本文關鍵詞：黃酒酵母ADH2、ALD2和ALD6基因敲除對黃酒中乙醛代謝的影響

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【摘要】：以工業(yè)黃酒酵母N85尿嘧啶缺陷型單倍體2a-u3(MATa ura3)為出發(fā)菌株,研究分別敲除乙醛代謝相關酶的編碼基因ADH2、ALD2和ALD6對乙醛代謝的影響。采用融合PCR技術分別構建乙醇脫氫酶編碼基因ADH2敲除組件"ADH2S-URA3-ADH2X"和乙醛脫氫酶編碼基因ALD2和ALD6敲除組件"ALD2S-URA3-ALD2X"和"ALD6S-URA3-ALD6X",轉化N85尿嘧啶缺陷型單倍體菌株后,以尿嘧啶缺陷型的恢復為篩選標記,分別獲得ADH2、ALD2和ALD6基因缺失菌株2a-A2(Δadh2)、2a-D2(Δald2)和2a-D6(Δald6)。分別將獲得的工程菌與親本菌株以及前期構建的丙酮酸脫羧酶基因PDC5缺失菌株2a-P5(Δpdc5)進行實驗室規(guī)模的黃酒發(fā)酵實驗。結果表明,與親本菌株2a相比,工程菌2a-A2發(fā)酵液中乙醛含量降低了7.14%,而2a-P5發(fā)酵液中乙醛含量降低了32.68%,說明工業(yè)黃酒酵母乙醛的生成存在糖代謝途徑,并且乙醛主要由丙酮酸脫羧而來;工程菌2a-D2和2a-D6發(fā)酵液中乙醛含量與親本相比分別增加了144.91%和88.87%,說明乙醛脫氫酶是黃酒中控制乙醛降解的關鍵酶,而且ALD2基因在乙醛轉化為乙酸過程中發(fā)揮更關鍵的作用。
【作者單位】： 江南大學糧食發(fā)酵工藝與技術國家工程實驗室;江南大學工業(yè)生物技術教育部重點實驗室;江南大學生物工程學院;中國紹興黃酒集團有限公司國家黃酒工程技術研究中心;
【關鍵詞】： 黃酒酵母 基因敲除 ADH ALD和ALD 乙醛
【基金】：973項目(2012CB720802);973項目(2013CB733602) 江蘇高校優(yōu)勢學科建設工程資助項目 高等學校學科創(chuàng)新引智計劃(111計劃)資助項目(111-2-06) 紹興市科技計劃項目(2015A31012)
【分類號】：TS262.4
【正文快照】： 黃酒是世界三大古酒之一,同時也是中華民族傳統(tǒng)酒,因其蛋白質、氨基酸、維生素和對人體有益的微量礦物元素含量豐富,被譽為“液體蛋糕”[1]。黃酒在釀造過程中會產(chǎn)生一定量的醛類物質[2],包括乙醛、糠醛、苯乙醛、異戊醛、苯甲醛等。其中,乙醛含量最高(29.9~137.48 mg/L),風味

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本文編號：1054085