擬南芥CYCD3;1基因植物表達(dá)載體的構(gòu)建及在煙草中的遺傳轉(zhuǎn)化分析
本文關(guān)鍵詞:擬南芥CYCD3;1基因植物表達(dá)載體的構(gòu)建及在煙草中的遺傳轉(zhuǎn)化分析 出處:《安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)》2016年06期 論文類型:期刊論文
更多相關(guān)文章: At CYCD 周期蛋白 遺傳轉(zhuǎn)化 煙草
【摘要】:為了分析植物D型細(xì)胞周期蛋白在細(xì)胞周期中的作用,采用PCR方法從擬南芥花序中克隆出At CYCD3;1基因的全長(zhǎng)c DNA序列。該基因的開(kāi)放讀碼框?yàn)?131 bp,預(yù)測(cè)編碼376個(gè)氨基酸,蛋白質(zhì)的分子量為42701.6 Da,蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)為4.89。構(gòu)建植物表達(dá)載體p ROKII-At CYCD3;1,并利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的葉盤法將外源基因?qū)胍吧蜔煵葜小Mㄟ^(guò)PCR及q RT-PCR檢測(cè)顯示,At CYCD3;1成功插入煙草基因組并在轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)。表型觀察顯示轉(zhuǎn)基因株系與野生型株系相比主要表現(xiàn)為花冠寬度變大,花瓣和萼片長(zhǎng)度變長(zhǎng),果實(shí)變大,莖干彎曲,葉片卷曲,根尖細(xì)胞變小。綜上,擬南芥At CYCD3;1基因的過(guò)量表達(dá)影響了植物的生長(zhǎng)發(fā)育。
【作者單位】: 東北林業(yè)大學(xué)林木遺傳育種國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;東北林業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】:教育部新世紀(jì)優(yōu)秀人才支持計(jì)劃項(xiàng)目(NO.NCET-12-0808) 國(guó)家自然科學(xué)基金(31370661)共同資助
【分類號(hào)】:Q943.2
【正文快照】: 植物的發(fā)育伴隨著細(xì)胞分裂,而細(xì)胞周期活動(dòng)則能調(diào)控細(xì)胞分裂[1]。在植物中,CYCD的表達(dá)水平和活動(dòng)受激素與碳水化合物濃度的影響,這對(duì)植物細(xì)胞分裂過(guò)程具有重要的影響。CYCD屬于G1-S期的周期蛋白基因,它的表達(dá)主要在細(xì)胞周期的G1期與G1/S的轉(zhuǎn)折點(diǎn)[2]。Cyclins作為蛋白激酶的一
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