發(fā)布時(shí)間：2017-11-09 06:18

  本文關(guān)鍵詞：新基因GLUD2與早期胚胎發(fā)育的研究

  更多相關(guān)文章： 小鼠 遺傳分離比偏移 轉(zhuǎn)基因 GLUD2 α-酮戊二酸 早期胚胎發(fā)育

【摘要】：人類的出現(xiàn)伴隨著大量新基因的產(chǎn)生,其中包括由GLUD1通過(guò)反轉(zhuǎn)座產(chǎn)生的GLUD2 (glutamate dehydrogenase 2)谷氨酸脫氫酶(GDH)催化谷氨酸和α-酮戊二酸的相互轉(zhuǎn)化。α-酮戊二酸(α-ketoglutarate)是三羧酸循環(huán)中一種代謝中間物,對(duì)于調(diào)節(jié)機(jī)體能量代謝具有至關(guān)重要的作用,同時(shí)也是重要的輔助因子(cofactor)與之相關(guān)的加氧酶有60多種,功能涵蓋了膠原蛋白的合成、脂肪酸代謝、DNA修復(fù)、RNA和染色質(zhì)的修飾以及低氧環(huán)境的感受等等。盡管α-酮戊二酸在代謝中的作用已有廣泛研究,但其對(duì)于胚胎早期發(fā)育的影響及分子機(jī)制尚存在著許多未知。為深入了解新基因GLUD2的產(chǎn)生對(duì)人類的影響,我們首先制作了含有人類GLUD2基因的轉(zhuǎn)基因小鼠,結(jié)果發(fā)現(xiàn)其代謝情況雖然沒(méi)有明顯改變,但是生長(zhǎng)發(fā)育出現(xiàn)了嚴(yán)重的遲緩。通過(guò)液相層析-質(zhì)譜檢驗(yàn),我們發(fā)現(xiàn)GLUD2J、鼠體內(nèi)α-酮戊二酸含量升高,而谷氨酸的含量有所降低。通過(guò)檢測(cè)血清中小分子的含量,發(fā)現(xiàn)GLUD2小鼠血清中尿素、肌酐含量降低,尿酸、游離脂肪酸含量升高。有意思的是,對(duì)GLUD2轉(zhuǎn)基因小鼠與C57BL/6J小鼠交配產(chǎn)生的后代進(jìn)行統(tǒng)計(jì),發(fā)現(xiàn)GLUD2基因的傳遞比率偏離了正常的1：1比值,GLUD2基因型的小鼠數(shù)量少于WT鼠。進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)表明在胚胎發(fā)育第18.5天就已經(jīng)出現(xiàn)傳遞比率的偏離。然而通過(guò)父代睪丸形態(tài)學(xué)的觀察并未發(fā)現(xiàn)精子的異常及hGDH2蛋白表達(dá)的不對(duì)等分布。于是通過(guò)體外人工授精和胚胎培養(yǎng)的方法,我們又對(duì)胚胎發(fā)育第3.5天的囊胚進(jìn)行了基因型鑒定,發(fā)現(xiàn)在此時(shí)期GLUD2基因型的囊胚凋亡數(shù)增加(這部分統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)仍需要增加)。因此我們推測(cè)GLUD2基因可能在胚胎發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮作用,導(dǎo)致了陽(yáng)性轉(zhuǎn)基因的減少�？傊�,本論文的研究工作首次發(fā)現(xiàn)GLUD2基因是一個(gè)影響胚胎發(fā)育造成遺傳分離比偏移的基因,其具體的作用機(jī)制仍然有待進(jìn)一步研究。
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：Q344

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本文編號(hào)：1160648