本文關(guān)鍵詞：一次性力竭運(yùn)動(dòng)對(duì)骨骼肌抗氧化防御功能和自噬相關(guān)基因表達(dá)的影響

  更多相關(guān)文章： 骨骼肌 自噬 T-SOD Cu-ZnSOD MnSOD MDA T-AOC Atg5 Atg7 LC-3 Beclin1 運(yùn)動(dòng)

【摘要】：細(xì)胞自噬(autophgy)簡稱自噬,是將細(xì)胞內(nèi)受損的細(xì)胞器、老化的蛋白質(zhì)等進(jìn)行降解、消化的過程,絕大多數(shù)真核細(xì)胞都存在此現(xiàn)象。通常來說,穩(wěn)定的細(xì)胞自噬有助于保持機(jī)體的穩(wěn)定狀態(tài),應(yīng)激時(shí)細(xì)胞自噬會(huì)被激活,吞噬有毒或致癌的物質(zhì),抑制細(xì)胞發(fā)生癌變；但過度自噬會(huì)損傷細(xì)胞并使機(jī)體紊亂。運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)細(xì)胞自噬的調(diào)控作用是雙向的,若運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練強(qiáng)度適宜,那么細(xì)胞自噬水平會(huì)上調(diào),降解由運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練積累的破損的細(xì)胞器和折疊錯(cuò)誤的蛋白質(zhì),為骨骼肌代謝提供一定的能量和合成過程中所需要的底物；若過度運(yùn)動(dòng),細(xì)胞自噬過度激活,從而過度降解細(xì)胞器、蛋白質(zhì)等,導(dǎo)致細(xì)胞損傷,甚至誘發(fā)自噬性細(xì)胞死亡。近幾年關(guān)于細(xì)胞自噬的研究越來越多,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞自噬對(duì)機(jī)體穩(wěn)定、細(xì)胞生成與代謝、組織重建與合成有重要意義,并且對(duì)機(jī)體抗氧化、抗衰老、神經(jīng)退行性變化、骨骼肌等相關(guān)疾病均有調(diào)控作用。目前,關(guān)于運(yùn)動(dòng)對(duì)骨骼肌自噬相關(guān)基因表達(dá)和抗氧化方面的研究意見并不一致。有人研究發(fā)現(xiàn),耐力運(yùn)動(dòng)增強(qiáng)骨骼肌抗氧化防御能力,同時(shí)激活骨骼肌自噬基因的表達(dá)；但也有相反的報(bào)道,耐力運(yùn)動(dòng)并不能引起大鼠骨骼肌自噬基因表達(dá)。為了進(jìn)一步了解運(yùn)動(dòng)對(duì)骨骼肌細(xì)胞自噬的影響,本課題通過運(yùn)動(dòng)干預(yù)探討骨骼肌自噬和抗氧化防御功能的變化,為合理制定運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練過程中的運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度和運(yùn)動(dòng)持續(xù)時(shí)間提供理論依據(jù)。目的：通過一次性力竭運(yùn)動(dòng)建立急性運(yùn)動(dòng)負(fù)荷模型,檢測ICR小鼠骨骼肌抗氧化功能的變化及其自噬相關(guān)基因Atg5、Atg7、LC-3和Beclin1表達(dá)水平的變化,進(jìn)一步闡述一次性力竭運(yùn)動(dòng)對(duì)骨骼肌抗氧化水平和自噬的影響機(jī)理,預(yù)期成果為合理安排運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練強(qiáng)度、疲勞恢復(fù)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù).方法：30只健康雄性ICR小鼠,4-5周齡,體重25.17±2.46g,隨機(jī)分為安靜對(duì)照組(Control)和一次性力竭運(yùn)動(dòng)組。其中,一次性力竭運(yùn)動(dòng)組又根據(jù)取材時(shí)間分為0h組、6h組、12h組和24h組。小鼠進(jìn)行適應(yīng)性跑臺(tái)運(yùn)動(dòng),速度20m/min,持續(xù)時(shí)間30mmin,共訓(xùn)練3天。正式訓(xùn)練時(shí)按照以下程序進(jìn)行：第1級(jí)負(fù)荷：速度10m/min，，運(yùn)動(dòng)15min；第2級(jí)負(fù)荷:15m/min,運(yùn)動(dòng)15min；第3級(jí)負(fù)荷：20m/min,然后運(yùn)動(dòng)組小鼠一直運(yùn)動(dòng)至力竭。力竭的標(biāo)準(zhǔn)：小鼠不能維持預(yù)設(shè)的速度,停留于跑道末端,用電刺激驅(qū)趕無反應(yīng)。采用Tecan Infinite M200酶標(biāo)儀測定骨骼肌T-SOD活性、Cu-ZnSOD活性、MnSOD活性、MDA含量、T-AOC含量。Real-time PCR測定小鼠骨骼肌自噬相關(guān)基因Atg5、Atg7、LC-3和Beclin1的mRNA表達(dá)水平。結(jié)果：①與對(duì)照組相比,運(yùn)動(dòng)后即刻(0h)、6h小鼠Atg5mRNA的mRNA表達(dá)水平有上升趨勢,12h、24h有下降趨勢,但均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；②與對(duì)照組相比,運(yùn)動(dòng)后即刻(0h)、6h小鼠Atg7mRNA的mRNA表達(dá)水平有上升趨勢,12h.24h有下降趨勢；在12h有極顯著性差異(p0.01),其余時(shí)間點(diǎn)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；③與對(duì)照組相比,運(yùn)動(dòng)后即刻(Oh)、12h、24h小鼠LC-3mRNA表達(dá)水平有下降趨勢,6h有上升趨勢,但均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；④與對(duì)照組相比,運(yùn)動(dòng)后即刻(Oh)、6h、24h小鼠Beclin1 mRNA表達(dá)水平有上升趨勢,12h有下降趨勢；在0h、6h有極顯著性差異(p0.01),其余時(shí)間點(diǎn)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；⑤與對(duì)照組相比,運(yùn)動(dòng)后即刻(0h)、6h、12h小鼠T-SOD活性有下降趨勢,24h與對(duì)照組一樣；在6h有顯著性差異(p0.05),其余時(shí)間點(diǎn)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；⑥與對(duì)照組相比,運(yùn)動(dòng)后即刻(Oh)、24h小鼠Cu-ZnSOD活性有上升趨勢,6h、12h有下降趨勢；在0h、6h有顯著性差異(p0.05),其余時(shí)間點(diǎn)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；⑦與對(duì)照組相比,運(yùn)動(dòng)后即刻(0h)小鼠MnSOD活性有上升趨勢,且有極顯著性差異(p0.01)；其余時(shí)間點(diǎn)均無變化也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；⑧與對(duì)照組相比,運(yùn)動(dòng)后即刻(0h)6h、12h、24h小鼠MDA含量均有下降趨勢,但均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)； ⑨與對(duì)照組相比,運(yùn)動(dòng)后即刻(0h)、6h、12h、24h小鼠TAOC含量均呈上升趨勢,且在6h、12h有顯著性差異(p0.05),在24h有極顯著性差異(p0.01)結(jié)論：①一次性力竭運(yùn)動(dòng)激活了小鼠骨骼肌自噬相關(guān)基因的表達(dá)；②在一次性力竭運(yùn)動(dòng)后小鼠骨骼肌的抗氧化防御功能是增強(qiáng)的。
【學(xué)位授予單位】：杭州師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R87

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