本文關(guān)鍵詞：黃酒酵母ADH2、ALD2和ALD6基因敲除對(duì)黃酒中乙醛代謝的影響

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【摘要】：以工業(yè)黃酒酵母N85尿嘧啶缺陷型單倍體2a-u3(MATa ura3)為出發(fā)菌株,研究分別敲除乙醛代謝相關(guān)酶的編碼基因ADH2、ALD2和ALD6對(duì)乙醛代謝的影響。采用融合PCR技術(shù)分別構(gòu)建乙醇脫氫酶編碼基因ADH2敲除組件"ADH2S-URA3-ADH2X"和乙醛脫氫酶編碼基因ALD2和ALD6敲除組件"ALD2S-URA3-ALD2X"和"ALD6S-URA3-ALD6X",轉(zhuǎn)化N85尿嘧啶缺陷型單倍體菌株后,以尿嘧啶缺陷型的恢復(fù)為篩選標(biāo)記,分別獲得ADH2、ALD2和ALD6基因缺失菌株2a-A2(Δadh2)、2a-D2(Δald2)和2a-D6(Δald6)。分別將獲得的工程菌與親本菌株以及前期構(gòu)建的丙酮酸脫羧酶基因PDC5缺失菌株2a-P5(Δpdc5)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室規(guī)模的黃酒發(fā)酵實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明,與親本菌株2a相比,工程菌2a-A2發(fā)酵液中乙醛含量降低了7.14%,而2a-P5發(fā)酵液中乙醛含量降低了32.68%,說(shuō)明工業(yè)黃酒酵母乙醛的生成存在糖代謝途徑,并且乙醛主要由丙酮酸脫羧而來(lái);工程菌2a-D2和2a-D6發(fā)酵液中乙醛含量與親本相比分別增加了144.91%和88.87%,說(shuō)明乙醛脫氫酶是黃酒中控制乙醛降解的關(guān)鍵酶,而且ALD2基因在乙醛轉(zhuǎn)化為乙酸過(guò)程中發(fā)揮更關(guān)鍵的作用。
【作者單位】： 江南大學(xué)糧食發(fā)酵工藝與技術(shù)國(guó)家工程實(shí)驗(yàn)室;江南大學(xué)工業(yè)生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;江南大學(xué)生物工程學(xué)院;中國(guó)紹興黃酒集團(tuán)有限公司國(guó)家黃酒工程技術(shù)研究中心;
【關(guān)鍵詞】： 黃酒酵母 基因敲除 ADH ALD和ALD 乙醛
【基金】：973項(xiàng)目(2012CB720802);973項(xiàng)目(2013CB733602) 江蘇高校優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)工程資助項(xiàng)目 高等學(xué)校學(xué)科創(chuàng)新引智計(jì)劃(111計(jì)劃)資助項(xiàng)目(111-2-06) 紹興市科技計(jì)劃項(xiàng)目(2015A31012)
【分類號(hào)】：TS262.4
【正文快照】： 黃酒是世界三大古酒之一,同時(shí)也是中華民族傳統(tǒng)酒,因其蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素和對(duì)人體有益的微量礦物元素含量豐富,被譽(yù)為“液體蛋糕”[1]。黃酒在釀造過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生一定量的醛類物質(zhì)[2],包括乙醛、糠醛、苯乙醛、異戊醛、苯甲醛等。其中,乙醛含量最高(29.9~137.48 mg/L),風(fēng)味

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1054085