本文關(guān)鍵詞：甘蔗黃葉病毒與花葉病毒CP基因RNAi載體構(gòu)建與轉(zhuǎn)化甘蔗研究

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【摘要】：甘蔗黃葉病和甘蔗花葉病是我國甘蔗最主要的病毒病,感病品種產(chǎn)量下降和品質(zhì)變劣,傳統(tǒng)方法難以防治。RNA干擾技術(shù)使培育抗病毒甘蔗品種成為可能。本研究根據(jù)甘蔗黃葉病毒和侵染甘蔗的高粱花葉病毒結(jié)構(gòu)與功能特性,廣泛收集不同來源病毒分離物CP基因序列,經(jīng)過比對選取保守序列作為干擾序列。通過在序列兩端添加酶切位點,合成并連接成雙價甘蔗黃葉病和花葉病毒干擾序列,然后構(gòu)建到中間載體p HANNIBAL上,形成雙價RNAi干擾結(jié)構(gòu),最后插入到p ART27上形成干擾表達載體。利用基因槍轟擊甘蔗品種福農(nóng)15號愈傷組織進行轉(zhuǎn)化,經(jīng)G418篩選獲得抗性再生植株。通過提取DNA和RNA分析,證實雙價RNAi干擾結(jié)構(gòu)不僅以不同拷貝整合到甘蔗基因組中,而且得到了轉(zhuǎn)錄表達。
【作者單位】： 福建農(nóng)林大學農(nóng)業(yè)部福建甘蔗生物學與遺傳育種重點實驗室國家甘蔗工程技術(shù)中心農(nóng)業(yè)部甘蔗及制品質(zhì)檢中心轉(zhuǎn)基因檢測室;
【基金】：國家自然科學基金項目(No.31070330) 福建省自然科學基金(No.2014J01092)
【分類號】：S435.66
【正文快照】： 甘蔗是全世界最重要的糖料和能源作物[1]。甘蔗花葉病和黃葉病是甘蔗生產(chǎn)上最為普遍的兩種病毒病害[2-3]。我國的甘蔗花葉病多數(shù)情況下是由高粱花葉病毒(Sorghum moaic virus,Sr MV)侵染引起[4],主要破壞甘蔗葉綠體,對甘蔗產(chǎn)量和含糖量造成嚴重損失[5],黃葉病不僅可造成甘蔗產(chǎn)

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