垂體腫瘤轉(zhuǎn)化基因1對結(jié)腸癌SW480細(xì)胞增殖的影響及其機(jī)制研究
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【摘要】:目的研究垂體腫瘤轉(zhuǎn)化基因1(Pituitary Tumor Tansforming Gene1,PTTG1)過表達(dá)對人結(jié)腸癌細(xì)胞SW480增殖和周期的影響及其可能機(jī)制。方法采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將pc DNA3.1(+)-PTTG1及空載pc DNA3.1(+)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染人結(jié)腸癌SW480細(xì)胞,G418法篩選陽性克隆。Western blot法檢測PTTG1和cyclin D、cyclin E、p21的表達(dá)。MTT法檢測細(xì)胞增殖,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期。結(jié)果 (1)成功獲得PTTG1高表達(dá)的SW480細(xì)胞pc DNA3.1(+)-PTTG1及對照pc DNA3.1(+)細(xì)胞,Western blot結(jié)果顯示pc DNA3.1(+)-PTTG1細(xì)胞PTTG1表達(dá)量分別為pc DNA3.1(+)細(xì)胞和SW480細(xì)胞的3.58倍和3.42倍;(2)過表達(dá)PTTG1基因后,SW480細(xì)胞周期改變,G0/G1期細(xì)胞減少而S期和G2/M期細(xì)胞增加;細(xì)胞周期調(diào)控蛋白cyclin D和cyclin E表達(dá)升高,p21表達(dá)降低;SW480細(xì)胞增殖顯著性加快。(3)過表達(dá)PTTG1基因后,SW480細(xì)胞中PI3K/AKT信號活化增強(qiáng),使用PI3K/AKT信號抑制劑LY29400干預(yù)后,細(xì)胞增殖減弱,周期蛋白cyclin D和cyclin E表達(dá)降低,p21表達(dá)升高。結(jié)論 PTTG1基因過表達(dá)可能通過活化PI3K/AKT信號加速SW480細(xì)胞從G1期向S期的轉(zhuǎn)化促進(jìn)細(xì)胞增殖,提示PTTG1蛋白可能成為結(jié)腸癌治療的一個潛在靶點(diǎn)。
【作者單位】: 三峽大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院;宜昌市中心人民醫(yī)院;
【基金】:湖北省自然科學(xué)基金(2014CFB307)
【分類號】:R735.35
【正文快照】: 結(jié)腸癌是常見胃腸道腫瘤,流行病學(xué)研究認(rèn)為結(jié)腸癌的發(fā)病與社會環(huán)境、生活方式(尤其是飲食習(xí)慣、缺乏體力活動)、遺傳因素有關(guān)。但截止到目前,結(jié)腸癌的發(fā)病機(jī)制仍未闡明,有待進(jìn)一步研究。垂體腫瘤轉(zhuǎn)化基因1(Pituitary Tumor Tansforming Gene1,PTTG1)是一種新的癌基因,體外培養(yǎng)
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