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中溫α-淀粉酶基因在枯草芽孢桿菌中的高效表達及其發(fā)酵條件優(yōu)化

發(fā)布時間:2018-01-03 23:10

  本文關鍵詞:中溫α-淀粉酶基因在枯草芽孢桿菌中的高效表達及其發(fā)酵條件優(yōu)化 出處:《食品與發(fā)酵工業(yè)》2016年04期  論文類型:期刊論文


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【摘要】:以枯草芽孢桿菌為表達系統(tǒng),以中溫α-淀粉酶為目標蛋白,研究了啟動子和信號肽對外源蛋白表達分泌的影響。分別選取了4種啟動子以及8種信號肽來進行篩選,結果表明,啟動子PApr E的強度最高,信號肽SPnpr E的分泌效率最好。針對重組菌株1A751Q31進行系統(tǒng)的發(fā)酵優(yōu)化,在72 h發(fā)酵液中α-淀粉酶酶活達到380U/m L。在7.5 L發(fā)酵罐中進行放大實驗,發(fā)酵液中α-淀粉酶酶活最高達到853 U/m L。以上研究表明,α-淀粉酶適合在枯草芽孢桿菌中進行表達,同時表明枯草芽孢桿菌是良好的異源蛋白表達系統(tǒng)。
[Abstract]:The effects of promoter and signal peptide on the secretion of exogenous protein were studied by using Bacillus subtilis as expression system . Four promoters and eight signal peptides were selected for screening . The results showed that the highest intensity of the promoter PApr E and the best secretion efficiency of signal peptide SPnpr E . The results showed that the activity of 偽 - amylase reached 380 U / mL in 72 h fermentation broth . The results showed that 偽 - amylase was suitable to be expressed in Bacillus subtilis . The results showed that Bacillus subtilis was a good heterologous protein expression system .

【作者單位】: 天津科技大學生物工程學院;中國科學院天津工業(yè)生物技術研究所;廣西科學院非糧生物質酶解國家重點實驗室國家非糧生物質能源工程技術研究中心;
【基金】:國家自然科學基金(No.31370089,21446008,31400079) 廣西省科技支撐項目(14125008-2-22)
【分類號】:TQ925
【正文快照】: 芽孢桿菌屬中的革蘭氏陽性菌作為生產(chǎn)和分泌蛋白的微生物,在工業(yè)領域已經(jīng)被廣泛應用[1]。芽孢桿菌屬作為工業(yè)微生物,擁有實用廉價的大規(guī)模生產(chǎn)系統(tǒng),其目標蛋白分泌量在培養(yǎng)基中可以達到20~25 g/L。目前市場上可以購買到的酶制品大約有60%是由芽孢桿菌屬生產(chǎn)的[2-3]。在芽孢桿

【相似文獻】

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2 林金鶯;曾慶祝;安琪;;枯草芽孢桿菌發(fā)酵火麻仁粕的研究[J];中國調味品;2011年08期

3 劉一龍;;用于枯草芽孢桿菌的反選改造方法[J];廣州化工;2012年12期

4 張蓓,王健,陳寧,張克旭,淺井博,方杰;枯草芽孢桿菌生產(chǎn)鳥苷的途徑分析(英文)[J];南開大學學報(自然科學版);2005年01期

5 董晨;曹娟;張跡;沈標;;耐高溫α-淀粉酶基因在枯草芽孢桿菌中的高效表達[J];應用與環(huán)境生物學報;2008年04期

6 歐昆鵬;謝和;;不同發(fā)酵條件對枯草芽孢桿菌產(chǎn)多糖的影響[J];貴州大學學報(自然科學版);2008年03期

7 沈躍麗;陳蕊;張莉;張充;趙海珍;陸兆新;;枯草芽孢桿菌生產(chǎn)抗菌物質的食品級發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化[J];食品科學;2014年09期

8 趙望鋒;周晶;;枯草芽孢桿菌產(chǎn)淀粉酶條件的優(yōu)化[J];湖北農(nóng)業(yè)科學;2011年11期

9 李忠玲;張強;馬齊;岳淑寧;張紅艷;胡云紅;秦濤;;產(chǎn)蛋白酶枯草芽孢桿菌的復壯及生產(chǎn)初步研究[J];中國釀造;2009年04期

10 黃宇;孫寶盛;孫井梅;張海豐;齊庚申;;枯草芽孢桿菌發(fā)酵條件的研究[J];河南科學;2007年01期

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1 杜云平;周慶豐;余國蓮;李小軍;梁健良;杜云平;周慶豐;余國蓮;李小軍;梁健良;畢英佐;;枯草芽孢桿菌發(fā)酵工藝的初步研究[A];第四屆第十次全國學術研討會暨動物微生態(tài)企業(yè)發(fā)展戰(zhàn)略論壇論文集(上冊)[C];2010年

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本文編號:1375993

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