雙價(jià)抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻的育成及初步鑒定
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【摘要】:【目的】構(gòu)建雙價(jià)抗蟲基因表達(dá)載體并轉(zhuǎn)化水稻,為選育廣譜、高抗轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻提供技術(shù)參考!痉椒ā繕(gòu)建半夏凝集素基因(pta)和蘇云金桿芽孢菌基因(Bt)兩個(gè)抗蟲基因的雙價(jià)表達(dá)載體p CAMBIA1301-Bt-pta,利用大腸桿菌DH5α和根癌農(nóng)桿菌LBA4404轉(zhuǎn)化水稻恢復(fù)系輻恢838,同時(shí)對(duì)轉(zhuǎn)化植株進(jìn)行GUS染色及PCR鑒定!窘Y(jié)果】以構(gòu)建的雙價(jià)植物表達(dá)載體p CAMBIA1301-Bt-pta為模板,PCR擴(kuò)增到pta基因的部分片段,大小為807 bp,且該載體經(jīng)HindⅢ酶切后,能得到15854 bp的中間載體p CAMBIA1301-Bt片段和2046 bp的pta基因片段。對(duì)轉(zhuǎn)化植株進(jìn)行GUS染色,得到3株轉(zhuǎn)基因陽(yáng)性植株,經(jīng)PCR鑒定結(jié)果顯示外源基因已成功導(dǎo)入水稻。【結(jié)論】通過(guò)構(gòu)建雙價(jià)抗蟲基因表達(dá)載體并轉(zhuǎn)化水稻,成功獲得的轉(zhuǎn)基因植株可用于水稻抗蟲轉(zhuǎn)基因恢復(fù)系及組合的研究,以提高其抗病蟲害能力。
【作者單位】: 貴州大學(xué)農(nóng)學(xué)院;貴州大學(xué)昆蟲研究所/貴州山地農(nóng)業(yè)病蟲害重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;西南大學(xué)水稻研究所/轉(zhuǎn)基因植物與安全控制重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:貴州省科技計(jì)劃項(xiàng)目(黔科合NY字[2011]3007號(hào))
【分類號(hào)】:S435.11
【正文快照】: 3西南大學(xué)水稻研究所/轉(zhuǎn)基因植物與安全控制重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,重慶400716)0引言【研究意義】水稻是最重要的糧食作物之一,世界上半數(shù)以上的人口以水稻為主食。蟲害是造成水稻減產(chǎn)的主要原因,據(jù)報(bào)道,田間水稻害蟲種類在(1Agricultural College,Guizhou University,Guiyang 5500
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,本文編號(hào):1163482
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