本文關(guān)鍵詞：小鼠Peroxiredoxin 6基因克隆、原核表達(dá)及多克隆抗體的制備

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【摘要】：過氧化物氧還酶6(peroxiredoxin6,Prdx6)是一種雙功能蛋白質(zhì),具有GSH過氧化物酶和磷脂酶A2活性。前期研究構(gòu)建布魯氏菌強弱毒株感染綿羊白細(xì)胞層SSH c DNA文庫,發(fā)現(xiàn)Prdx6在不同毒力布魯氏菌感染時存在一定的差異性表達(dá),推測Prdx6可能在布魯氏菌感染中發(fā)揮一定的作用。為了更好地研究其在生物體中的作用,以RT-PCR技術(shù),提取小鼠巨噬細(xì)胞系RAW264.7總RNA,反轉(zhuǎn)錄制備c DNA,設(shè)計特異引物克隆Prdx6開放閱讀框核酸序列,并構(gòu)建原核表達(dá)載體,進行原核表達(dá),以鎳柱純化獲得純度較高的Prdx6蛋白,免疫家兔制備高特異性、高靈敏度的鼠Prdx6兔源多克隆抗體,為后續(xù)進一步研究Prdx6蛋白功能提供科學(xué)依據(jù)和應(yīng)用工具。
【作者單位】： 吉林大學(xué)人獸共患病研究所吉林大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院人獸共患病研究教育部重點實驗室;盤錦檢驗檢測中心;
【關(guān)鍵詞】： 過氧化物氧還酶 基因克隆 表達(dá) 多克隆抗體
【基金】：吉林省科技發(fā)展計劃重點科技攻關(guān)資助項目(20150204078NY)
【分類號】：Q78;S852.4
【正文快照】： 過氧化物氧還酶(peroxiredoxin,Prdxs)家族是新近發(fā)現(xiàn)的一類非硒依賴性過氧化物酶,在各種生物體內(nèi)分布廣泛。目前,根據(jù)保守Cys不同,Prdxs家族共有6個成員,其中,Prdx1-5為同一種類型,為2-Cys類;Prdx6為1-Cys類[1]。1990年研究人員在牛眼睫狀體中首次發(fā)現(xiàn)了Prdx6蛋白,稱為非硒依

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