本文關鍵詞：多年生黑麥草LpGCS基因克隆及其在煙草中的初步功能驗證

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【摘要】：本研究以多年生黑麥草‘高帽2號’葉片為試材,根據(jù)同源基因的CDS序列設計簡并引物,采用RT-PCR和RACE技術,克隆了多年生黑麥草γ-谷氨�；腚装彼岷铣擅富騆pGCS。該基因全長為1674bp(GenBank登錄號:KJ551844),具有完整的開放閱讀框(ORF),共1125bp;對其氨基酸序列特性、結構以及與其他8種同源基因氨基酸序列間的同源性進行了研究,預測該蛋白分子量為42.86kDa,屬于不穩(wěn)定類蛋白質,其蛋白質二級結構以α-螺旋為主;蛋白質氨基酸序列與其他8種同源基因氨基酸序列間同源性都比較高;此外,成功構建了該基因的正、反義植物表達載體pCAMBIA-Ubi-LpGCS+和pCAMBIA-Ubi-LpGCS-,并通過農桿菌介導法獲得轉正、反義基因煙草。對轉基因植株和野生型煙草進行鎘離子脅迫試驗,生理生化指標測試結果表明鎘離子脅迫處理10d后,轉LpGCS+植株中MDA含量低于野生型,光合色素含量與POD、SOD、CAT活性均高于野生型;而轉LpGCS-植株中MDA含量高于野生型,光合色素含量與POD、SOD、CAT活性均低于野生型。綜上所述,LpGCS基因在煙草中的過量表達可以提高植株的耐鎘脅迫能力,為進一步利用該基因轉化多年生黑麥草培育抗重金屬植株奠定基礎。
【作者單位】： 中國林業(yè)科學研究院林業(yè)研究所國家林業(yè)局林木培育重點實驗室;
【基金】：國家863項目(2011AA10020902)資助
【分類號】：S543.6;Q943.2
【正文快照】： 在植物抗氧化系統(tǒng)中,谷胱甘肽(glutathione,GSH)是植物應對活性氧引起的氧化破壞中最為重要的細胞內物質,其在硫的運輸調控、信號轉導、代謝物質的結合、外源化學物質的解毒[1]和一些植物懸浮培養(yǎng)細胞和葉片中脅迫響應基因(例如,PR1,GST,GPX,CHS,PAL,SOD等)的表達中起到了重要

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1 崔延棠,尉亞輝,慕東;激光輻照多年生黑麥草種子的生物學效應初探[J];西北大學學報(自然科學版);2002年05期

2 ;[J];;年期

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本文編號：1189527