‘無(wú)籽’甌柑小孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂特性基因RAD51和MS1的表達(dá)差異分析
本文關(guān)鍵詞:‘無(wú)籽’甌柑小孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂特性基因RAD51和MS1的表達(dá)差異分析 出處:《浙江農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào)》2016年06期 論文類(lèi)型:期刊論文
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【摘要】:‘無(wú)籽’甌柑Citrus suavissima‘Seedless’是野生型甌柑Citrus suavissima的芽變,其花粉完全敗育,敗育起始于小孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂形成四分體時(shí)期。研究‘無(wú)籽’甌柑小孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂異常的分子機(jī)制,有利于深入認(rèn)識(shí)果樹(shù)芽變的發(fā)生機(jī)制。隨機(jī)選擇"無(wú)籽"甌柑和甌柑各3株,根據(jù)花蕾直徑采集花粉母細(xì)胞時(shí)期(Ⅰ),四分體時(shí)期(Ⅱ),單核花粉粒時(shí)期(Ⅲ),雙核花粉粒時(shí)期(Ⅳ)及花粉粒成熟期(Ⅴ)共5個(gè)時(shí)期的花蕾并分離花藥,利用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(q RT-PCR)分析減數(shù)分裂特性基因RAD51和MS1的相對(duì)表達(dá)量,3次重復(fù)。通過(guò)SPSS 16.0的最小顯著差法(LSD)在0.01水平上進(jìn)行各樣品間的相對(duì)表達(dá)量差異分析。結(jié)果表明:RAD51和MS1基因的表達(dá)高峰均集中在第Ⅰ時(shí)期和第Ⅱ時(shí)期,且此時(shí)花藥中的相對(duì)表達(dá)量均極顯著(P0.01)高于花蕾。第Ⅰ時(shí)期花藥中,‘無(wú)籽’甌柑RAD51的相對(duì)表達(dá)量為甌柑的3.7倍,MS1可達(dá)300倍;但同時(shí)期花蕾中,RAD51的相對(duì)表達(dá)量?jī)H1.1倍,MS1為140.0倍。‘無(wú)籽’甌柑RAD51基因在第Ⅰ時(shí)期和第Ⅱ時(shí)期的相對(duì)表達(dá)量極顯著(P0.01)高于甌柑,說(shuō)明‘無(wú)籽’甌柑小孢子母細(xì)胞和四分體時(shí)期的細(xì)胞內(nèi)均存在DNA受損現(xiàn)象;‘無(wú)籽’甌柑MS1基因在第Ⅰ時(shí)期的相對(duì)表達(dá)量極顯著(P0.01)高于甌柑,但第Ⅱ時(shí)期極顯著(P0.01)低于甌柑,推測(cè)‘無(wú)籽’甌柑敗育花粉的形成與MS1基因表達(dá)紊亂引起油脂分泌、轉(zhuǎn)運(yùn)異常密切相關(guān)。
[Abstract]:'seedless Ougan' Citrus suavissima 'Seedless' is a wild type citrus suavissima Citrus suavissima mutant, the pollen abortion abortion completely, starting at meiosis of microspore mother cells was divided into four periods. "Study on the molecular mechanism of Seedless Ougan 'abnormal division of microspore mother cell meiosis, is conducive to in-depth understanding of the mechanism of fruit sport. Randomly selected "Seedless" mandarin orange and Mandarin Orange 3 strains, according to the collection of bud diameter pollen mother cell stage (I), (II) the four tetrad stage, mononuclear pollen stage (III), (IV) binucleate pollen stage and pollen mature stage (V) a total of 5 times bud and anther from, using real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (Q RT-PCR) expression analysis of meiotic identity genes RAD51 and MS1, repeated 3 times. The difference in the relative expression of all kinds of products was analyzed at the 0.01 level by the minimum significant difference method (LSD) of SPSS 16. The results showed that the peak of RAD51 and MS1 gene expression was concentrated in stage I and II, and the relative expression level of anther was very significant (P0.01) higher than that of buds. The first period of anther, 'seedless Ougan' the relative expression of RAD51 was 3.7 times of mandarinorange, MS1 up to 300 times; but in the same period in the flower buds, the relative expression of RAD51 is only 1.1 times, 140 times MS1. 'seedless Ougan' RAD51 gene in the first period and the second period of relative expression was significantly higher than that of mandarin orange (P0.01), that "there were damaged DNA seedless Ougan 'microsporocyte tetrad stage and four cells;' seedless Ougan 'MS1 gene in 1 during the period of relative expression was significantly higher than that of mandarin orange (P0.01), but the second period was significantly lower (P0.01) Ougan, that' seedless Ougan 'abortive formation and expression of MS1 gene in pollen fertility disorder caused by oil secretion, transport is closely related to the abnormal.
【作者單位】: 浙江農(nóng)林大學(xué)亞熱帶森林培育國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地;浙江農(nóng)林大學(xué)浙江省農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)改良技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31000897) 浙江省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(Y3090494) 浙江省團(tuán)隊(duì)科技特派員服務(wù)計(jì)劃項(xiàng)目(浙科發(fā)農(nóng)〔2013〕215-122) 浙江省大學(xué)生科技創(chuàng)新活動(dòng)計(jì)劃項(xiàng)目(2016R412003)
【分類(lèi)號(hào)】:S666.1
【正文快照】: (1.The Nurturing Station for the State Key Laboratory of Subtropical Silviculture,Zhejiang AF University,Lin’an311300,Zhejiang,China;2.The Key Laboratory for Quality Improvement of Agriculture Products of Zhejiang Province,Zhejiang AF University,Lin’
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,本文編號(hào):1341006
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