本文關(guān)鍵詞：外源NO對銅脅迫下小白菜SBPase基因表達特性及其光合速率的影響

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【摘要】：【目的】本研究通過克隆小白菜光合暗反應(yīng)中限制核酮糖-1,5-二磷酸(Ru BP)再生的關(guān)鍵酶景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶(sedoheptulose-1,7-bisphosphatase,SBPase)基因,分析銅脅迫及添加外源一氧化氮(NO)供體硝普鈉(SNP)緩解銅脅迫時該基因的表達情況,并將其與對應(yīng)處理下小白菜凈光合速率(Pn)的變化情況結(jié)合在一起進行分析,以期為全面了解外源NO緩解銅脅迫植物光合作用機理提供理論依據(jù)�！痉椒ā恳孕“撞似贩N"上海青"3~4片真葉大的幼苗為材料,采用RT-PCR技術(shù)克隆小白菜SBPase基因,銅處理濃度為200μmol/L,外源NO供體SNP濃度為300μmol/L,同時設(shè)置相關(guān)的4個對照組排除其他可能因素的干擾,在添加處理液后的0、4、8、12d上午九點測定各處理小白菜相同節(jié)位葉片的凈光合速率,并利用實時熒光定量PCR技術(shù)檢測在對應(yīng)的處理時間及對應(yīng)節(jié)位小白菜葉片中SBPase基因的表達情況。試驗環(huán)境條件為光照強度200μmol/(m~2·s),光周期12 h,溫度25℃/18℃�！窘Y(jié)果】1)克隆得到小白菜SBPase基因(Genbank登錄號:AHY18974.1),開放閱讀框為1182 bp,編碼393個氨基酸,蛋白質(zhì)分子量為42.34k D,理論等電點為5.85。2)序列分析表明其含有氧化還原活性位點,包含一個具有59個氨基酸殘基的葉綠體轉(zhuǎn)移肽序列。小白菜SBPase基因推導(dǎo)的氨基酸序列與其他物種中已分離的SBPase編碼的氨基酸序列具有很高的同源性。3)實時熒光定量PCR分析表明,SBPase基因在銅脅迫下的小白菜葉片中表達量下降,且隨著脅迫時間的延長下降程度加劇;而在銅脅迫的基礎(chǔ)上添加外源NO可以在一定程度上緩解銅脅迫引起的小白菜葉中SBPase基因表達量的下降。4)銅脅迫下小白菜葉片Pn顯著下降,且隨著脅迫時間的延長,Pn下降加劇,施加外源NO后Pn的下降得到一定程度的緩解,各處理下Pn的變化與SBPase基因表達量變化趨勢一致�！窘Y(jié)論】銅脅迫及在銅脅迫的基礎(chǔ)上添加外源NO后小白菜葉片中SBPase基因表達量的變化,可能是影響對應(yīng)條件下小白菜葉片的凈光合速率變化的原因之一。
【作者單位】： 福建農(nóng)林大學(xué)園藝學(xué)院;
【基金】：福建省大宗蔬菜產(chǎn)業(yè)體系(2012K83139294) 福建省自然科學(xué)基金(2012j01082) 福建農(nóng)林大學(xué)校重點建設(shè)項目(6112c0409)資助
【分類號】：S634.3
【正文快照】： 光合作用是植物生長發(fā)育的基礎(chǔ),它的強弱對于植物的生長、產(chǎn)量及抗逆性有著重要的影響。光合暗反應(yīng)又稱為卡爾文循環(huán),是高等植物碳固定的基本途徑,其反應(yīng)過程由Ru BP為起點至Ru BP再生結(jié)束。景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶(sedoheptulose-1,7-bisphosphatase)是限制光合作用卡爾文循

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