發(fā)布時間：2017-09-19 04:06

  本文關(guān)鍵詞：8-羥基喹啉類巰基熒光探針的研究

  更多相關(guān)文章： 熒光分析法 8-羥基喹啉 半胱氨酸(Cys) 谷胱甘肽(GSH) 細胞成像

【摘要】：熒光分析法具有高靈敏度、高選擇性,可實現(xiàn)細胞內(nèi)定位以及對生物組織破壞性小等優(yōu)點,因此已廣泛用于生物醫(yī)學、環(huán)境檢測等領(lǐng)域。生物體內(nèi)巰基化合物如半胱氨酸(Cys)、高半胱氨酸(Hcy)、谷胱甘肽(GSH)等對維持細胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定性具有重要作用。設(shè)計合成出具有單一選擇性檢測巰基化合物已成為當前的研究熱點。本文在巰基熒光探針的研究工作如下:(1)設(shè)計合成了一種以5-氨基-8-羥基喹啉為熒光基團,2,4-二硝基苯磺酰基為識別基團的探針5-(2,4-二硝基苯磺酰氨)-8-羥基喹啉H1。研究表明,探針H1本身熒光很弱,當加入Cys后,在530nm處熒光強度出現(xiàn)明顯增強。在最優(yōu)條件下(t=35min,T=37℃,pH=7.4),H1對Cys測定的線性范圍為7×10-5mol/L至2.7×10-4mol/L,檢測限為7.9×10-7mol/L。其他巰基化合物不干擾測定。探針H1已成功用于細胞內(nèi)Cys的熒光成像。(2)以5-氨基-8羥基喹啉與乙二醛為原料合成熒光探針H2,并考察了其對巰基化合物的選擇性。研究表明,H2本身熒光很弱,在最佳條件下(pH=7.4、T=50℃、t=120mim)探針H2與Cys反應,在430nm處熒光增強,分別在5.0×10-5-1.0×10-4mol/L和1.0×10-4-7.0×10-4mol/L濃度范圍內(nèi)熒光變化與Cys濃度呈線性關(guān)系,檢測限分別為4.4×10-7mol/L、3.5×10-6mol/L。其他巰基化合物不干擾測定,探針H2已成功用于HeLa細胞內(nèi)Cys的熒成像。(3)合成了一種多功能熒光探針5-(對二甲氨基苯甲胺)-8-羥基喹啉H3。研究表明,在酸性條件下,H3可用作為一種比率型pH熒光探針,響應范圍pH為2-7,pKa為5.47。在堿性條件及十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)存在下,Cd~(2+)和Al~(3+)能使H_3熒光顯著增強,而GSH能夠使H3-CTAB-Cd~(2+)體系的熒光顯著下降,據(jù)此建立了膠束增敏熒光光度法測定GSH的方法。該方法線性范圍5-250μmol/L,檢測限為5.81×10-8 mol/L。
【關(guān)鍵詞】：熒光分析法 8-羥基喹啉 半胱氨酸(Cys) 谷胱甘肽(GSH) 細胞成像
【學位授予單位】：武漢工程大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：O657.3
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-11
• 第一章 緒論11-27
• 1.1 引言11
• 1.2 常見熒光探針11-23
• 1.2.1 羅丹明類熒光探針11-13
• 1.2.2 熒光素類熒光探針13-15
• 1.2.3 香豆素類熒光探針15-16
• 1.2.4 萘酰亞胺類熒光探針16-18
• 1.2.5 喹啉類熒光探針18-20
• 1.2.6 BODIPY類熒光探針20-21
• 1.2.7 其他類熒光探針21-23
• 1.3 巰基及其熒光探針概述23-26
• 1.4 立題依據(jù)及本文研究內(nèi)容26-27
• 第二章 5-（2，，4-二硝基苯磺酰胺）8羥基喹啉巰基熒光探針的研究27-39
• 2.1 前言27
• 2.2 實驗部分27-30
• 2.2.1 實驗藥品及儀器27-28
• 2.2.2 H1合成28-29
• 2.2.3 溶液配制29
• 2.2.4 H1與半胱氨酸的反應29
• 2.2.5 H1的細胞毒性實驗29-30
• 2.2.6 H1的細胞成像實驗30
• 2.3 結(jié)果與分析30-36
• 2.3.1 H1紅外光譜圖30
• 2.3.2 H1質(zhì)譜圖30-31
• 2.3.3 H1的氫核磁共振圖31-32
• 2.3.4 熒光結(jié)果分析32-36
• 2.4 干擾測試36-37
• 2.5 細胞毒性實驗37-38
• 2.6 細胞成像38
• 2.7 小結(jié)38-39
• 第三章 5-（亞胺醛基）8羥基喹啉巰基熒光探針的研究39-47
• 3.1 前言39
• 3.2 實驗部分39-40
• 3.2.1 實驗藥品與儀器39
• 3.2.2 H2的制備39-40
• 3.2.3 溶液的配置40
• 3.2.4 熒光分析測定40
• 3.2.5 細胞實驗40
• 3.3 結(jié)果與討論40-45
• 3.3.1 H2結(jié)構(gòu)表征40-41
• 3.3.2 H2與Cys反應前后的光譜變化41-42
• 3.3.3 pH對H2與Cys反應的影響42
• 3.3.4 溫度和時間對H2與Cys反應的影響42-43
• 3.3.5 H2對巰基化合物的選擇性43
• 3.3.6 工作曲線的測定43-44
• 3.3.7 干擾測試44-45
• 3.4 細胞實驗45-46
• 3.5 小結(jié)46-47
• 第四章 5-（對二甲氨基苯甲胺）8羥基喹啉巰基熒光探針的研究47-63
• 4.1 前言47
• 4.2 實驗部分47-49
• 4.2.1 實驗藥品及儀器47
• 4.2.2 5-（對二甲氨基苯甲胺）8羥基喹啉H3的合成47-48
• 4.2.3 溶液的配置48
• 4.2.4 pH對H3的熒光性能的影響48
• 4.2.5 H3對金屬離子的熒光響應48
• 4.2.6 H3-Cd~(2+)絡(luò)合物對GSH的測定48-49
• 4.3 結(jié)果與分析49-61
• 4.3.1 H3的譜圖分析49-50
• 4.3.2 H3用于比率檢測型pH值50-52
• 4.3.3 對金屬離子選擇性測定52-57
• 4.3.4 巰基化合物與探針/金屬絡(luò)合物反應57-61
• 4.4 小結(jié)61-63
• 結(jié)論及展望63-65
• 參考文獻65-71
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表論文情況71-73
• 攻讀碩士學位期間的工作所受到資助科研項目73-75
• 致謝75

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 楊志廣;李運林;劉增臣;田豐收;彭鵬;;有機巰基小分子生物熒光探針研究進展[J];分析試驗室;2015年11期

2 王紅萍;崔愛軍;田茂忠;彭孝軍;;氟硼熒(BODIPY)染料的研究進展[J];當代化工;2007年02期

3 羅先金,黃德音,宋健,程侶柏;新型香豆素熒光染料的合成及應用[J];中國科學(B輯 化學);2001年06期

本文編號：879384