本文關(guān)鍵詞：RASSF10基因在腎細(xì)胞癌中mRNA表達(dá)及甲基化狀態(tài)研究

  更多相關(guān)文章： RASSF10 腎細(xì)胞癌 mRNA表達(dá) 甲基化 表觀遺傳學(xué)

【摘要】：目的:腎細(xì)胞癌是泌尿系常見(jiàn)的惡性腫瘤,占成人惡性腫瘤的2%-3%,近年來(lái)其發(fā)病率逐年升高,嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康,在發(fā)達(dá)國(guó)家,其發(fā)病率上升更快,大部分腎癌是散發(fā)性的,家族遺傳性腎癌發(fā)病較少。腎細(xì)胞癌發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,流行病學(xué)資料表明所有形式的煙草暴露都是其公認(rèn)的危險(xiǎn)因素,并且隨煙草累積劑量和年限延長(zhǎng)其危險(xiǎn)度增高,同時(shí)肥胖,高蛋白、高脂肪、低蔬菜飲食也是其危險(xiǎn)因素。隨著分子生物學(xué)的研究發(fā)展,除這些危險(xiǎn)因素外,腎癌的發(fā)生還與基因突變、失活、表觀遺傳學(xué)改變等有關(guān),尤其是DNA甲基化改變,已成為腫瘤研究中的重要方法。RASSF家族(RASSF1-RASSF10)是Ras信號(hào)通路負(fù)向調(diào)節(jié)基因家族,其大多數(shù)成員都因基因啟動(dòng)子甲基化改變導(dǎo)致表達(dá)缺失而在多種腫瘤進(jìn)展中發(fā)生作用。RASSF10基因啟動(dòng)子高甲基化在兒童急性淋巴細(xì)胞白血病、甲狀腺癌、黑色素瘤、前列腺癌等研究中已有文獻(xiàn)報(bào)道,是一個(gè)潛在的抑癌基因,但RASSF10基因在腎細(xì)胞癌中尚未見(jiàn)類(lèi)似研究報(bào)道,其表達(dá)水平及甲基化狀態(tài)又如何?本課題旨在通過(guò)分析RASSF10基因在人腎細(xì)胞癌、癌旁及正常組織之間表達(dá)情況及甲基化結(jié)果,明確其在腎癌組織、癌旁及正常組織中有無(wú)表達(dá)差異,甲基化結(jié)果有無(wú)差異,m RNA與基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化關(guān)系,并統(tǒng)計(jì)分析RASSF10基因表達(dá)水平、甲基化結(jié)果和腎細(xì)胞癌患者臨床資料之間關(guān)系,探討RASSF10基因在腎細(xì)胞癌發(fā)生、發(fā)展中的作用,為腎細(xì)胞癌診斷、治療提供新的靶點(diǎn)和思路。方法:1利用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)52例腎細(xì)胞癌組織、癌旁及正常組織中RASSF10基因m RNA相對(duì)表達(dá)量,統(tǒng)計(jì)分析其m RNA相對(duì)表達(dá)量與臨床資料之間關(guān)系。2利用甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)(MSP)檢測(cè)52例腎細(xì)胞癌組織、癌旁及正常組織中RASSF10基因的甲基化狀態(tài),結(jié)合相關(guān)臨床資料,用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),探討RASSF10基因在腎細(xì)胞癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。結(jié)果:1在對(duì)52例腎細(xì)胞癌組織、癌旁及正常組織應(yīng)用甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)中,發(fā)現(xiàn)存在三種不同的甲基化狀態(tài),即完全甲基化,不完全甲基化,完全非甲基化。2利用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)52例腎細(xì)胞癌組織、癌旁及正常組織中RASSF10基因的m RNA表達(dá)水平時(shí),發(fā)現(xiàn)其相對(duì)表達(dá)量分別為0.62±0.04、0.74±0.03、0.75±0.05,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理分析,發(fā)現(xiàn)癌組織中RASSF10基因的m RNA表達(dá)水平低于癌旁及正常組織中該基因的m RNA表達(dá)量,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01);正常腎組織RASSF10基因的m RNA相對(duì)表達(dá)量均值雖高于癌旁組織中該基因相對(duì)表達(dá)量,但二者之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3在52例腎癌組織中,RASSF10基因的m RNA相對(duì)表達(dá)量與患者性別(t=1.29,P=0.202)、年齡(t=-1.94,P=0.060)、病理類(lèi)型(t=-1.54,P=0.131)、腫瘤體積(t=1.99,P=0.052)這些臨床資料之間并無(wú)顯著差異(P均0.05)。