本文關(guān)鍵詞：基于質(zhì)譜檢測轉(zhuǎn)基因生物外源蛋白質(zhì)的消化穩(wěn)定性

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【摘要】：基于無標記定量質(zhì)譜檢測技術(shù)建立了一種新的轉(zhuǎn)基因生物外源蛋白質(zhì)消化穩(wěn)定性評價方法。以牛β-乳球蛋白、牛血清白蛋白和大豆胰蛋白酶抑制劑為標準蛋白質(zhì),經(jīng)模擬人體胃/腸消化液消化后進行凝膠電泳分離,切取目標蛋白質(zhì)條帶進行酶切,提取肽段進行納升液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜分析。基于Mascot數(shù)據(jù)庫檢索鑒定目標蛋白質(zhì)。計算各消化時間點蛋白質(zhì)匹配肽段數(shù)與消化前蛋白質(zhì)匹配肽段數(shù)的比值,當比值≤0.50時判斷為目標蛋白質(zhì)在該時間段內(nèi)已消化。將此方法應用于轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻"華恢1號"外源蛋白Cry1Ab/1Ac的消化穩(wěn)定性分析,結(jié)果顯示在模擬胃液中消化2 min時,比值下降到0.50以下,在模擬腸液中消化15 s后比值下降到0.50以下,表明該蛋白在胃/腸消化液中具有消化不穩(wěn)定性。
【作者單位】： 中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院生物醫(yī)學分析中心;
【基金】：國家科技重大專項(2014ZX08011007;2016ZX08011007) 國家重大科學儀器設備開發(fā)專項(2012YQ180117)
【分類號】：O657.63;TS201.21
【正文快照】： 引文格式:毛R，

本文編號：1204765