果膠乙酰酯酶基因AtPAE11參與擬南芥對大豆疫霉菌非寄主抗性的研究
發(fā)布時間:2017-12-06 01:21
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【摘要】:大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)屬于卵菌,是一類進(jìn)化地位和致病機(jī)理與真菌不同的真核微生物,引起大豆根莖腐爛,在世界范圍內(nèi)常給大豆生產(chǎn)造成毀滅性損失。植物的非寄主抗病性是自然界中一種非常普遍的現(xiàn)象,是指某種植物的所有個體對某種病原菌的所有生理小種表現(xiàn)的抗性,具有廣譜性和持久性的特點(diǎn)。鑒于非寄主抗性可能具有抗病廣譜性和持久性的特點(diǎn),本研究以大豆疫霉菌及其非寄主植物擬南芥為研究材料,利用基因沉默、T-DNA插入突變體分析和qRT-PCR等實(shí)驗(yàn)方法,探索病原卵菌-植物非寄主互作的機(jī)理。以實(shí)驗(yàn)室前期初步確認(rèn)的一個感病突變體1822為基礎(chǔ),通過接菌分析果膠乙酰酯酶基因AtPAE11 3個不同的T-DNA插入突變體,確認(rèn)AtPAE11介導(dǎo)擬南芥對大豆疫霉菌的非寄主抗性;通過遺傳互補(bǔ)實(shí)驗(yàn),在AtPAE11突變體1822中表達(dá)AtPAE11,恢復(fù)其對大豆疫霉菌的非寄主抗性;利用RNA沉默技術(shù),通過制備AtPAE11表達(dá)顯著降低的擬南芥轉(zhuǎn)化株,進(jìn)一步確認(rèn)其介導(dǎo)植物對大豆疫霉菌的非寄主抗性;通過qRT-PCR分析發(fā)現(xiàn),AtPAE11突變體1822和RNA沉默轉(zhuǎn)化子中AtMPK3(mitogen-activated protein kinase 3)轉(zhuǎn)錄水平下調(diào);DAB染色實(shí)驗(yàn)表明,活性氧迸發(fā)(ROS burst)參與擬南芥對大豆疫霉菌的非寄主抗性;谝陨辖Y(jié)果,初步確定擬南芥果膠乙酰酯酶基因AtPAE11通過AtMPK3調(diào)控ROS迸發(fā)參與對大豆疫霉菌的非寄主抗性。
【學(xué)位授予單位】:西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:S435.651
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2 王良華;丁國云;王源超;鄭小波;;大豆疫霉菌檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J];植物檢疫;2006年06期
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5 李麗s,
本文編號:1256886
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