本文關鍵詞：再生障礙性貧血中醫(yī)證型與外周血端長度及TRF1，TRF2，POT1基因表達水平的相關性研究　出處：《山東中醫(yī)藥大學》2016年碩士論文　論文類型：學位論文

  更多相關文章： 再生障礙性貧血 中醫(yī)辨證分型 外周血單個核細胞 端粒長度 TRF1 TRF2 POT1 RT-qPCR

【摘要】：目的:測定再生障礙性貧血(Aplastic Anemia,AA)患者外周血單個核細胞的端粒長度,端粒保護蛋白TRF 1、TRF 2、POT 1的mRNA表達水平;同時探討再障中醫(yī)辨證分型與外周血單個核細胞端粒長度變化、端粒保護蛋白TRF 1,TRF 2,POT 1的表達水平之間的關系,并分析端粒、TRF 1、TRF 2、POT 1之間的相關性,進一步從分子水平探討AA的發(fā)病本質,以期為研究其發(fā)生發(fā)展及治療尋求新的思路。方法:首先將40例AA患者按照中醫(yī)辨證分型標準進行辨證分組,腎陽虛組13例、腎陰虛組13例、腎陰陽兩虛組14例。并選取20例正常人外周血單個核細胞作為對照組。運用實時熒光定量聚合酶鏈反應(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-q PCR)檢測患者與正常對照組外周血單個核細胞的端粒長度、端粒保護蛋TRF1,TRF2,POT1mRNA表達水平。探討AA患者中醫(yī)辨證分型與外周血單個核細胞端粒長度變化、端粒保護蛋白TRF1,TRF2,POT1 mRNA表達水平的相關性;研究AA患者外周血單個核細胞端粒長度、TRF1,TRF2,POT1之間的相關性。結果:1.再障患者TRF1,TRF2,POT1 mRNA表達水平較正常對照組升高,均有顯著性差異(TRF1,TRF2,POT1,P0.05),有統(tǒng)計學意義;2.AA患者端粒長度變化情況較正常對照組降低,有統(tǒng)計學意義(P0.05);3.腎陽虛型、腎陰虛型、腎陰陽兩虛型AA患者TRF1 mRNA的表達水平均較正常對照組明顯升高,均有顯著性差異(腎陽虛、腎陰虛型、腎陰陽兩虛型,P0.01),有統(tǒng)計學意義;腎陽虛型、腎陰虛型AA患者TRF2 mRNA的表達水平均較正常對照組升高(腎陽虛型、腎陽虛型,P0.05),有統(tǒng)計學意義;腎陽虛型AA患者POT1mRNA的表達水平均較正常對照組升高(腎陽虛型P=0.039,P0.05),有統(tǒng)計學意義。4.腎陽虛型AA患者端粒長度變化情況均較正常對照組降低(腎陽虛型P=0.019,P0.05),有統(tǒng)計學意義。5.中醫(yī)各證型之間,腎陰虛型TRF2mRNA表達水平較腎陰陽兩虛型升高(腎陰虛型P=0.034,P0.05),有統(tǒng)計學意義。結論:1.TRF1,TRF2,POT1,端粒可能參與了再障的發(fā)病過程,且TRF1,TRF2,POT1高表達可能與端粒長度縮短有著密切的關系;2.端粒長度的縮短在再障的發(fā)病或疾病進展中起到重要作用,端粒長度在腎陽虛組表達最低,腎陽虛的再障患者端粒長度可能縮短更明顯,端粒損耗最為嚴重,TRF1,TRF2,POT1很有可能與端�？s短的過程,并可能與再障的預后有關;3.端粒長度與TRF1,TRF2表達之間呈負相關,POT1與TRF1表達之間呈正相關,提示TRF1,TRF2極有可能參與了端粒損傷縮短的過程,POT1可能通過影響TRF1而間接參與了這個過程,短端粒與再障的發(fā)病密切相關。
[Abstract]:Objective: to determine the telomere length of peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and telomere protection protein (TRF 1) TRF2 in patients with aplastic anemia (AA). MRNA expression level of POT 1; At the same time, the relationship between TCM syndrome differentiation of aplastic anemia and the changes of telomere length in peripheral blood mononuclear cells and the expression level of telomere protection protein TRF2POT1 in peripheral blood mononuclear cells was discussed, and telomere was analyzed. The correlation between TRF 1 and TRF2POT1, further to explore the pathogenesis of AA at the molecular level. Methods: 40 patients with AA were divided into two groups according to the criteria of TCM syndrome differentiation: 13 cases in kidney-yang deficiency group and 13 cases in kidney-yin deficiency group. There were 14 cases of deficiency of kidney, yin and yang, and 20 cases of normal human peripheral blood mononuclear cells were selected as control group. Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (RPCR) was used. Real-time quantitative polymerase chain reaction. The telomere length of peripheral blood mononuclear cells and telomere protected egg TRF1 / TRF2 were measured by RT-q. To explore the relationship between TCM syndrome differentiation and telomere length of peripheral blood mononuclear cells, telomere protection protein TRF1 and TRF2 in AA patients. Correlation of POT1 mRNA expression level; To study the correlation between telomere length of peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and TRF2POT1 in AA patients. The expression of POT1 mRNA was significantly higher than that of the control group (P 0.05). 2.The change of telomere length in AA patients was lower than that in normal control group (P 0.05). 3. The expression level of TRF1 mRNA in AA patients with deficiency of kidney yang, deficiency of kidney yin and deficiency of kidney yin and yang was significantly higher than that of normal control group, and there were significant differences (deficiency of kidney yang, deficiency of kidney yin). There was statistical significance in P0.01D of deficiency of kidney yin and yang. The expression level of TRF2 mRNA in patients with kidney yang deficiency and kidney yin deficiency was significantly higher than that in normal control group (kidney yang deficiency, kidney yang deficiency, P 0.05). The expression of POT1mRNA in AA patients with deficiency of kidney yang was higher than that in normal control group (P < 0.05). The changes of telomere length in AA patients with kidney-yang deficiency type were lower than those in normal control group (P < 0.05). The expression level of TRF2mRNA in kidney yin deficiency type was higher than that in kidney yin and yang deficiency type (P 0. 034 and P 0. 05). Conclusion: 1. TRF1, TRF2, POT1, telomere may be involved in the pathogenesis of aplastic anemia, and TRF1 may be involved in TRF2. The high expression of POT1 may be closely related to the shortening of telomere length. 2. The shortening of telomere length plays an important role in the pathogenesis or progression of aplastic anemia. Telomere length is the lowest in the group of deficiency of kidney yang, and the telomere length may be shortened more obviously in patients with aplastic anemia with deficiency of kidney yang. The most serious telomere loss was TRF1 / TRF2 / POT1, which may be related to the process of telomere shortening and the prognosis of aplastic anemia. 3. There was a negative correlation between telomere length and the expression of TRF1 and TRF2. There was a positive correlation between POT1 and TRF1 expression, indicating TRF1. TRF2 may be involved in the process of telomere injury shortening. POT1 may participate in this process indirectly by affecting TRF1. Short telomere is closely related to the pathogenesis of aplastic anemia.
【學位授予單位】：山東中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R259

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本文編號：1414001