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中溫α-淀粉酶基因在枯草芽孢桿菌中的高效表達及其發(fā)酵條件優(yōu)化

發(fā)布時間:2018-01-03 23:10

  本文關(guān)鍵詞:中溫α-淀粉酶基因在枯草芽孢桿菌中的高效表達及其發(fā)酵條件優(yōu)化 出處:《食品與發(fā)酵工業(yè)》2016年04期  論文類型:期刊論文


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【摘要】:以枯草芽孢桿菌為表達系統(tǒng),以中溫α-淀粉酶為目標蛋白,研究了啟動子和信號肽對外源蛋白表達分泌的影響。分別選取了4種啟動子以及8種信號肽來進行篩選,結(jié)果表明,啟動子PApr E的強度最高,信號肽SPnpr E的分泌效率最好。針對重組菌株1A751Q31進行系統(tǒng)的發(fā)酵優(yōu)化,在72 h發(fā)酵液中α-淀粉酶酶活達到380U/m L。在7.5 L發(fā)酵罐中進行放大實驗,發(fā)酵液中α-淀粉酶酶活最高達到853 U/m L。以上研究表明,α-淀粉酶適合在枯草芽孢桿菌中進行表達,同時表明枯草芽孢桿菌是良好的異源蛋白表達系統(tǒng)。
[Abstract]:The effects of promoter and signal peptide on the secretion of exogenous protein were studied by using Bacillus subtilis as expression system . Four promoters and eight signal peptides were selected for screening . The results showed that the highest intensity of the promoter PApr E and the best secretion efficiency of signal peptide SPnpr E . The results showed that the activity of 偽 - amylase reached 380 U / mL in 72 h fermentation broth . The results showed that 偽 - amylase was suitable to be expressed in Bacillus subtilis . The results showed that Bacillus subtilis was a good heterologous protein expression system .

【作者單位】: 天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院;中國科學(xué)院天津工業(yè)生物技術(shù)研究所;廣西科學(xué)院非糧生物質(zhì)酶解國家重點實驗室國家非糧生物質(zhì)能源工程技術(shù)研究中心;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(No.31370089,21446008,31400079) 廣西省科技支撐項目(14125008-2-22)
【分類號】:TQ925
【正文快照】: 芽孢桿菌屬中的革蘭氏陽性菌作為生產(chǎn)和分泌蛋白的微生物,在工業(yè)領(lǐng)域已經(jīng)被廣泛應(yīng)用[1]。芽孢桿菌屬作為工業(yè)微生物,擁有實用廉價的大規(guī)模生產(chǎn)系統(tǒng),其目標蛋白分泌量在培養(yǎng)基中可以達到20~25 g/L。目前市場上可以購買到的酶制品大約有60%是由芽孢桿菌屬生產(chǎn)的[2-3]。在芽孢桿

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2 林金鶯;曾慶祝;安琪;;枯草芽孢桿菌發(fā)酵火麻仁粕的研究[J];中國調(diào)味品;2011年08期

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6 歐昆鵬;謝和;;不同發(fā)酵條件對枯草芽孢桿菌產(chǎn)多糖的影響[J];貴州大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2008年03期

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1 杜云平;周慶豐;余國蓮;李小軍;梁健良;杜云平;周慶豐;余國蓮;李小軍;梁健良;畢英佐;;枯草芽孢桿菌發(fā)酵工藝的初步研究[A];第四屆第十次全國學(xué)術(shù)研討會暨動物微生態(tài)企業(yè)發(fā)展戰(zhàn)略論壇論文集(上冊)[C];2010年



本文編號:1375993

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