本文關(guān)鍵詞：黃芩CHS基因的分子克隆、序列分析及其高效表達載體的構(gòu)建

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【摘要】：黃芩是一種傳統(tǒng)的中藥,黃芩苷是其重要的藥用成分之一,具有廣泛的藥理作用并被用于多種疾病的治療,具有巨大的藥用價值和經(jīng)濟價值。CHS是催化黃芩苷合成限速步驟的關(guān)鍵酶,其表達量對黃芩苷的積累起關(guān)鍵的作用。本研究利用基因工程的手段,構(gòu)建黃芩的CHS過表達載體,并將其導(dǎo)入根癌農(nóng)桿菌中,擬在黃芩中持續(xù)表達CHS,促進黃芩苷合成�；贜CBI上公布的黃芩基因信息,設(shè)計特異引物,通過RT-PCR技術(shù)擴增CHS的c DNA全長序列,并利用生物信息學(xué)軟件對序列進行分析,在引物兩端引入特異酶切位點,將目的序列CHS通過限制性內(nèi)切酶酶切和連接的方式,構(gòu)建載體p BI 121-35S-CHS。通過PCR和酶切的方法進行驗證,獲得黃芩CHS基因的高效表達載體,可直接用于黃芩的遺傳轉(zhuǎn)化,使CHS基因表達量增加,促進黃芩苷的合成。
【作者單位】： 廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81403044,81300035) 廣東省自然基金(2014A030310064)共同資助
【分類號】：Q943.2;S567.239
【正文快照】： Molecular Clone,Sequence Analysis and Expression Vector Constructionwith High Efficiency of CHS Gene from Scutellaria baicalensis GeorgiLi Guoming Lei Wei Shui Xiaorong*The Affiliated Hospital,Guangdong Medical College,Zhanjiang,524001*Corresponding auth

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本文編號：1221333