本文關(guān)鍵詞：Sox2基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建及轉(zhuǎn)Sox2基因綿羊骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞系的建立

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【摘要】：Sox2是多能干細(xì)胞的主要標(biāo)記之一,有研究發(fā)現(xiàn)高表達(dá)Sox2基因的神經(jīng)干細(xì)胞作為供體細(xì)胞進(jìn)行核移植時(shí)具有較高的重編程能力。本研究旨在通過對綿羊骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)Sox2基因進(jìn)行外源性增強(qiáng)表達(dá),以期提高其重編程能力,從而改善動(dòng)物體細(xì)胞克隆效率。試驗(yàn)提取綿羊胎兒生殖腺組織RNA,以其為模板克隆Sox2基因cDNA序列,裝入真核表達(dá)載體pEGFP-N1,構(gòu)建出pEGFP-N1-Sox2表達(dá)載體。經(jīng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入綿羊BMSC,經(jīng)G418與熒光標(biāo)記雙篩選后挑選單克隆并擴(kuò)增培養(yǎng)。測序鑒定表明,克隆得到綿羊Sox2基因CDS區(qū)全長,重組質(zhì)粒構(gòu)建成功;熒光檢測表明,成功建立表達(dá)Sox2基因的綿羊BMSC系。本研究得到了高表達(dá)Sox2基因的綿羊BMSC系,為提高體細(xì)胞克隆過程中的重編程效率提供了新思路。
【作者單位】： 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;內(nèi)蒙古自治區(qū)生物制造重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：內(nèi)蒙古自然科學(xué)基金重大資助項(xiàng)目(2012zd03)
【分類號】：S826
【正文快照】： 分子育種已成為現(xiàn)代家畜遺傳育種的重要方法。傳統(tǒng)的育種方法培育周期很長,即使改良單一性狀也要花費(fèi)很長時(shí)間,先進(jìn)的育種技術(shù)和方法是提高蒙古羊遺傳素質(zhì)的有效手段。其中轉(zhuǎn)基因技術(shù)育種可以避開物種間雜交不育的生殖隔離,在較短時(shí)期內(nèi)培育出常規(guī)方法不能育成或難以育成的動(dòng)

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1 曾柳根;徐靈;王軍花;盛軍慶;辜清;彭扣;洪一江;;池蝶蚌Sox2基因在不同組織及不同月齡精巢中的表達(dá)[J];水生生物學(xué)報(bào);2012年02期

2 張會娜;劉慶友;劉帥;路新梅;鄧彥飛;羅嬋;石德順;崔奎青;;水牛SOX2基因5′調(diào)控序列的克隆與功能分析[J];中國畜牧獸醫(yī);2013年01期

3 趙健靈;安鐵洙;張志人;王子竹;樸善花;王春生;;綿羊Sox2基因逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的構(gòu)建與檢測[J];中國畜牧獸醫(yī);2012年05期

4 劉平;張昀;鄭喜邦;李恭賀;岑小妹;岳磊磊;宗自杰;盧晟盛;盧克煥;張明;;山羊SOX2多克隆抗體制備[J];中國農(nóng)業(yè)科學(xué);2012年01期

5 伏彭輝;石德順;鄧彥飛;劉金鳳;劉慶友;;水牛iPS細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子Sox2及協(xié)助蛋白HA2-TAT的原核表達(dá)[J];中國獸醫(yī)學(xué)報(bào);2011年08期

6 饒家輝;周虛;;干細(xì)胞中兩個(gè)關(guān)鍵細(xì)胞因子Oct4和Sox2[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2012年03期

7 ;[J];;年期

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1 樓小燕;SOX2對卵巢癌轉(zhuǎn)移、耐藥的影響及卵巢癌靶標(biāo)多肽篩選[D];浙江大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 趙健靈;綿羊Oct4人工合成與Sox2克隆及逆轉(zhuǎn)錄病毒載體構(gòu)建[D];東北林業(yè)大學(xué);2012年

2 武洋;Sox2和Cdx2基因編碼蛋白在胃癌及癌前病變中的表達(dá)及意義[D];中國醫(yī)科大學(xué);2008年

3 張利云;轉(zhuǎn)錄因子SOX2、Oct4在食管癌中的表達(dá)及其相互關(guān)系[D];延安大學(xué);2012年

4 林明星;轉(zhuǎn)錄因子OCT4和SOX2在胃癌中表達(dá)的研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2009年

5 鄒熠;具有神經(jīng)內(nèi)分泌特征胃癌的病理學(xué)形態(tài)學(xué)觀察及Sox2基因單位點(diǎn)突變分析[D];福建醫(yī)科大學(xué);2013年

6 曾岳岳;干細(xì)胞因子SOX2在胃癌中的表達(dá)及其作用機(jī)理的研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2012年

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本文編號：1283021