發(fā)布時(shí)間：2017-09-15 23:33

  本文關(guān)鍵詞：基于納米金信號(hào)放大模式的微流控芯片研究

  更多相關(guān)文章： 微流控芯片 化學(xué)發(fā)光 信號(hào)放大 納米金 生物分子

【摘要】：微流控芯片是集樣品制備、反應(yīng)、分離、混合、檢測(cè)等基本單元于一體的微型分析平臺(tái),其具有成本低,分析速度快,良好的化學(xué)相容性等特點(diǎn),被廣泛的應(yīng)用于疾病的分析中。本論文主要研究基于納米金信號(hào)放大的微流控芯片,通過(guò)辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記在納米金(AuNPs)上,實(shí)現(xiàn)了PDMS和紙微流控芯片上生物分子的測(cè)定。本論文分為兩個(gè)部分,第一部分為綜述,主要介紹了微流控芯片的發(fā)展和概述、制作方法、特點(diǎn)和表面改性、以及應(yīng)用。第二部分為研究報(bào)告,有兩部分組成,具體內(nèi)容如下：一.基于納米金信號(hào)放大的PDMS微流控芯片測(cè)定人免疫球蛋白的研究本工作主要建立一種基于納米金信號(hào)放大,PDMS化學(xué)發(fā)光免疫芯片高靈敏的檢測(cè)人免疫球蛋白(IgG)的方法。將HRP和羊抗人IgG (Ab2)同時(shí)標(biāo)記在納米金上,HRP催化Luminol-H_2O_2化學(xué)發(fā)光體系信號(hào)放大,通過(guò)夾心法抗原-抗體間特異性的反應(yīng),實(shí)現(xiàn)了人IgG的靈敏測(cè)定。此外,PDMS芯片采用的是雙螺旋通道,可以充分的進(jìn)行溶液混合和反應(yīng),同時(shí)作為檢測(cè)區(qū),檢測(cè)部分集中,便于化學(xué)發(fā)光信號(hào)的采集。結(jié)果表明,與傳統(tǒng)的PDMS芯片免疫方法相比,Ab_2-AuNPs-HRP所測(cè)得的化學(xué)發(fā)光信號(hào)放大了7.4倍,并且化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度與不同濃度的人IgG有很好的線性關(guān)系,測(cè)得的最低濃度為0.1 ng/mL,檢出限為0.03ng/mL。該P(yáng)DMS微流控免疫芯片高靈敏的實(shí)現(xiàn)了人IgG檢測(cè),為以后疾病的診斷和治療提供了新的方法。二.基于納米金信號(hào)放大的紙質(zhì)微流控芯片測(cè)定腺苷的研究本工作主要基于納米金信號(hào)放大的方法,結(jié)合紙質(zhì)微流控芯片實(shí)現(xiàn)生物分子腺苷的檢測(cè)。以納米金為載體,HRP通過(guò)靜電作用結(jié)合在納米金表面,cDNA通過(guò)H-S鍵作用在納米金上,由于腺苷的競(jìng)爭(zhēng)作用,適配體DNA的構(gòu)象發(fā)生變化,通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則連接的cDNA-AuNPs-HRP的量減少,相對(duì)強(qiáng)度降低。運(yùn)用環(huán)爐洗滌技術(shù),紙芯片作為分離和檢測(cè)載體,最終催化3,3',5,5'-tetramethylbenzidine (TMB)-H_2O_2發(fā)生顯色反應(yīng),實(shí)現(xiàn)對(duì)腺苷的靈敏檢測(cè)。結(jié)果表明,與傳統(tǒng)的cDNA-HRP相比,cDNA-AuNPs-HRP復(fù)合物可以實(shí)現(xiàn)信號(hào)放大作用,經(jīng)過(guò)計(jì)算,最終放大的倍率為12.4倍,在最優(yōu)的實(shí)驗(yàn)條件下,測(cè)得腺苷的最低濃度為1.0×10-13 mol/L,檢出限為3.3×10-14mol/L。該紙質(zhì)微流控芯片試劑用量少、成本低、操作簡(jiǎn)單、檢出限低,適合用于醫(yī)療及環(huán)境中分析生物分子的測(cè)定。
【關(guān)鍵詞】：微流控芯片 化學(xué)發(fā)光 信號(hào)放大 納米金 生物分子
【學(xué)位授予單位】：陜西師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：TB383.1;O657.3
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-9
• 第1章 綜述9-25
• 1.1 微流控芯片9-16
• 1.1.1 微流控芯片的概述及發(fā)展9-11
• 1.1.1.1 PDMS微流控芯片的概述及發(fā)展9-10
• 1.1.1.2 紙質(zhì)微流控芯片的概述及發(fā)展10-11
• 1.1.2 微流控芯片的制作方法11-14
• 1.1.2.1 PDMS微流控芯片的制作方法11-13
• 1.1.2.2 紙質(zhì)微流控芯片的制作方法13-14
• 1.1.3 微流控芯片的特點(diǎn)及表面改性14-16
• 1.1.3.1 PDMS微流控芯片的特點(diǎn)及表面改性14-16
• 1.1.3.2 紙質(zhì)微流控芯片的特點(diǎn)及表面改性16
• 1.2 微流控芯片的應(yīng)用16-24
• 1.2.1 PDMS微流控芯片的應(yīng)用16-21
• 1.2.1.1 生物分子的檢測(cè)在PDMS微流控芯片中的應(yīng)用17-19
• 1.2.1.2 信號(hào)放大方法在PDMS微流控芯片中的應(yīng)用19-21
• 1.2.2 紙質(zhì)微流控芯片的應(yīng)用21-24
• 1.2.2.1 生物分子的檢測(cè)在紙質(zhì)微流控芯片中的應(yīng)用21-23
• 1.2.2.2 信號(hào)放大方法在紙質(zhì)微流控芯片中的應(yīng)用23-24
• 1.3 本論文的選題目的及意義24-25
• 第2章 研究報(bào)告25-49
• 2.1 基于納米金信號(hào)放大PDMS微流控芯片測(cè)定人免疫球蛋白的研究25-36
• 2.1.1 引言25-26
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)部分26-28
• 2.1.3 結(jié)果與討論28-36
• 2.1.4 小結(jié)36
• 2.2 基于納米金信號(hào)放大紙質(zhì)微流控芯片測(cè)定腺苷的研究36-49
• 2.2.1 引言36-37
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)部分37-40
• 2.2.3 結(jié)果與討論40-47
• 2.2.4 小結(jié)47-49
• 結(jié)論49-51
• 參考文獻(xiàn)51-69
• 致謝69-71
• 攻讀學(xué)位期間研究成果71

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