本文關(guān)鍵詞：丹參轉(zhuǎn)基因毛狀根離體培養(yǎng)體系的建立及分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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期刊詳情

刊刊名： 中國(guó)中藥雜志
China Journal of Chinese Materia Medica
主辦：  中國(guó)藥學(xué)會(huì)
周期：  半月
出版地：北京市
語(yǔ)種：  中文
開(kāi)本：  大16開(kāi)
ISSN： 1001-5302
CN：   11-2272/R
郵發(fā)代號(hào)： 2-45

歷史沿革：
現(xiàn)用刊名：中國(guó)中藥雜志
曾用刊名：中藥通報(bào)
創(chuàng)刊時(shí)間：1955

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丹參轉(zhuǎn)基因毛狀根離體培養(yǎng)體系的建立及分析

作者： 張夏楠 ; 崔光紅 ; 蔣喜紅 ; 黃璐琦

關(guān)鍵詞： 丹參 毛狀根 轉(zhuǎn)基因 離體培養(yǎng)

摘要：
    目的：建立起丹參的轉(zhuǎn)基因毛狀根誘導(dǎo)及離體培養(yǎng)體系。方法：考察了不同外植體、不同農(nóng)桿菌侵染時(shí)間和共培養(yǎng)時(shí)間誘導(dǎo)丹參毛狀根的效率,共培養(yǎng)外植體用400 g.L-1Cef水除菌5 min,接種在MS＋400 g.L-1Cef＋2.5 g.L-1Hyg的固體培養(yǎng)基上,完全除菌后轉(zhuǎn)接入6,7-V＋2.5 g.L-1Hyg液體培養(yǎng)基繼代培養(yǎng),GFP熒光檢測(cè)陽(yáng)性毛狀根,PCR檢測(cè)農(nóng)桿菌特征基因rolC,并測(cè)定不同生長(zhǎng)時(shí)期的毛狀根干重和二氫丹參酮I的積累。結(jié)果：用丹參葉片基部誘導(dǎo)毛狀根,成功率可達(dá)到93.3%;農(nóng)桿菌侵染10 min誘導(dǎo)效率最高為63.3%;共培養(yǎng)2～3 d誘導(dǎo)效果最好;PCR結(jié)合GFP熒光檢測(cè)的方法鑒定陽(yáng)性轉(zhuǎn)基因材料具有較高的可信性;丹參毛狀根生物量變化與次生代謝物積累之間有著緊密聯(lián)系。結(jié)論：成功建立起丹參轉(zhuǎn)基因毛狀根離體培養(yǎng)體系,為進(jìn)一步的基因工程應(yīng)用打下基礎(chǔ)。

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