本文關鍵詞：鼠李糖乳桿菌D-乳酸脫氫酶基因ldhD的敲除　出處：《基因組學與應用生物學》2016年06期 　論文類型：期刊論文

  更多相關文章： 鼠李糖乳桿菌 L-乳酸 ldhD基因 同源重組 基因敲除

【摘要】：聚乳酸由可再生原料L-乳酸合成,是目前應用的最環(huán)保的生物塑料之一。鼠李糖乳桿菌JCM1553中的L-乳酸和D-乳酸,它們是由代謝途徑中的L-乳酸脫氫酶和D-乳酸脫氫酶分別催化丙酮酸而生成。L-乳酸的光學純度對于L-乳酸的應用至關重要。因此,為了獲取光學純的L-乳酸,需要敲除該鼠李糖乳桿菌編碼D-乳酸脫氫酶的基因ldhD以阻斷相關的D-乳酸代謝途徑。本研究采用pK18mobsacB自殺質(zhì)粒運用重疊延伸PCR和同源重組技術成功構建得到重組鼠李糖乳桿菌菌株JCM1553-△ldhD。構建的缺失突變體JCM1553-△ldhD菌株沒有引入外源基因,完全符合食品、藥品安全要求,發(fā)酵液中檢測到的L-乳酸含量為99.92%,光學純度達到99.84%,顯著優(yōu)于野生型菌株。
[Abstract]:Polylactic acid is synthesized by L- lactic acid from renewable raw materials. It is one of the most environmentally friendly bioplastics used at present. L- lactate and D- lactic acid from Lactobacillus rhamnophilus JCM1553 are catalyzed by L- lactate dehydrogenase and D- lactate dehydrogenase, respectively. The optical purity of L- lactic acid is very important for the application of L- lactic acid. Therefore, in order to obtain optically pure L- lactate, we need to knock out the gene ldhD encoding D- lactate dehydrogenase from Lactobacillus rhamnophilus to block the related D- lactic acid metabolic pathway. This study uses the pK18mobsacB plasmid Dutch act by overlap extension PCR and successfully construct the recombinant Lactobacillus rhamnosus strain JCM1553- ldhD homologous recombination technology. The construction of JCM1553- deletion mutant strain ldhD delta without introducing exogenous genes, in full compliance with the food and drug safety requirements, L- lactic acid content in fermentation broth was detected for 99.92%, the optical purity reached 99.84%, significantly higher than the wild type strain.
【作者單位】： 廣西科學院生物研究所;
【基金】：廣西自然科學基金青年基金項目(2013GXNSFBA019113)和面上項目(2015GXNSFAA139087)共同資助
【分類號】：Q78
【正文快照】： 乳酸是傳統(tǒng)精細化工產(chǎn)品,廣泛被應用于食品、醫(yī)藥、環(huán)保和化工加工等領域(D atta and H enry,2006)。乳酸具有旋光性,分為L-型和D-型。L-乳酸合成的聚L-乳酸,具有生物相溶性,能被人體降解代謝,不引起毒害作用;人體若過量攝入D-乳酸有可能導致代謝紊亂而中毒。聚L-乳酸在自然環(huán)

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本文編號：1344245