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對(duì)甜菜夜蛾具有殺蟲活性的Bt菌株cry1Ca基因研究

發(fā)布時(shí)間:2017-10-15 14:20

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【摘要】:根據(jù)已報(bào)道的14個(gè)cry1Ca基因,設(shè)計(jì)能夠擴(kuò)增cry1Ca全長基因的簡(jiǎn)并引物。利用該引物對(duì)本實(shí)驗(yàn)室分離的472株Bt菌株進(jìn)行篩選。PCR擴(kuò)增發(fā)現(xiàn)22株菌含有cry1Ca基因。對(duì)22株菌株進(jìn)行cry基因多樣性分析,結(jié)果獲得5種類型酶切圖譜,表明這些菌株分為5種類型。SDS-PAGE結(jié)果顯示22株菌均表達(dá)約130ku的蛋白。Western Blotting結(jié)果證實(shí)這些株菌中cry1Ca基因均正常表達(dá)。提取菌株的晶體蛋白,經(jīng)胰蛋白酶活化,對(duì)甜菜夜蛾[Spodoptera exigua(Hübner)]進(jìn)行初步生測(cè),結(jié)果表明22株菌中活化的Cry蛋白對(duì)甜菜夜蛾均表現(xiàn)出很強(qiáng)的毒殺作用。進(jìn)一步從5個(gè)類型的菌中各挑選一株毒力較高的菌株進(jìn)行LC_(50)的測(cè)定,結(jié)果證實(shí)它們均具有很高毒力,其中,T1-E12(0.087μg/g)、B16-C8(0.103μg/g)、T1-B8(0.202μg/g)的活性與陽性對(duì)照菌株G03(0.090μg/g)相當(dāng),具有生產(chǎn)應(yīng)用潛力。本研究為新型高效Bt菌株的挖掘奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 山西師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所植物病蟲害生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】蘇云金芽胞桿菌 cryCa基因 甜菜夜蛾 致死中濃度
【基金】:國家“863”計(jì)劃(2011AA10A203) 轉(zhuǎn)基因生物新品種培育重大專項(xiàng)(2014ZX08009-003-001-004)
【分類號(hào)】:S482.292
【正文快照】: 甜菜夜蛾[Spodoptera exigua(Hübner)]屬鱗翅目夜蛾科,作為一種世界性的多食性害蟲,長期為害包括棉花、番茄、大豆等在內(nèi)的重要經(jīng)濟(jì)作物[1]。在中國,甜菜夜蛾的為害程度日趨嚴(yán)重,給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成巨大損失[2]。由于化學(xué)殺蟲劑的濫用,已導(dǎo)致害蟲抗性上升、環(huán)境污染等嚴(yán)重后果。

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本文編號(hào):1037594

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