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酪蛋白水解肽兩親性質(zhì)的定量分析及其多糖接枝物的乳化性能研究

發(fā)布時間:2017-09-29 12:19

  本文關(guān)鍵詞:酪蛋白水解肽兩親性質(zhì)的定量分析及其多糖接枝物的乳化性能研究


  更多相關(guān)文章: 阿拉伯膠 酪蛋白疏水肽 美拉德反應(yīng) 接枝物 乳化性能


【摘要】:用疏水性多肽共價改性親水性較強的多糖可以改善多糖的乳化性能,但需要對疏水性多肽的兩親性質(zhì)進行定量分析。本文以酪蛋白為模型蛋白質(zhì),采用酶促水解酪蛋白,對酪蛋白水解肽的各種表觀兩親性質(zhì)進行了關(guān)聯(lián)性分析,制備得到不同水解度的酪蛋白疏水肽(CHP)。進一步地,以Acacia seyal(Sy)為模型多糖,通過美拉德干熱反應(yīng)將CHP接枝到Sy多糖分子上,獲得了一種新的多糖乳化劑。以Acacia senegal膠(Sn)和Sy為參照,考察了CHP-Sy接枝產(chǎn)物(Sy CHP)的表面物理化學(xué)性能及其在水包油(O/W)乳狀液體系中的穩(wěn)定性應(yīng)用,并對系列Sy CHP接枝物的表觀兩親性質(zhì)和乳化性能的關(guān)系進行了初步的探究。具體研究內(nèi)容及結(jié)果如下:1.以酪蛋白為模型蛋白質(zhì),采用酶促水解酪蛋白,通過測定不同水解度(DH)的水解肽的兩相(正丁醇/水)分配系數(shù)(K)、遷移吉布斯自由能(ΔG)、表面疏水性(So)和平均疏水值(Hav)定量分析水解肽的親疏水性,發(fā)現(xiàn)隨著酪蛋白水解肽水解度的增大,K、ΔG和So的變化趨勢與Hav的相反;K、ΔG和So與DH負(fù)相關(guān),而Hav與DH正相關(guān)。2.通過正丁醇萃取,篩選并制備得到四種水解度(DH)的CHP(DH 1.5%、DH 5%、DH10%和DH 15%)和酪蛋白(DH 0)作為與Sy多糖進行美拉德反應(yīng)的原料。在最優(yōu)條件(溫度60 o C,相對濕度75%,p H 7.0,反應(yīng)時間3天,CHP/Sy底物質(zhì)量比1/3)下,制備得到接枝物Sy CHP(DH 1.5%)、Sy CHP(DH 5%)、Sy CHP(DH 10%)、Sy CHP(DH 15%)和Sy-酪蛋白(Sy Casein(DH 0))。以Sn和Sy為參照,對接枝物的表面物理化學(xué)性能進行分析,發(fā)現(xiàn)Sy CHP系列接枝物降低表/界面張力的能力以及界面粘彈性均比Sy多糖強,且隨著接枝物中CHP水解度的減小而增強。Sy CHP系列接枝物對菜籽油/水酸性乳狀液(p H 4.0)的乳化能力最高可與Sn的相近,約為Sy多糖的46倍,乳化穩(wěn)定性最高提高約21倍。3.通過粒徑分析,對以Sy CHP系列接枝物為乳化劑的O/W型乳狀液的穩(wěn)定性進行了探究,發(fā)現(xiàn)Sy CHP系列接枝物對乳狀液穩(wěn)定性作用的大小依次為Sy CHP(DH 1.5%)Sy CHP(DH 5%)Sy CHP(DH 10%)Sy CHP(DH 15%)Sy Casein(DH 0)Sy。篩選出Sy CHP(DH 1.5%),發(fā)現(xiàn)其在p H 4.0、85 o C、0.5 mol/L Na Cl存在的條件下,所形成乳狀液在28天的貯藏時間內(nèi),乳狀液的平均粒徑均小于5μm。純化除去接枝物中未接枝部分的CHP后,發(fā)現(xiàn)系列Sy CHP接枝物的乳化性能與其疏水性呈正相關(guān);較純化前,Sy CHP在水包油(O/W)乳狀液體系中的乳化穩(wěn)定性均有所提升,尤其是Sy CHP(DH 1.5%),乳化穩(wěn)定性提高了9.58%,所形成乳狀液的平均粒徑在放置28天后減小了1μm。
【關(guān)鍵詞】:阿拉伯膠 酪蛋白疏水肽 美拉德反應(yīng) 接枝物 乳化性能
【學(xué)位授予單位】:江南大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:O629.73;O648.23
【目錄】:
  • 摘要3-4
  • Abstract4-8
  • 第一章 緒論8-21
  • 1.1 引言8-9
  • 1.2 植物多糖類乳化劑和乳液穩(wěn)定性9-14
  • 1.2.1 香豆膠9-10
  • 1.2.2 印度樹膠10
  • 1.2.3 阿拉伯膠10-14
  • 1.3 蛋白質(zhì)親疏水性分析方法14-15
  • 1.3.1 搖瓶法14
  • 1.3.2 熒光探針法14-15
  • 1.3.3 反相液相色譜法15
  • 1.3.4 Q值法15
  • 1.4 植物多糖的改性15-18
  • 1.4.1 多糖-蛋白質(zhì)共價接枝物16-18
  • 1.4.2 多糖-蛋白質(zhì)靜電復(fù)合物18
  • 1.5 立題依據(jù)及研究內(nèi)容18-21
  • 1.5.1 立題依據(jù)18-19
  • 1.5.2 主要研究內(nèi)容19-21
  • 第二章 酪蛋白水解肽親疏水性的定量分析21-35
