本文關(guān)鍵詞：基于質(zhì)譜檢測轉(zhuǎn)基因生物外源蛋白質(zhì)的消化穩(wěn)定性

  更多相關(guān)文章： 轉(zhuǎn)基因生物 消化穩(wěn)定性 質(zhì)譜 外源蛋白CryAb/Ac 無標(biāo)記定量

【摘要】：基于無標(biāo)記定量質(zhì)譜檢測技術(shù)建立了一種新的轉(zhuǎn)基因生物外源蛋白質(zhì)消化穩(wěn)定性評價方法。以牛β-乳球蛋白、牛血清白蛋白和大豆胰蛋白酶抑制劑為標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì),經(jīng)模擬人體胃/腸消化液消化后進(jìn)行凝膠電泳分離,切取目標(biāo)蛋白質(zhì)條帶進(jìn)行酶切,提取肽段進(jìn)行納升液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜分析�；贛ascot數(shù)據(jù)庫檢索鑒定目標(biāo)蛋白質(zhì)。計算各消化時間點(diǎn)蛋白質(zhì)匹配肽段數(shù)與消化前蛋白質(zhì)匹配肽段數(shù)的比值,當(dāng)比值≤0.50時判斷為目標(biāo)蛋白質(zhì)在該時間段內(nèi)已消化。將此方法應(yīng)用于轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻"華恢1號"外源蛋白Cry1Ab/1Ac的消化穩(wěn)定性分析,結(jié)果顯示在模擬胃液中消化2 min時,比值下降到0.50以下,在模擬腸液中消化15 s后比值下降到0.50以下,表明該蛋白在胃/腸消化液中具有消化不穩(wěn)定性。
【作者單位】： 中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物醫(yī)學(xué)分析中心;
【基金】：國家科技重大專項(2014ZX08011007;2016ZX08011007) 國家重大科學(xué)儀器設(shè)備開發(fā)專項(2012YQ180117)
【分類號】：O657.63;TS201.21
【正文快照】： 引文格式:毛R，

本文編號：1204765