野生型rLj-RGD3基因重組突變體rLj-112分子克隆及對HeLa細胞活性影響
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【摘要】:為研究突變體r Lj-112蛋白的抗腫瘤活性,人工合成七鰓鰻野生型r Lj-RGD3蛋白和突變型r Lj-112蛋白,通過比較兩種蛋白質(zhì)的抗增殖、遷移和促凋亡的活性,確定突變體r Lj-112蛋白的生物學(xué)意義及地位。采用MTT方法檢測不同濃度的r Lj-112蛋白對He La細胞增殖的抑制作用。結(jié)果表明,r Lj-112蛋白能顯著抑制He La細胞的增殖,且IC50為4.3μmol/L。使用Transwell細胞培養(yǎng)板對b FGF誘導(dǎo)的He La細胞遷移實驗表明,r Lj-112蛋白能抑制He La細胞的遷移。r Lj-112蛋白作用后,He La細胞經(jīng)Hoechst33258和Annexin V-FITC染色結(jié)果顯示,細胞均凋亡。流式細胞儀進一步證明,r Lj-112蛋白能誘導(dǎo)He La細胞發(fā)生凋亡,且呈劑量依賴性。由此可見,與野生型r Lj-RGD3蛋白比較,突變型r Lj-112蛋白有較高的細胞毒性作用,具有抗腫瘤的功能,有望應(yīng)用于抗腫瘤基因工程藥物的開發(fā),具有重要的生物學(xué)意義。
【作者單位】: 遼寧師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;沈陽軍區(qū)總醫(yī)院急診醫(yī)學(xué)部全軍重癥(戰(zhàn))創(chuàng)傷救治中心實驗室;牡丹江醫(yī)學(xué)院附屬二院消化內(nèi)科;
【基金】:國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃(863計劃,No.2014AA093502) 國家自然科學(xué)基金(No.30770297) 國家海洋公益項目(No.201305016-5) 大連市科技攻關(guān)項目(No.2014E12SF067)~~
【分類號】:R73-3;Q78
【正文快照】: *聯(lián)系人Tel:010-85827097;E-mail:jihongwang999@hotmail.com**并列第一作者Received:July 24,2015;Accepted:November 8,2015Supported by National High Technology Research and Development Program of China(863 Program,No.2014AA093502),National Natural ScienceFound
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