本文關鍵詞：豬流行性腹瀉病毒的分離鑒定及N基因序列分析

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【摘要】：【目的】了解引起仔豬腹瀉的豬流行性腹瀉病毒是否為變異株�！痉椒ā繌囊伤曝i流行性腹瀉病毒感染的豬場采集死亡仔豬的腸黏膜及其內容物,將病料常規(guī)處理后接種VERO細胞,采用維持培養(yǎng)液加10μg/mL的胰酶的方法分離培養(yǎng)。用RT-PCR、間接免疫熒光、動物回歸實驗以及部分序列分析等方法對分離株進行鑒定�！窘Y果】病料在接入細胞第一代即出現病變,細胞腫脹變圓,形成合胞體,逐漸脫落,細胞病變明顯。隨著病毒傳代次數的增加,細胞病變逐漸穩(wěn)定,進行RT-PCR檢測、間接免疫熒光檢測以及動物回歸實驗,最終確定分離株符合PEDV特征,并命名為BJ2015,測定毒株的TCID50為10-6.4/0.1mL�；驕y序結果顯示,N基因長1 329bp,編碼442個氨基酸。與參考株N基因核苷酸序列比對及遺傳進化分析表明,BJ2015與傳統(tǒng)株CV777親緣關系較遠;與流行變異株BJ-2011-1N基因在進化樹的同一個分支上,二者的核苷酸和氨基酸同源性分別為99.6%、99.5%,表明BJ2015與BJ-2011-1親緣關系較近�！窘Y論】結果表明BJ2015為PEDV流行性變異毒株。
【作者單位】： 獸醫(yī)學(中醫(yī)藥)北京市重點實驗室/北京農學院動物科學技術學院;
【基金】：“十二五”國家科技支撐計劃項目重點課題“畜禽呼吸;消化系統(tǒng)常見病證中獸藥創(chuàng)制及應用示范(2011BAD34B01)” 2016北京市農委課題“功能復合型微生態(tài)添加劑示范與推廣(PXM2016-014207-000057)”
【分類號】：S852.651
【正文快照】： 豬流行性腹瀉(Porcine epidemic diarrhea,PED)是由冠狀病毒屬豬流行性腹瀉病毒(Porcine epi-demic diarrhea Virus,PEDV)引起的一種豬的腸道傳染病,主要表現為豬的腹瀉、嘔吐、脫水及高發(fā)病率和高致死率,不同年齡段、不同性別以及不同品系的豬均能感染PEDV,尤其以哺乳仔豬的

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