本文關(guān)鍵詞：松材線蟲Bxpel2基因的克隆及RNA干擾載體構(gòu)建

  更多相關(guān)文章： 松材線蟲 Bxpel基因 RNA干擾

【摘要】：[目的]為了構(gòu)建松材線蟲(Bursaphelenchus xylophilus)果膠酶Bxpel2基因干擾載體。[方法]通過Trizol法提取松材線蟲總RNA,反轉(zhuǎn)錄合成c DNA,設(shè)計帶T7啟動子的果膠酶Bxpel2基因引物,以c DNA為模板擴增出果膠酶Bxpel2基因片段,連接到RNA干擾載體,再以干擾載體為模板,PCR擴增出目的片段后進行測序鑒定,合成果膠酶Bxpel2基因雙鏈RNA(dsRNA),采用RT-PCR檢測松材線蟲Bxpel2基因干擾后的表達情況。[結(jié)果]表明:1)提取的松材線蟲總RNA完整性好,無降解;2)成功克隆出松材線蟲果膠酶Bxpel2基因片段(790 bp)并將其連接至p MD19-T載體;3)以RNA干擾載體為模板合成dsRNA,濃度分別為1.313 mg·m L-1和1.152 mg·m L-1;4)RT-PCR結(jié)果顯示,松材線蟲經(jīng)過dsRNA干擾后,Bxpel2基因表達基本受到抑制。[結(jié)論]成功構(gòu)建松材線蟲果膠酶Bxpel2基因干擾載體,為進一步研究Bxpel2基因在松材線蟲致病過程中的作用和功能奠定了良好的基礎(chǔ)。
【作者單位】： 九江學(xué)院鄱陽湖生態(tài)經(jīng)濟研究中心;江蘇省有害生物入侵預(yù)防與控制重點實驗室南京林業(yè)大學(xué)林學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 松材線蟲 Bxpel基因 RNA干擾
【基金】：國家“十二五”科技支撐專題“南方松林重大病蟲綜合控制技術(shù)集成與示范”(2012BAD19B0703)
【分類號】：S763.18
【正文快照】： 松材線蟲病又稱松樹萎蔫病(Pine Wilt Dis-ease),是由松材線蟲(Bursaphelenchus xylophilus(SteinerBuhrer)Nickle)引起松屬植物毀滅性死亡的一種世界性森林病害[1-3]。目前,松材線蟲致病機制尚不清楚[4-5]�；蚪M學(xué)和分子生物技術(shù)的快速發(fā)展,為進一步研究松材線蟲致病相關(guān)

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王明旭;松材線蟲分子生物學(xué)檢測技術(shù)研究進展[J];湖南林業(yè)科技;2004年02期

2 王繼蓬,謝清云,華金林,張海濱;湖州局從美國木包裝中截獲松材線蟲[J];植物檢疫;2004年04期

3 李冰心,房德奎,李柄，

本文編號：1055127