the lung after 24 hours. Liver and other places can be seen; (2) Cell distribution and migration: in vivo observation of cell distribution and migration in mice by bioluminescent method. Fluorescence began to appear in the lungs of the two groups at 5 min after cell infusion. After 15 min, the fluorescence intensity of both lungs reached the peak at 24 h and then spread to the liver. There was no significant difference in the distribution of bone marrow mesenchymal stem cells between femur and caudal vein in mice. The results showed that neither medullary injection nor caudal vein injection could promote the homing of bone marrow mesenchymal stem cells to bone marrow.
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院(第一臨床醫(yī)學(xué)院);南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院血液科;廣州市紅十字會醫(yī)院輸血科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(30901367) 南方醫(yī)院2010年度高層次課題匹配經(jīng)費(20100037) 南方醫(yī)科大學(xué)“優(yōu)青”計劃基金(C1031694)~~
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 0引言Introduction 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)能夠分泌大量的免疫調(diào)節(jié)、抗炎、抗凋亡、促血管生成及趨化因子等生物活性分子[1-5],因此在骨髓移植相關(guān)的疾病中有廣泛的用途,一方面在骨髓微環(huán)境中支持造血;另一方面,對移植免疫具有調(diào)節(jié)作用

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本文編號：1447602