RNA干擾沉默KAT基因?qū)γ鄯浜铣?0-HDA的影響
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【摘要】:合成KAT基因的雙鏈RNA,在蜜蜂體內(nèi)進(jìn)行RNA干擾,利用半定量RT-PCR技術(shù)和高效液相色譜法,分別檢測(cè)RNA干擾后KAT基因的表達(dá)量和蜜蜂10-HDA的合成量,初步探討沉默KAT基因與蜜蜂合成10-HDA的關(guān)系。結(jié)果顯示,在蜜蜂體內(nèi)注射2μl的ds KAT其成活率最高,且注射5天后,與空白組相比,KAT基因的表達(dá)量最低,蜜蜂頭部10-HDA的合成量降低效果顯著(P0.05),蜜蜂上顎腺表面腺體相對(duì)干癟、疏松。成功實(shí)現(xiàn)了蜜蜂體內(nèi)KAT基因的沉默,且初步推測(cè)出KAT基因參與10-HDA的合成途徑,闡明了KAT基因與蜜蜂合成10-HDA的關(guān)系。這為利用RNA干擾技術(shù)分析其他蜜蜂基因功能提供了借鑒,為進(jìn)一步完善10-HDA的生物合成途徑奠定了基礎(chǔ),為通過(guò)提高基因表達(dá)量來(lái)提高10-HDA的產(chǎn)量提供了依據(jù)。
【作者單位】: 齊魯工業(yè)大學(xué)生物工程學(xué)院;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(31201281,31171727) 山東省優(yōu)秀中青年科學(xué)家科研獎(jiǎng)勵(lì)基金計(jì)劃(BS2013SW029)資助項(xiàng)目
【分類(lèi)號(hào)】:Q789
【正文快照】: RNAi(RNA interference)即RNA干擾,是外源或內(nèi)源的雙鏈RNA(double-stranded RNA,dsRNA)分子在mRNA水平上關(guān)閉相應(yīng)基因序列的表達(dá)使其沉默的現(xiàn)象。它主要通過(guò)人為地引入與內(nèi)源靶基因具有相同序列的dsRNA,從而誘導(dǎo)內(nèi)源靶基因mRNA的降解,達(dá)到靶基因沉默的目的[1]。RNAi技術(shù)在研究
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,本文編號(hào):1253042
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