4在52例腎細(xì)胞癌組織中,RASSF10基因甲基化率為69.2%(36/52例),癌旁組織中RASSF10基因甲基化率為36.5%(19/52例),正常腎組織中RASSF10基因甲基化率為25.0%(13/52例),腎細(xì)胞癌組織中甲基化率高于癌旁組織的甲基化率(?2=11.15,P=0.001),癌組織甲基化率也明顯高于正常組織中甲基化率(?2=20.41,P=0.000),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。男性組RASSF10基因甲基化發(fā)生率69.7%(23/33),女性組RASSF10基因甲基化發(fā)生率68.4%(13/19),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。年齡大于等于60歲組中RASSF10基因甲基化發(fā)生率為73.9%(17/23),年齡不足60歲組RASSF10基因甲基化發(fā)生率65.5%(19/29),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。透明細(xì)胞癌組RASSF10基因甲基化發(fā)生率68.3%(28/41),非透明細(xì)胞癌組RASSF10基因甲基化發(fā)生率72.7%(8/11),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。腫瘤體積≥7cm組中RASSF10基因甲基化發(fā)生率68.6%(24/35),腫瘤體積7cm組中RASSF10基因甲基化發(fā)生率70.6%(12/17),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Fuhrman分級(jí)方面,高分化組RASSF10基因甲基化率為62.5%(5/8),中分化組RASSF10基因甲基化率為66.7%(16/24),低分化或未分化組RASSF10基因甲基化率為75.0%(15/20),三組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。5 RASSF10基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化與患者性別(?2=0.01,P=0.923)、年齡(?2=0.42,P=0.514)、病理類(lèi)型(?2=0.08,P=0.78)、腫瘤體積(?2=0.02,P=0.882)、Fuhrman分級(jí)(?2=0.56,P=0.757)無(wú)相關(guān)性(P均0.05),與腫瘤的TNM分期有一定的相關(guān)性(P0.05),腫瘤TNM分期Ⅲ-Ⅳ的患者比Ⅰ-Ⅱ期的甲基化率高(P=0.043)。6在癌組織中,甲基化狀態(tài)陰性的病例其m RNA表達(dá)水平高于甲基化狀態(tài)陽(yáng)性病例m RNA表達(dá)水平,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1 RCC組織中RASSF10基因m RNA表達(dá)水平減低或缺失,明顯低于癌旁及正常組織中該基因m RNA相對(duì)表達(dá)量。2 RCC組織中RASSF10基因啟動(dòng)子甲基化陽(yáng)性率明顯高于癌旁及正常組織,并且與腫瘤TNM分期正相關(guān)。3 RCC組織中RASSF10基因m RNA的表達(dá)降低或缺失與其啟動(dòng)子高甲基化狀態(tài)負(fù)相關(guān),RASSF10基因啟動(dòng)子甲基化可能參與了腎細(xì)胞癌的發(fā)展。
【關(guān)鍵詞】：RASSF10 腎細(xì)胞癌 mRNA表達(dá) 甲基化 表觀遺傳學(xué)
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R737.11
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫(xiě)11-12
• 前言12-15
• 材料與方法15-25
• 結(jié)果25-27
• 附圖27-29
• 附表29-33
• 討論33-37
• 結(jié)論37-38
• 參考文獻(xiàn)38-42
• 綜述 RASSF10基因啟動(dòng)子甲基化改變與人類(lèi)腫瘤相關(guān)性研究進(jìn)展42-54
• 參考文獻(xiàn)50-54
• 致謝54-55
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷55

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 Subhasree Nag;Jiangjiang Qin;Kalkunte S.Srivenugopal;Minghai Wang;Ruiwen Zhang;;The MDM2-p53 pathway revisited[J];The Journal of Biomedical Research;2013年04期

2 趙振威;李延江;;腎細(xì)胞癌流行病學(xué)的研究進(jìn)展[J];山東醫(yī)藥;2013年07期

3 馬建輝;;晚期腎癌靶向治療臨床研究現(xiàn)狀[J];實(shí)用腫瘤雜志;2010年03期

4 張海梁;葉定偉;姚旭東;張世林;戴波;沈益君;朱耀;;索拉非尼治療轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌20例初步結(jié)果[J];中國(guó)癌癥雜志;2008年02期

5 馬建輝;李鳴;張思維;那彥群;陳萬(wàn)青;;中國(guó)部分市縣腎癌及泌尿系其他惡性腫瘤發(fā)病趨勢(shì)比較研究[J];中華泌尿外科雜志;2009年08期

，

本文編號(hào)：1051515