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循環(huán)型m icroRNA-92a在先天性巨結(jié)腸中的表達及上調(diào)CDX2基因的研究

發(fā)布時間:2017-11-07 14:39

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【摘要】:目的探討循環(huán)型micro RNA-92a(mi R-92a)在先天性巨結(jié)腸(HD)中的表達,以及通過上調(diào)尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子-2(CDX2)基因抑制腸神經(jīng)干細胞(ENSCs)增殖的可能機制。方法選取2013年1月-2015年12月在山東省臨沂市沂水中心醫(yī)院行先天性巨結(jié)腸根治術(shù)16例HD患兒的術(shù)前血清標本。實時熒光定量聚合酶鏈反應(q RT-PCR)檢測血清mi R-92a m RNA的表達。提取孕15 d胎鼠腸管ENSCs,通過免疫學方法鑒定ENSCs;免疫磁珠法分選Nestin+ENSCs,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染使Nestin+ENSCs內(nèi)過表達mi R-92a,噻唑藍法檢測細胞的增殖活性,q RT-PCR、Western blot檢測CDX2基因的表達。結(jié)果 HD患兒血清中mi R-92a m RNA的相對表達量為(23.5±4.66),高于對照組(t=12.661,P=0.000);ENSCs細胞培養(yǎng)早期Nestin染色陽性,具有向Tuj-1陽性、膠質(zhì)纖維酸性蛋白陽性細胞分化的潛能;ENSCs過表達mi R-92a后,CDX2 m RNA的相對表達為(13.024±3.882),高于對照組(F=47.212,P=0.000),CDX2蛋白表達為(0.436±0.0828),高于對照組(F=48.793,P=0.000),細胞的增殖活性在轉(zhuǎn)染后24、48和72 h明顯受抑制。結(jié)論 mi R-92a通過上調(diào)CDX2基因的表達,抑制ENSCs的增殖,可能促進HD發(fā)生、發(fā)展。
【作者單位】: 山東省臨沂市沂水中心醫(yī)院小兒外科;山東省臨沂市沂水中心醫(yī)院檢驗科;
【分類號】:R726.5
【正文快照】: 先天性巨結(jié)腸(hirschsprung's disease,HD)是小兒外科常見的先天性消化道畸形[1]。有研究發(fā)現(xiàn)在胚胎發(fā)育過程中,腸神經(jīng)干細胞(enteric neural stemcells,ENSCs)通過不斷的遷移、增殖和分化,形成腸道的神經(jīng)系統(tǒng),當各種原因引起腸道神經(jīng)系統(tǒng)的正常形成時,將導致腸道神經(jīng)節(jié)細胞的

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