本文關(guān)鍵詞：野薔薇根多糖的提取、純化及生物活性研究

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【摘要】：本文選野薔薇根(Rosa Multiflora Thunb)為原料,以野薔薇根多糖為研究對(duì)象,較系統(tǒng)地研究了其提取、分離純化的工藝條件。通過(guò)對(duì)野薔薇根多糖的抗氧化性及抑菌功能進(jìn)行了初步研究,為其在食品、醫(yī)藥及保健品等方面的應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。研究結(jié)果如下:(1)考察不同提取方法對(duì)野薔薇根多糖得率的影響。分別采用熱水提取法、微波法、超聲波法、超聲微波法、酶解法和超聲微波法酶解協(xié)同法提取野薔薇根多糖,并設(shè)計(jì)響應(yīng)曲面法優(yōu)化超聲-微波輔助提取和超聲微波法酶解協(xié)同法提取的最佳工藝。結(jié)果表明,超聲-微波輔助提取和超聲微波法酶解協(xié)同法提取的得率最高。超聲-微波輔助法提取野薔薇根多糖的最佳工藝條件為:提取時(shí)間22 min,微波功率317 W,提取溫度81℃,料液比32:1(mL/g),實(shí)測(cè)的多糖得率為6.10mg/g;超聲微波法酶解協(xié)同法提取野薔薇根多糖的最佳工藝條件為:纖維素酶添加量1.15%(酶活為40U/mg)、pH值5.72、提取溫度81.19℃、液料比12.56:1(mL/g)。在此條件下,野薔薇根多糖的得率為10.48mg/g。(2)篩選野薔薇根多糖脫蛋白的最佳工藝。以蛋白去除率為主要考察指標(biāo),比較了Sevag法、TCA法(三氯乙酸法)、酶法及TCA-酶結(jié)合法對(duì)野薔薇根多糖脫蛋白率的效果,并采用響應(yīng)曲面法優(yōu)化TCA法脫蛋白的最佳工藝。結(jié)果,優(yōu)化后的TCA法脫蛋白最佳工藝為:TCA質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.9%、體積比1:1、靜置時(shí)間70min。在此條件下,蛋白去除率為75.92%,多糖損失率為22.57%。(3)探討雙氧水法脫色野薔薇根多糖的最佳工藝條件。用雙氧水法脫色野薔薇根多糖,通過(guò)響應(yīng)曲面法確定野薔薇根多糖脫色的最佳工藝條件。雙氧水法對(duì)野薔薇根多糖的最佳脫色工藝條件為:H2O2體積分?jǐn)?shù)35.0%、pH 9.0、脫色時(shí)間4.5 h,此時(shí)多糖脫色率和保留率分別為95.48%和75.17%。(4)建立野薔薇根多糖分離純化的方法,利用DEAE-52纖維素對(duì)野薔薇根多糖進(jìn)行分離純化,并優(yōu)化其工藝。結(jié)果,最佳分離純化工藝參數(shù)為:離子強(qiáng)度為:水、0.1mol/L和0.3mol/L NaCl,DEAE-52纖維素添加量30g、流速30mL/h;經(jīng)DEAE-52纖維素柱層析得到的三個(gè)組分RMTP-1、RMTP-2及RMTP-3通過(guò)凍融實(shí)驗(yàn)、紫外光譜鑒定為均一性的野薔薇根多糖組分。紫外光譜分析結(jié)果表明該多糖組分不含核酸和蛋白質(zhì)。(5)通過(guò)理化性質(zhì)研究,野薔薇根多糖RMTP-1和RMTP-2為不含蛋白質(zhì)及酚類物質(zhì)、具有多糖類化合物的通性。紅外光譜分析表明,RMTP-1和RMTP-2都具有多糖的特征吸收峰。通過(guò)氣質(zhì)聯(lián)用法(GC-MS)測(cè)定RMTP-1、RMTP-2的單糖組成:RMTP-1主要由木糖、果糖及甘露糖組成;RMTP-2主要由木糖和果糖組成。(6)采用化學(xué)方法對(duì)野薔薇根多糖進(jìn)行體外抗氧化活性測(cè)定,與VC進(jìn)行了比較,并采用平板打孔法和試管稀釋法對(duì)野薔薇根多糖進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,野薔薇根多糖具有一定的抗氧化活性,野薔薇根多糖的抗氧化性略低于VC,并在一定濃度范圍內(nèi)抗氧化活性與多糖含量呈正相關(guān)系;野薔薇根多糖對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、奇異變形桿菌都具有較明顯的抑制作用。
【關(guān)鍵詞】：野薔薇根 多糖 提取 純化 抗氧化性 抑菌作用
【學(xué)位授予單位】：新疆師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：O657.63;TQ281
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-11
• 1 前言11-17
• 1.1 野薔薇的簡(jiǎn)述11-12
• 1.1.1 野薔薇的分類地位與形態(tài)特征11
• 1.1.2 野生薔薇屬植物資源的開(kāi)發(fā)利用價(jià)值11-12
• 1.1.3 成分與功效12
• 1.2 多糖研究進(jìn)展12-15
• 1.2.1 多糖的提取12-13
• 1.2.2 多糖的生物活性13
• 1.2.3 多糖的分離純化13-14
• 1.2.4 多糖的含量測(cè)定與結(jié)構(gòu)分析14-15
• 1.3 本課題的研究目的意義，，主要內(nèi)容和創(chuàng)新點(diǎn)15-17
• 1.3.1 研究目的意義15-16
• 1.3.2 主要內(nèi)容16
• 1.3.3 本論文的創(chuàng)新點(diǎn)16-17
• 2 野薔薇根多糖的提取工藝研究17-36
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料17-18
• 2.1.1 原料17
• 2.1.2 試劑17
