本文關(guān)鍵詞：過氧釩配合物抑制朊蛋白淀粉樣肽的纖維形成

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【摘要】：蛋白構(gòu)象病主要包括阿爾茲海默癥、朊病毒癥、帕金森癥等神經(jīng)退行性疾病,這些病的發(fā)生與淀粉樣蛋白的聚集及纖維化有關(guān),蛋白由正常構(gòu)象變換為致病型構(gòu)象。朊蛋白構(gòu)象變化,沉積和神經(jīng)毒性與朊病毒病息息相關(guān),其致病機理為正常的朊蛋白Pr PC通過構(gòu)象變換轉(zhuǎn)化為致病型蛋白PrPSc。本文中,我們選用朊蛋白N-端的一段神經(jīng)肽PrP106-126為研究對象,該片段的理化和生化性質(zhì)與致病型朊蛋白PrPSc相似,包括纖維化、細胞毒性、抗蛋白酶水解活性、與細胞膜的結(jié)合性等。另外,109位和112位甲硫氨酸的氧化能夠顯著減弱淀粉樣纖維的形成和其抗蛋白酶K水解性,但不能降低多肽在體內(nèi)及體外的神經(jīng)細胞毒性�？紤]到甲硫氨酸的上述特性,PrP106-126的突變體M109F也選為研究對象,探索抑制淀粉樣多肽聚集的藥物,被用于對朊病毒癥的研究。本論文選擇具有不同立體效應(yīng)的過氧釩配合物和空間結(jié)構(gòu)一致,芳香配體不同的過氧釩金配合物與PrP106-126及其突變體M109F相互作用,發(fā)現(xiàn)它們對這兩條多肽有很好的抑制效果和結(jié)合親,特別是對該蛋白體系的核磁研究發(fā)現(xiàn),過氧釩配合物對多肽中His111和Met109/112的共振信號影響顯著,結(jié)合質(zhì)譜結(jié)果揭示過氧釩配合物對PrP106-126及其突變體M109F有直接的結(jié)合作用及Met殘基氧化作用。另外,過氧釩配合物與多肽結(jié)合能力的大小與抑制能力并無直接聯(lián)系,盡管有的釩配合物與多肽的結(jié)合能力強,但是抑制效果并不明顯。釩配合物本身的結(jié)構(gòu)性質(zhì)、與單體、寡聚體和纖維的結(jié)合能力,以及蛋白聚集后周圍環(huán)境的改變都會影響釩配合物的抑制效果。雖然過氧釩配合物自身對神經(jīng)細胞有一定的細胞毒性,但仍能夠通過與PrP106-126及其突變體M109F相互作用,減小兩條肽聚集體產(chǎn)生的細胞毒性。淀粉樣蛋白構(gòu)象病的治療是一項重要的挑戰(zhàn)。本研究過程結(jié)合多種實驗手段,通過對過氧釩配合物與淀粉樣蛋白相互作用的研究,為潛在金屬藥物用于治療神經(jīng)退行性疾病的研究提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：朊蛋白神經(jīng)肽 過氧釩配合物 纖維化 甲硫氨酸氧化 細胞毒性
【學(xué)位授予單位】：中北大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R741
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-10
• 主要符號表10-11
• 第1章 緒論11-17
• 1.1 前言11
• 1.2 常見的蛋白構(gòu)象病11-14
• 1.2.1 阿爾茲海默病11-12
• 1.2.2 帕金森氏病12
• 1.2.3 II型糖尿病12
• 1.2.4 朊病毒病12-14
• 1.3 淀粉樣蛋白或多肽聚集過程和細胞毒性14-15
• 1.4 淀粉樣蛋白聚集的抑制劑15-17
• 第2章 過氧釩配合物與PrP106-126及其突變體的相互作用17-64
• 2.1 朊蛋白淀粉樣肽17-22
• 2.1.1 朊蛋白淀粉樣肽簡述17-19
• 2.1.2 人朊蛋白淀粉樣肽抑19-20
• 2.1.3 課題研究意義20-22
• 2.2 主要試劑及實驗儀器22-23
• 2.2.1 化學(xué)試劑22-23
• 2.2.2 實驗儀器23
• 2.3 過氧釩配合物的合成23-26
