本文關(guān)鍵詞：茶樹丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶基因的克隆與表達分析

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【摘要】：丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(Alanine Aminotransferase,Ala AT)是與碳氮代謝相關(guān)的一種重要酶類。采用反轉(zhuǎn)錄PCR的方法克隆了茶樹Cs Ala AT1的c DNA序列,該序列全長1 747 bp,包含一個完整的ORF(1 626 bp),編碼541個氨基酸,推導(dǎo)的蛋白質(zhì)分子量為59.4 k D,理論等電點(p I)為5.82。同源比對結(jié)果表明,Cs Ala AT1含有丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶亞家族保守的輔酶磷酸吡哆醛結(jié)合位點,其氨基酸序列與擬南芥At Ala AT1蛋白的相似性為84%。二級結(jié)構(gòu)預(yù)測顯示該蛋白由α-螺旋(40.67%)、無規(guī)則卷曲(29.57%)、β-折疊(13.68%)和延伸鏈(16.08%)組成,定位于線粒體,不含信號肽與跨膜結(jié)構(gòu)。實時熒光定量PCR(RT-PCR)檢測發(fā)現(xiàn)Cs Ala AT1在茶樹各組織中均有表達,在根中的表達量最高;Cs Ala AT1基因表達對氮素的響應(yīng)研究表明,成熟葉中Cs Ala AT1受氮素誘導(dǎo)上調(diào)表達,高濃度(1 mmol·L-1 NH4NO3)氮素的誘導(dǎo)效應(yīng)比低濃度(0.1 mmol·L-1 NH4NO3)氮素誘導(dǎo)效應(yīng)更強烈;在根中,處理24 h后,高氮誘導(dǎo)Cs Ala AT1上調(diào)表達,低氮誘導(dǎo)Cs Ala AT1下調(diào)表達。
【作者單位】： 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所/國家茶樹改良中心/農(nóng)業(yè)部茶樹生物學(xué)與資源利用重點實驗室;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31570695) 國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(nycytx-23) 浙江省農(nóng)業(yè)新品種選育重點專項(2012C2905-4)
【分類號】：S571.1;Q943.2
【正文快照】： 氮素是植物生長發(fā)育過程中需求量最大的礦質(zhì)元素,氮素供應(yīng)不足會嚴重影響農(nóng)作物的產(chǎn)量。為了保證產(chǎn)量,在現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過程中往往施用大量氮肥。但是大多數(shù)農(nóng)作物對氮肥的利用率只有三分之一,其余因流失而造成環(huán)境污染[1]。因此借助基因工程手段培育氮高效利用品種,成為降低氮

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本文編號：1250904