• 2.1.3 儀器設(shè)備17-18
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法18-20
• 2.2.1 原料預(yù)處理18
• 2.2.2 野薔薇根多糖提取工藝流程18
• 2.2.3 超聲微波提取18
• 2.2.4 超聲微波提取響應(yīng)面優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)18-19
• 2.2.5 超聲微波酶解協(xié)同提取19
• 2.2.6 超聲微波酶解協(xié)同提取響應(yīng)面優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)19
• 2.2.7 不同提取方法19-20
• 2.2.8 多糖含量的測(cè)定20
• 2.3 結(jié)果與討論20-34
• 2.3.1 超聲微波提取單因素實(shí)驗(yàn)20-23
• 2.3.2 響應(yīng)曲面法優(yōu)化超聲微波提取工藝23-25
• 2.3.3 響應(yīng)曲面與等高線分析25-27
• 2.3.4 超聲微波提取最佳工藝參數(shù)的確定及模型驗(yàn)證27
• 2.3.5 超聲微波酶解協(xié)同提取單因素實(shí)驗(yàn)27-30
• 2.3.6 響應(yīng)曲面法優(yōu)化超聲微波酶解協(xié)同提取工藝30-32
• 2.3.7 響應(yīng)曲面與等高線分析32-34
• 2.3.8 超聲-微波酶解協(xié)同提取最佳工藝參數(shù)的確定及模型驗(yàn)證34
• 2.3.9 不同提取方法比較34
• 2.4 本章小結(jié)34-36
• 3 野薔薇根多糖的分離純化36-56
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料36-38
• 3.1.1 原料36
• 3.1.2 試劑36-37
• 3.1.3 儀器設(shè)備37-38
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法38-41
• 3.2.1 野薔薇根多糖的分離純化工藝流程38
• 3.2.2 脫蛋白38-39
• 3.2.3 脫色39-40
• 3.2.4 DEAE-52纖維素離子交換柱層析40-41
• 3.2.5 純度鑒定41
• 3.3 結(jié)果與討論41-54
• 3.3.1 脫蛋白單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果41-43
• 3.3.2 響應(yīng)曲面法優(yōu)化脫蛋白工藝43-45
• 3.3.3 脫蛋白參數(shù)的優(yōu)化與模型驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)45-46
• 3.3.4 不同脫蛋白方法的比較46
• 3.3.5 脫色單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果46-48
• 3.3.6 響應(yīng)曲面法優(yōu)化脫色工藝48-50
• 3.3.7 脫色參數(shù)的優(yōu)化與模型驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)50-51
• 3.3.8 DEAE-52纖維素離子交換柱層析的條件選擇51-53
• 3.3.9 多糖的DEAE-52纖維素離子交換層析53
• 3.3.10 純度鑒定53-54
• 3.4 本章小結(jié)54-56
• 4 野薔薇根多糖初步結(jié)構(gòu)鑒定及生物活性研究56-66
• 4.1 實(shí)驗(yàn)材料56-57
• 4.1.1 原料56
• 4.1.2 試劑56-57
• 4.1.3 儀器設(shè)備57
• 4.2 實(shí)驗(yàn)方法57-60
• 4.2.1 野薔薇根多糖組分的基本理化性質(zhì)57-58
• 4.2.2 野薔薇根多糖組分的紅外光譜測(cè)定58
• 4.2.3 野薔薇根多糖組分的氣質(zhì)聯(lián)用（CG-MS）測(cè)定58
• 4.2.4 抗氧化實(shí)驗(yàn)58-60
• 4.2.5 抑菌實(shí)驗(yàn)60
• 4.3 結(jié)果與討論60-65
• 4.3.1 野薔薇根多糖組分的基本理化性質(zhì)分析60
• 4.3.2 紅外光譜分析60-61
• 4.3.3 氣質(zhì)聯(lián)用（GC-MS）分析61-63
• 4.3.4 抗氧化實(shí)驗(yàn)結(jié)果63-64
• 4.3.5 野薔薇根多糖抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果64-65
• 4.4 本章小結(jié)65-66
• 結(jié)論66-68
• 參考文獻(xiàn)68-74
• 在學(xué)期間公開(kāi)發(fā)表論文及著作情況74-75
• 致謝75

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1 努爾皮達(dá)·阿卜拉江;其買古麗·阿沙木;迪麗努爾·馬里克;;野薔薇根中熊果酸的提取工藝研究[J];中國(guó)釀造;2012年12期

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1 努爾皮達(dá)·阿卜拉江;野薔薇根揮發(fā)油的提取、指紋圖譜及生物活性研究[D];新疆師范大學(xué);2015年

2 其買古麗·阿沙木;野薔薇根總皂苷的提取純化及活性研究[D];新疆師范大學(xué);2015年

3 阿吾提·艾買爾;野薔薇根多糖的提取、純化及生物活性研究[D];新疆師范大學(xué);2016年

本文編號(hào)：763501