1株產(chǎn)順式-4-羥基-L-脯氨酸基因工程菌的構(gòu)建及發(fā)酵初步優(yōu)化
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更多相關(guān)文章: L-脯氨酸順式--羥化酶 密碼子優(yōu)化 重組大腸桿菌 微生物轉(zhuǎn)化 發(fā)酵優(yōu)化
【摘要】:順式-4-羥基-L-脯氨酸是一種可用于合成多種藥物和香料的手性結(jié)構(gòu)物質(zhì)。通過(guò)對(duì)L-脯氨酸順式-4-羥化酶基因的優(yōu)化設(shè)計(jì),并引入色氨酸串聯(lián)啟動(dòng)子,構(gòu)建出1株能表達(dá)L-脯氨酸順式-4-羥化酶的重組大腸桿菌JM109/p EHC4,從而可以將游離的L-脯氨酸轉(zhuǎn)化為順式-4-羥基-L-脯氨酸。對(duì)該菌株進(jìn)行搖瓶發(fā)酵優(yōu)化,得出優(yōu)選培養(yǎng)基為(g/L):葡萄糖10,甘油10,蛋白胨10,NaCl 6,FeSO_4·7H_2O 0.278,L-抗壞血酸0.528,(NH_4)_2SO_45,K_2HPO41,MgSO_40.2,CaCl_20.015,L-脯氨酸4。在該條件下發(fā)酵12 h,順式-4-羥基-L-脯氨酸的產(chǎn)量達(dá)到657.08mg/L,比優(yōu)化前提高了3.76倍;在24 h時(shí)產(chǎn)量達(dá)到1 582.75 mg/L。研究結(jié)果為順式-4-羥基-L-脯氨酸的微生物轉(zhuǎn)化法生產(chǎn)提供了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 江南大學(xué)工業(yè)生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室糖化學(xué)與生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: L-脯氨酸順式--羥化酶 密碼子優(yōu)化 重組大腸桿菌 微生物轉(zhuǎn)化 發(fā)酵優(yōu)化
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(30970058) 江蘇省自然科學(xué)基金(BK2012554) 工業(yè)生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(江南大學(xué))開(kāi)放課題基金(KLIB-ZR200801)
【分類(lèi)號(hào)】:TQ922
【正文快照】: L-羥脯氨酸(L-hydroxyproline,L-Hyp),是L-脯氨酸羥基化后的產(chǎn)物。根據(jù)其羥基化位置及空間結(jié)構(gòu)的不同,可形成4種立體異構(gòu)體:反式-4-羥基-L-脯氨酸(trans-4-Hyp)、順式-4-羥基-L-脯氨酸(cis-4-Hyp)、反式-3-羥基-L-脯氨酸(trans-3-Hyp)和順式-3-羥基-L-脯氨酸(cis-3-Hyp)。其中
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,本文編號(hào):1009863
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