小麥條銹菌果膠酶基因PsPL1的克隆與功能分析
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【摘要】:【目的】研究小麥條銹菌果膠酶基因PsPL1的功能,確定其在小麥條銹菌侵染過程中的作用,為揭示小麥與病原菌互作的分子機理奠定理論基礎(chǔ)!痉椒ā坷肦ACE技術(shù)擴增PsPL1基因全長,通過qRT-PCR對PsPL1的表達特征進行分析,并在酵母系統(tǒng)中驗證其編碼蛋白信號肽的分泌功能,最后通過HIGS技術(shù)沉默PsPL1基因,確定其在條銹菌侵染小麥過程中的作用。【結(jié)果】克隆得到PsPL1基因全長,其ORF長471bp,編碼157個氨基酸;經(jīng)預測PsPL1蛋白包含一個果膠酶保守結(jié)構(gòu)域,N端含有一段由21個氨基酸組成的信號肽序列;經(jīng)酵母系統(tǒng)驗證,確定PsPL1蛋白信號肽具有分泌功能;qRT-PCR分析發(fā)現(xiàn),PsPL1在條銹菌侵染早期表達上調(diào);利用HIGS技術(shù)沉默PsPL1基因后,條銹菌的產(chǎn)孢量沒有發(fā)生明顯變化。【結(jié)論】成功克隆了小麥條銹菌果膠酶基因PsPL1,明確了其分泌特性及表達特征。
【作者單位】: 西北農(nóng)林科技大學生命科學學院;西北農(nóng)林科技大學植物保護學院旱區(qū)作物逆境生物學國家重點實驗室;
【基金】:國家自然科學基金項目(31000078) 中央高校基本科研業(yè)務(wù)費項目(QN2011027)
【分類號】:S435.121.42
【正文快照】: 由條型柄銹菌小麥;(Puccinia striifor-mis f.sp.tritici)引起的小麥條銹病是我國小麥生產(chǎn)中的最重要病害之一。其流行性強,分布廣,危害嚴重。小麥條銹菌為活體營養(yǎng)專性寄生真菌,其侵染夏孢子的過程始于夏孢子的萌發(fā),夏孢子萌發(fā)產(chǎn)生芽管,沿葉表生長,遇到氣孔后,頂端膨大
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