  • 2.1 引言21
  • 2.2 實驗試劑與儀器21-22
  • 2.2.1 實驗試劑21
  • 2.2.2 實驗儀器21-22
  • 2.3 實驗方法22-26
  • 2.3.1 酪蛋白水解肽的制備22-23
  • 2.3.2 多肽中的蛋白含量的測定23-24
  • 2.3.3 液-液 (正丁醇/水) 萃取24
  • 2.3.4 分配系數(shù)的測定24
  • 2.3.5 遷移吉布斯自由能的測定24
  • 2.3.6 表面疏水性的測定24
  • 2.3.7 氨基酸組成分析24-25
  • 2.3.8 平均疏水值的測定25-26
  • 2.4 結(jié)果與討論26-34
  • 2.4.1 酪蛋白水解肽制備工藝的優(yōu)化26-27
  • 2.4.2 Lowry法測定多肽中蛋白含量條件的優(yōu)化27-29
  • 2.4.3 液-液 (正丁醇/水) 萃取工藝的確立29-31
  • 2.4.4 酪蛋白水解肽親疏水性分析31-33
  • 2.4.5 三種酪蛋白水解肽親疏水性測定方法的比較33-34
  • 2.5 本章小結(jié)34-35
  • 第三章 Acacia seyal多糖的疏水肽共價鍵合及其產(chǎn)物的表面物理化學(xué)性能35-52
  • 3.1 引言35
  • 3.2 實驗試劑與儀器35-36
  • 3.2.1 實驗試劑35
  • 3.2.2 實驗儀器35-36
  • 3.3 實驗方法36-40
  • 3.3.1 阿拉伯膠 (Sy) 的提純36
  • 3.3.2 酪蛋白疏水肽 (CHP) 的制備36
  • 3.3.3 酪蛋白疏水肽組分分析36
  • 3.3.4 分子量分布測定36-37
  • 3.3.5 氨基酸組成分析37
  • 3.3.6 表面疏水性分析37
  • 3.3.7 平均疏水值的測定37
  • 3.3.8 掃描電鏡分析37
  • 3.3.9 Maillard反應(yīng)接枝物的制備37
  • 3.3.10 反應(yīng)物自由氨基含量和接枝度的測定37-38
  • 3.3.11 褐變指數(shù)測定38-39
  • 3.3.12 相對溶解度的測定39
  • 3.3.13 表面張力和界面張力的測定39
  • 3.3.14 粘彈性測定39
  • 3.3.15 乳化能力和乳化穩(wěn)定性測定39-40
  • 3.4 結(jié)果與討論40-51
  • 3.4.1 酪蛋白疏水肽產(chǎn)率和組分分析40
  • 3.4.2 不同水解度的水解肽及其對應(yīng)CHP的氨基酸組成分析40-41
  • 3.4.3 CHP和對應(yīng)水解肽的分子量分布41-42
  • 3.4.4 CHP的疏水性分析42-43
  • 3.4.5 掃描電鏡分析43
  • 3.4.6 Maillard反應(yīng)條件的優(yōu)化43-44
  • 3.4.7 SyCHP接枝物的接枝度和褐變程度測定44-45
  • 3.4.8 接枝物的高效體積排阻色譜分析45-47
  • 3.4.9 相對溶解度測定47-48
  • 3.4.10 接枝物的表面物理化學(xué)性能48-51
  • 3.5 本章小結(jié)51-52
  • 第四章 SyCHP接枝物在水包油乳液體系中的穩(wěn)定性研究52-63
  • 4.1 引言52
  • 4.2 實驗試劑與儀器52-53
  • 4.2.1 實驗試劑52
  • 4.2.2 實驗儀器52-53
  • 4.3 實驗方法53-54
  • 4.3.1 水包油乳液的制備53
  • 4.3.2 乳液粒徑測定53
  • 4.3.3 顯微鏡分析53
  • 4.3.4 多糖分子量分布測定53
  • 4.3.5 接枝物SyCHP的純化53
  • 4.3.6 純化后接枝物的紅外光譜分析53
  • 4.3.7 純化后接枝物的分配系數(shù)測定53-54
  • 4.3.8 純化后接枝物乳化能力和乳化穩(wěn)定性測定54
  • 4.4 結(jié)果與討論54-61
  • 4.4.1 乳液穩(wěn)定性影響因素研究54-55
  • 4.4.2 SyCHP接枝物在水包油乳液體系中的粒徑分布55-56
  • 4.4.3 顯微鏡分析56-57
  • 4.4.4 評價接枝物在水包油乳液中穩(wěn)定性57-58
  • 4.4.5 純化前后接枝物的紅外光譜圖58-59
  • 4.4.6 超濾參數(shù)的選擇59-60
  • 4.4.7 純化接枝物的分配系數(shù)60
  • 4.4.8 純化接枝物親疏水性與乳化性能的關(guān)系60-61
  • 4.5 本章小結(jié)61-63
  • 主要結(jié)論與展望63-65
  • 致謝65-66
  • 參考文獻66-73
  • 附錄一 Sy多糖的分子量分布73-74
  • 附錄二 不同水解度的酪蛋白水解肽的分子量分布74-75
  • 附錄三 作者在攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文75

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