• 2.3.1 (NH_4)_3[VO(O_2)_2(ox)]·2H_2O合成23-24
• 2.3.2 (H_2bipy)[V_2O_2(O_2)4(bipy)_2]·6H_2O合成24
• 2.3.3 Na[VO(O_2)_2]·Na2SO4合成24-25
• 2.3.4 K_2[nic H{VO(O_2)_2}_2]·H_2O合成25
• 2.3.5 (NH_4)[VO(O_2)2(bipy)]·4H_2O合成25-26
• 2.3.6 (NH_4)[VO(O_2)2(phen)]·2H_2O合成26
• 2.4 過氧釩配合物與淀粉樣肽相互作用實驗方法26-30
• 2.4.1 熒光光譜實驗研究過氧釩配合物對Pr P106-126及其突變體M109F聚集抑制作用26-28
• 2.4.2 透射電子顯微鏡（Transmission Electron Microscope，，TEM）成像實驗研究過氧釩配合物對Pr P106-126及其突變體M109F聚集抑制作用28
• 2.4.3 原子力顯微鏡（Atomic force microscope，AFM）成像實驗研究過氧釩配合物對Pr P106-126及其突變體M109F聚集抑制作用28
• 2.4.4 質(zhì)譜研究過氧釩配合物與Pr P106-126及其突變體M109F的結(jié)合作用..1828-29
• 2.4.5 核磁共振研究過氧釩配合物與Pr P106-126及其突變體M109F的相互作用29
• 2.4.6 循環(huán)伏安法研究過氧釩配合物與Pr P106-126及其突變體M109F的相互作用29
• 2.4.7 HPLC研究過氧釩配合物與Pr P106-126及其突變體M109F的相互作用1929-30
• 2.4.8 MTT法研究過氧釩配合物對Pr P106-126及其突變體M109F聚集體的細胞毒性的調(diào)控30
• 2.5 結(jié)果與討論30-63
• 2.5.1 過氧釩配合物對Pr P106-126及其突變體M109F聚集的熒光分析30-32
• 2.5.2 過氧釩配合物抑制Pr P106-126和及其突變體M109F聚集的IC50值和透射電鏡實驗32-37
• 2.5.3 AFM研究過氧釩配合物對Pr P06-126及其突變體M109F聚集的抑制作用37-40
• 2.5.4 過氧釩配合物對Pr P106-126和M109F肽作用的質(zhì)譜結(jié)果40-45
• 2.5.5 過氧釩配合物對Pr P106-126和M109F肽作用的核磁結(jié)果45-51
• 2.5.6 HPLC分析51-52
• 2.5.7 循環(huán)伏安法研究過氧釩配合物與Pr P106-126及其突變體M109F的結(jié)合方式52-57
• 2.5.8 內(nèi)源熒光法研究過氧釩配合物與M109F肽的結(jié)合57-59
• 2.5.9 過氧釩配合物對Pr P106-126及其突變體M109F肽細胞毒性的調(diào)控59-63
• 2.6 小結(jié)63-64
• 第3章 結(jié)論與展望64-66
• 3.1 結(jié)論64-65
• 3.2 展望65-66
• 參考文獻66-76
• 碩士期間論文發(fā)表情況76-77
• 致謝77-78

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 曹傲能;汪蔚學(xué);宇文泰然;鄧巍;來魯華;;小熱休克蛋白MjHSP16.5對多肽纖維生長的抑制及對成熟纖維的解聚作用[J];物理化學(xué)學(xué)報;2010年07期

2 毛曉波;王晨軒;劉磊;馬曉晶;牛琳;楊延蓮;王琛;;液/固界面多肽分子組裝精細結(jié)構(gòu)的掃描隧道顯微鏡研究[J];物理化學(xué)學(xué)報;2010年04期

3 李育新;;阿爾茨海默病病因研究進展[J];中國醫(yī)療前沿;2009年04期

4 王華麗;于欣;;中國阿爾茨海默病的流行病學(xué)現(xiàn)狀[J];中華全科醫(yī)師雜志;2006年06期

本文編號：840227