發(fā)布時(shí)間：2017-10-10 10:26

  本文關(guān)鍵詞：雞Perilipin1基因的克隆及亞細(xì)胞定位

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【摘要】：本研究旨在克隆雞(Gallus gallus)脂滴包被蛋白基因(Perilipin1)的c DNA序列,并檢測(cè)其在雞前脂肪細(xì)胞分化過程中的亞細(xì)胞定位。本研究以7周齡肉雞腹部脂肪組織為材料,采用RT-PCR和RACE的方法擴(kuò)增并克隆了雞Perilipin1基因的5'UTR、CDS和3'UTR片段,分析了該基因的結(jié)構(gòu);以雞原代前脂肪細(xì)胞為材料,利用免疫熒光及激光共聚焦技術(shù),在誘導(dǎo)分化的不同時(shí)間點(diǎn)(12~120 h),檢測(cè)了雞Perilipin1在前脂肪細(xì)胞中的表達(dá)位置。結(jié)果表明,本研究獲得的雞Perilipin1基因5'UTR、CDS和3'UTR序列總長(zhǎng)度為2 379 bp,該基因由9個(gè)外顯子、8個(gè)內(nèi)含子組成(ATG位于第二外顯子上);在雞原代前脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化過程中,Perilipin1始終包被在脂滴周圍。綜上,本研究成功克隆了雞Perilipin1基因的完整c DNA序列并確定了Perilipin1在雞前脂肪細(xì)胞分化過程中與脂滴的空間位置關(guān)系,該結(jié)果為深入開展雞Perilipin1基因的功能研究,揭示雞脂肪代謝的分子遺傳機(jī)理提供了重要的理論依據(jù)。
【作者單位】： 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院/農(nóng)業(yè)部雞遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/黑龍江省普通高等學(xué)校動(dòng)物遺傳育種與繁殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 雞 脂滴包被蛋白 克隆 亞細(xì)胞定位
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.31201796) 高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金(No.20122325120008) 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金(CARS-42)
【分類號(hào)】：S831
【正文快照】： 脂滴包被蛋白基因(Perilipin1)(或稱PLIN1,Peri)是1990年在大鼠(Rattus norvegicus)附睪脂肪細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的一種包被于中性脂滴外周表面,并且可以被蛋白激酶磷酸化的磷蛋白(Lu et al.,2001;Arimura et al.,2004;周緯男等,2016)。在哺乳動(dòng)物中,脂滴包被蛋白由一個(gè)單拷貝的Perilip，

本文編號(hào)：1005837