本文關(guān)鍵詞：逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)shRNA抑制Mig-7基因?qū)θ烁伟┘?xì)胞血管生成擬態(tài)及體外侵襲轉(zhuǎn)移的抑制作用

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【摘要】：目的探討逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的短發(fā)夾RNA(shRNA)干擾遷移誘導(dǎo)基因7(Mig-7)對肝細(xì)胞癌(HCC)細(xì)胞血管生成擬態(tài)(VM)形成及體外侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響。方法設(shè)計2條Mig-7 m RNA寡核苷酸序列(Mig-7 shRNA-1,Mig-7 shRNA-2)和1條作為負(fù)對照的無關(guān)序列(Mig-7 shRNA-N)。構(gòu)建Mig-7shRNA逆轉(zhuǎn)錄病毒表達載體質(zhì)粒,并將要接受轉(zhuǎn)染的人肝癌細(xì)胞MHCC-97H分為6組:轉(zhuǎn)染Mig-7 shRNA-1組;轉(zhuǎn)染Mig-7 shRNA-2組;轉(zhuǎn)染Mig-7 shRNA-N組;轉(zhuǎn)染空載質(zhì)粒組(Vector);重組人血管內(nèi)皮抑素(ES,商品名:恩度)組;MHCC-97H細(xì)胞對照組(Control)。半定量PCR、Western blot檢測其對Mig-7表達的影響;三維細(xì)胞培養(yǎng)觀察其對VM形成的影響;細(xì)胞間粘附實驗、Transwell侵襲實驗及遷移實驗觀察其對細(xì)胞粘附、侵襲及遷移能力的影響。結(jié)果轉(zhuǎn)染后,Mig-7 shRNA-1組與Mig-7 shRNA-2組中Mig-7 m RNA與蛋白的表達、MHCC-97H細(xì)胞形成VM能力、細(xì)胞侵襲、遷移能力明顯減低(P0.05),細(xì)胞間粘附能力明顯增加(P0.05);Mig-7 shRNA-N組、Vector組、ES組中MHCC-97H細(xì)胞Mig-7的表達、VM形成、細(xì)胞間粘附、遷移、侵襲能力較MHCC-97H細(xì)胞組均無明顯變化。結(jié)論逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的shRNA能夠有效下調(diào)Mig-7的表達并明顯抑制HCC細(xì)胞VM形成能力及侵襲轉(zhuǎn)移能力,增加細(xì)胞間的粘附作用;ES對HCC細(xì)胞的Mig-7表達、VM形成、侵襲轉(zhuǎn)移及粘附能力無明顯影響。
【作者單位】： 武警后勤學(xué)院附屬醫(yī)院腫瘤外科;西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院肝膽外科;錦州醫(yī)科大學(xué)武警后勤學(xué)院附屬醫(yī)院培養(yǎng)基地;武警后勤學(xué)院附屬醫(yī)院救援研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81272547)~~
【分類號】：R735.7
【正文快照】： Inhibitory effect of Mig-7 silencing by retrovirus-mediated sh RNA on vasculogenicmimicry,invasion and metastasis of human hepatocellular carcinoma cells in vitroQU Bo1,2,SHENG Guannan3,YU Fei3,CHEN Guannan3,LV Qi4,MAO Zhongpeng1,GUO Long2,LV Yi21Departm

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本文編號：1223421