紅花查耳酮異構(gòu)酶基因植物表達載體的構(gòu)建及擬南芥轉(zhuǎn)化
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【摘要】:目的構(gòu)建紅花查耳酮異構(gòu)酶(CHI)基因的植物表達載體并在擬南芥中進行超表達驗證該基因的功能。方法將已經(jīng)分離的紅花CHI基因作為目的基因,在其兩端引入Bam H I和Eco R I酶切位點,構(gòu)建含有35S啟動子的植物超表達載體p BASTA-CHI,通過Flora-dip法將其轉(zhuǎn)化到擬南芥中,并對轉(zhuǎn)基因擬南芥T2代植株進行PCR和總黃酮量檢測。結(jié)果轉(zhuǎn)基因擬南芥T2代植株的PCR檢測,紅花CHI基因已經(jīng)初步整合到擬南芥基因組中,黃酮量檢測表明,轉(zhuǎn)紅花CHI基因的擬南芥比野生型擬南芥中的黃酮量有所提高,最高提高到2.3倍。結(jié)論成功構(gòu)建了含有紅花CHI基因的植物表達載體,并在擬南芥中進行超表達,獲得了轉(zhuǎn)基因擬南芥T2植株。
【作者單位】: 吉林農(nóng)業(yè)大學生物反應器與藥物開發(fā)教育部工程研究中心;吉林農(nóng)業(yè)大學生命科學學院;吉林省科學技術(shù)廳;
【關(guān)鍵詞】: 紅花 查耳酮異構(gòu)酶 黃酮 擬南芥 PCR
【基金】:國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃(“863”)(2011AA100606) 國家自然科學基金資助(31101172,31501366) 吉林省科技廳(20150623024TC-11)
【分類號】:S567.219
【正文快照】: 紅花Carthamus tinctorius L.,菊科(Compositae)雙子葉植物,又名草紅花、金紅花,是我國重要的傳統(tǒng)中草藥,不僅可以用來藥用,還可用于食用、染料和油料等。黃酮類化合物是紅花中最主要的化學成分之一,目前已經(jīng)從紅花中分離出多種黃酮化合物[1-2],其他多項研究也表明[3-4],紅花
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,本文編號:1008037
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