本文關(guān)鍵詞：小鼠圍著床期輸卵管與子宮中差異基因表達

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【摘要】：輸卵管是雌性生殖系統(tǒng)的重要組成部分,是受精發(fā)生的場所,具有攝取卵子、運輸精子及胚胎進入子宮等功能。異位妊娠是指胚胎在子宮腔外著床發(fā)育的異常妊娠過程,絕大多數(shù)發(fā)生在輸卵管壺腹部。異位妊娠占懷孕婦女的1.5%-2%,且還有逐步上升的趨勢,是臨床上導(dǎo)致產(chǎn)婦妊娠早期死亡的一個主要原因。最近研究發(fā)現(xiàn),輸卵管微環(huán)境異�？赡苁菍�(dǎo)致輸卵管異位妊娠發(fā)生的關(guān)鍵機制。所以深入研究輸卵管參與生殖過程的分子機制對于預(yù)防和治療臨床上相關(guān)疾病迫在眉睫。本實驗選用2-3月齡性成熟的SPF級CD-1小鼠進行合籠,在妊娠第4天和第5天取子宮和輸卵管壺腹部取材,利用原位雜交和免疫組化技術(shù)檢測與胚胎著床相關(guān)的分子在輸卵管及子宮中的表達,并進行比較。實驗結(jié)果表明,妊娠第4天,輸卵管壺腹部上皮中ERα高表達,但在基質(zhì)和肌層中表達很弱;PR在輸卵管上皮幾乎不表達,僅在基質(zhì)和肌層中表達。E-cadherin和MUC-1等非接受態(tài)相關(guān)的分子在妊娠第4天和第5天輸卵管壺腹部上皮中表達均高于子宮腔上皮。與子宮相比,Ltf在第4天輸卵管壺腹部也表達很高。接受態(tài)相關(guān)的MSX1、SGK1、Hand2和p-STAT3等在子宮中表達,但在輸卵管壺腹部不表達。BMP2、Egr1和COX2等蛻膜化相關(guān)基因在輸卵管壺腹部幾乎不表達。我們的結(jié)果表明,在胚胎著床期間小鼠輸卵管壺腹部上皮中非接受態(tài)分子高表達,而接受態(tài)分子幾乎不表達,說明此時的輸卵管并不利于胚胎發(fā)育。我們的結(jié)果將為建立輸卵管異位妊娠動物模型等提供理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：著床 接受態(tài) 蛻膜化 異位妊娠
【學(xué)位授予單位】：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S814.1
【目錄】：

• 摘要2-3
• Abstract3-4
• 中英文縮略詞表4-7
• 1 前言7-19
• 1.1 輸卵管與生殖7-9
• 1.1.1 輸卵管的解剖學(xué)及組織學(xué)7
• 1.1.2 輸卵管的功能7-8
• 1.1.3 輸卵管的微環(huán)境及輸卵管液的成分與功能8-9
• 1.1.4 輸卵管異位妊娠9
• 1.2 胚胎著床9-18
• 1.2.1 子宮接受態(tài)與胚胎著床9-10
• 1.2.2 類固醇激素對子宮接受態(tài)的調(diào)控10-11
• 1.2.3 胚胎著床期間母胎界面抵抗著床相關(guān)分子機制11-13
• 1.2.4 子宮內(nèi)膜接受態(tài)建立的分子機制13-16
• 1.2.5 細胞增殖與胚胎著床16
• 1.2.6 參與調(diào)控胚胎著床的其它分子機制16-18
• 1.3 本研究的目的和意義18-19
• 2 材料與方法19-32
• 2.1 實驗動物19
• 2.2 動物材料的收集與保存19
• 2.3 原位雜交探針制備和序列分析19-26
• 2.3.1 菌種和主要試劑19
• 2.3.2 PCR引物設(shè)計19-20
• 2.3.3 組織總RNA的提取20-21
• 2.3.4 反轉(zhuǎn)錄合成cDNA21
• 2.3.5 PCR擴增21-22
• 2.3.6 PCR產(chǎn)物回收22-23
• 2.3.7 PCR產(chǎn)物與pGEM-T載體的連接23
• 2.3.8 重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞及鑒定23-25
• 2.3.9 陽性克隆質(zhì)粒的提取25
• 2.3.10 目的片段的PCR擴增和回收25-26
• 2.3.11 地高辛標(biāo)記cRNA探針26
• 2.4 原位雜交26-30
• 2.4.1 原位雜交相關(guān)器皿的準(zhǔn)備26-27
• 2.4.2 冰凍切片27
• 2.4.3 原位雜交相關(guān)試劑的配制27-29
• 2.4.4 原位雜交過程29-30
• 2.5 免疫組織化學(xué)30-32
• 3 結(jié)果32-41
• 3.1 胚胎著床窗口期類固醇激素受體表達的定位32
• 3.2 胚胎著床期Muc-1、E-Cadherin與Ltf的表達32-34
• 3.3 胚胎著床期細胞增殖和抗凋亡程度比較34-35
• 3.4 胚胎著床期接受態(tài)相關(guān)分子的表達35-39
• 3.5 蛻膜化相關(guān)分子的檢測39-41
• 4 討論41-45
• 4.1 類固醇激素與輸卵管異位妊娠41-42
• 4.2 接受態(tài)分子與輸卵管異位妊娠42-43
• 4.3 非接受態(tài)分子與輸卵管異位妊娠43-45
• 5 結(jié)論45-46
• 致謝46-47
• 參考文獻47-53

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 孫曉溪;;胚胎植入相關(guān)因子與輸卵管妊娠發(fā)生的關(guān)系[J];生殖醫(yī)學(xué)雜志;2014年03期

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本文編號：1061585