本文關(guān)鍵詞：基于卟啉的新型電致化學(xué)發(fā)光生物傳感器及其核酸蛋白分析應(yīng)用研究

  更多相關(guān)文章： 電致化學(xué)發(fā)光 生物傳感 G四鏈體 核酸適配體 卟啉 量子點(diǎn)

【摘要】：電致化學(xué)發(fā)光(electrochemiluminescence, ECL)技術(shù)具有較好的可控性、選擇性、重現(xiàn)性及較高的檢測靈敏度,主要應(yīng)用于臨床、農(nóng)業(yè)、環(huán)境和生物檢測等領(lǐng)域。核酸是遺傳信息的攜帶者,在生命發(fā)展過程中具有重要意義。核酸適配體是能夠特異性結(jié)合某些小分子或蛋白的具有特殊結(jié)構(gòu)的核酸。核酸適配體在參與構(gòu)建生物傳感體系用于檢測某些特定蛋白或小分子的過程中發(fā)揮著重要的作用。卟啉(P orphyrin)及金屬卟啉(metalloporphyrin)因具有高度共軛的雜環(huán)結(jié)構(gòu)而具備良好的光電效應(yīng)、電子傳輸和分離能力及電致化學(xué)發(fā)光活性。本論文主要研究基于卟啉的電致化學(xué)發(fā)光生物傳感器并研究其在核酸、蛋白質(zhì)檢測方面的應(yīng)用。1.基于卟啉超分子納米團(tuán)簇電致化學(xué)發(fā)光的一種通用的DNA傳感策略本實(shí)驗(yàn)以H7N9病毒H7亞型的引物序列為檢測對象,用自行設(shè)計(jì)的發(fā)卡結(jié)構(gòu)DNA特異性捕獲目標(biāo)DNA,發(fā)卡結(jié)構(gòu)打開后暴露的末端修飾基團(tuán)為傳感體系構(gòu)建提供可能。根據(jù)金屬卟啉可參與軸向配位的特點(diǎn),利用富勒烯苯胺咪唑復(fù)合物富集ZnTPP合成了一種卟啉超分子納米團(tuán)簇C60-ZnTPP復(fù)合物,并作為電致化學(xué)發(fā)光的信號分子。我們利用環(huán)糊精分子的中空桶狀結(jié)構(gòu)及其常作為物質(zhì)包絡(luò)主體的特性,將電致化學(xué)發(fā)光體組裝并固定在cDNA末端,構(gòu)建了基于電致化學(xué)發(fā)光的通用DNA傳感策略。經(jīng)電致化學(xué)發(fā)光分析檢測,本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),構(gòu)建的電致化學(xué)發(fā)光生物傳感體系能夠很好地檢測到目標(biāo)DNA,檢測下限可達(dá)1.0 pM。該體系使用通用、簡易的信號標(biāo)記、放大手段和DNA檢測策略,對核酸的靈敏度高、重現(xiàn)性好、檢測下限低、線性范圍寬、穩(wěn)定性良好,具有廣闊的應(yīng)用前景。2.以溶菌酶和血紅素共觸發(fā)的適配體功能化量子點(diǎn)的特異性電致化學(xué)發(fā)光檢測平臺本工作基于血紅素/G四鏈體復(fù)合物設(shè)計(jì)并構(gòu)建了一種高效快速的電致化學(xué)發(fā)光平臺用于檢測溶菌酶蛋白。利用吸附在殼聚糖上的納米金來固定末端為巰基的發(fā)卡結(jié)構(gòu)核酸適配體,該發(fā)卡結(jié)構(gòu)DNA由溶菌酶適配體和G四鏈體序列組成。在血紅素和溶菌酶同時(shí)存在的情況下,發(fā)卡結(jié)構(gòu)可以打開并生成血紅素/G-四鏈體和溶菌酶適配體復(fù)合物,前者可通過消耗電致化學(xué)發(fā)光內(nèi)源性共反應(yīng)劑O2猝滅量子點(diǎn)ECL效應(yīng)。這種電致化學(xué)發(fā)光檢測策略顯示出了較好的線性響應(yīng)區(qū)間,且檢測范圍可達(dá)20pg mL-1～5μg mL-1。
【關(guān)鍵詞】：電致化學(xué)發(fā)光 生物傳感 G四鏈體 核酸適配體 卟啉 量子點(diǎn)
【學(xué)位授予單位】：南京理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：TP212.3;O657.1
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-10
• 1 緒論10-24
• 1.1 生物傳感器10-11
• 1.2 電致化學(xué)發(fā)光11-17
• 1.2.1 電致化學(xué)發(fā)光簡介11-12
• 1.2.2 電致化學(xué)發(fā)光的兩種基本途徑12-14
• 1.2.3 電致化學(xué)發(fā)光體系14-17
• 1.2.4 電致化學(xué)發(fā)光在生物分析中的應(yīng)用17
• 1.3 核酸及核酸適配體在生物傳感器中的應(yīng)用17-20
• 1.3.1 核酸及核酸適配體17-18
• 1.3.2 核酸在生物傳感器中的應(yīng)用18-19
• 1.3.3 核酸適配體在生物傳感器中的應(yīng)用19-20
• 1.4 電致化學(xué)發(fā)光生物傳感器20-22
• 1.4.1 電致化學(xué)發(fā)光核酸傳感器20-21
• 1.4.2 電致化學(xué)發(fā)光免疫分析傳感器21-22
• 本研究思路22-24
• 2 基于卟啉超分子納米團(tuán)簇電致化學(xué)發(fā)光的一種通用DNA傳感策略24-41
• 2.1 引言24-26
• 2.2 實(shí)驗(yàn)部分26-31
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑26-27
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器27-28
• 2.2.3 新型電致化學(xué)發(fā)光納米團(tuán)簇的合成28
• 2.2.4 電致化學(xué)發(fā)光傳感體系的構(gòu)建28-29
• 2.2.5 電致化學(xué)發(fā)光核酸傳感體系的構(gòu)建及檢測29-31
• 2.3 結(jié)果與討論31-40
• 2.3.1 新型電致化學(xué)發(fā)光納米團(tuán)簇的表征31-35
• 2.3.2 ECL體系的構(gòu)建35-38
• 2.3.3 ECL傳感體系對核酸的檢測38-40
• 2.4. 實(shí)驗(yàn)小結(jié)40-41
• 3 以溶菌酶和血紅素為共觸發(fā)劑的適配體功能化量子點(diǎn)的電致化學(xué)發(fā)光檢測平臺41-50
• 3.1 引言41
• 3.2 實(shí)驗(yàn)部分41-44
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑及儀器41-42
• 3.2.2 量子點(diǎn)的制備42
• 3.2.3 金納米粒子的制備42-43
• 3.2.4 ECL傳感體系的構(gòu)建43-44
• 3.3 結(jié)果與討論44-49
• 3.3.1 電化學(xué)阻抗表征44
• 3.3.2 生物傳感器的ECL及CV表征44-45
• 3.3.3 ECL傳感器重現(xiàn)性及精確性表征45-46
• 3.3.4 條件優(yōu)化46-48
• 3.3.5 溶菌酶的檢測48
• 3.3.6 選擇性和特異性48-49
• 3.4. 實(shí)驗(yàn)小結(jié)49-50
• 4 總結(jié)50-51
• 致謝51-52
• 參考文獻(xiàn)52-59
• 附錄59

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1 安鏡如;姚晴;;電致化學(xué)發(fā)光法測定痕量鎳(Ⅱ)及機(jī)理研究[J];分析化學(xué);1990年09期

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本文編號：887093