本文關(guān)鍵詞：氧化還原響應(yīng)性超支化聚酰胺胺衍生物在腫瘤治療中的應(yīng)用

  更多相關(guān)文章： 超支化聚酰胺胺 氧化還原響應(yīng) 靶向作用 基因 藥物 血液相容性

【摘要】：陽離子聚合物作為載體用于腫瘤治療是近年來生物材料領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一,陽離子聚合物外端含有大量可修飾的基因,在經(jīng)過功能性分子的修飾后,能夠高效率地負(fù)載藥物和治療基因,將藥物和治療基因精準(zhǔn)地遞送到腫瘤細(xì)胞內(nèi),從而達(dá)到抑制腫瘤細(xì)胞增殖,殺死腫瘤細(xì)胞的作用。雖然在這個方面的研究已經(jīng)獲得了諸多振奮人心的成就,但是許多難題依然制約著實(shí)際應(yīng)用,比如:作為基因載體,陽離子聚合物的轉(zhuǎn)染效率遠(yuǎn)低于病毒載體的轉(zhuǎn)染效率,低轉(zhuǎn)染效率必然影響腫瘤治療的有效性;單一的基因治療耗時長,治療效果不如傳統(tǒng)的藥物化療。另一方面,作為載體材料,進(jìn)入體內(nèi)的途徑大多為靜脈注射,因此載體材料在體內(nèi)循環(huán)時將無法避免與血液發(fā)生接觸,與血液中的成分發(fā)生相互作用,因此載體材料的血液相容性方面的研究也是需要完成的工作,否則難以在臨床中應(yīng)用。含雙硫鍵的超支化聚酰胺胺外端含有大量活性基團(tuán)氨基,易于被修飾而使其具有多功能,如接上靶向分子而具有靶向功能或者連接上膠束而具有負(fù)載化療藥物的功能。加之其本身呈現(xiàn)正電性,可以包裹DNA,作為基因載體來運(yùn)用。雙硫鍵的存在賦予材料氧化還原響應(yīng)性,在腫瘤細(xì)胞內(nèi)高濃度GSH存在下,可以發(fā)生雙硫鍵的斷裂,從而釋放其所包裹的藥物或者基因,同時降低材料的毒副作用�；诖吮疚囊猿Щ埘０钒窞楹诵�,構(gòu)造基因載體、藥物和基因共載體體系。首先,文章用葉酸分子修飾超支化聚酰胺胺,構(gòu)建一種靶向的基因輸送體系,解決傳統(tǒng)基因載體的無靶向性、轉(zhuǎn)讓率低和毒性高的難題,并研究了材料的血液相容性,為以后的臨床應(yīng)用提供參考。其次,通過酰胺化反應(yīng)在超支化聚酰胺胺上連接聚乙二醇-聚乳酸,構(gòu)建一種基因和藥物共遞送載體,通過體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究載體的轉(zhuǎn)染效率和藥物負(fù)載效果,并對載體的生物相容性作出一系列的評價,以期構(gòu)建一種具有較好的生物相容性的藥物和基團(tuán)遞送體系,達(dá)到基因療法和化學(xué)療法聯(lián)合治療的綜合效果,克服單一的藥物治療的弊端,提高腫瘤治療的效果,為人類戰(zhàn)勝腫瘤做出貢獻(xiàn)。本文的具體研究內(nèi)容主要分以下兩個方面:1、葉酸靶向的氧化還原響應(yīng)性超支化聚酰胺胺用做基因載體的研究通過邁克爾加成反應(yīng)和酰胺化反應(yīng)合成葉酸靶向的氧化還原響應(yīng)性超支化聚酰胺胺FA-PAAs,通過核磁共振碳譜、紫外-可見光分光光度計(jì)、Zeta電位、粒徑和低倍透射電鏡方法對其化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征,通過凝膠滲透色譜方法證明FA-PAAs的氧化還原響應(yīng)性,利用凝膠電泳研究FA-PAAs對DNA的結(jié)合能力,通過體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)研究FA-PAAs的細(xì)胞毒性、細(xì)胞內(nèi)吞和體外轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)探究FA-PAAs運(yùn)載基因進(jìn)入細(xì)胞表達(dá)蛋白的能力和葉酸靶向作用,探索FA-PAAs作為基因載體抗腫瘤的可行性,實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí),FA-PAAs能有效的包裹DNA,與DNA形成復(fù)合物,復(fù)合物呈現(xiàn)結(jié)構(gòu)緊密的球形,復(fù)合物進(jìn)入MCF-7細(xì)胞內(nèi)后FA-PAAs發(fā)生斷鍵而釋放所攜帶的治療基因,從而有效抑制MCF-7腫瘤細(xì)胞的增殖。另外,采用溶血實(shí)驗(yàn)、APTT和PT實(shí)驗(yàn)評價FA-PAAs的體外血液相容性,結(jié)果表明FA-PAAs具有良好的血液相容性,在基因治療中作為基因載體具有一定的潛在價值,對以后的臨床應(yīng)用研究有一定的指導(dǎo)意義。2、基于聚乙二醇-聚乳酸改性超支化聚酰胺胺衍生物用于藥物和基因共載體的研究通過酰胺化反應(yīng)合成了聚乙二醇-聚乳酸-超支化聚酰胺胺嵌段共聚物mPEG-PLA-PAAs,mPEG-PLA的引入賦予材料負(fù)載化療藥物的功能,通過核磁共振、凝膠滲透色譜等方法對材料進(jìn)行化學(xué)結(jié)構(gòu)的表征,利用凝膠電泳、zeta電位、粒徑、低倍透射電鏡研究mPEG-PLA-PAAs對DNA的結(jié)合能力和與DNA之間的相互作用,利用高效液相色譜研究mPEG-PLA-PAAs對化療藥物多烯紫杉醇的負(fù)載能力,通過一系列的體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)探索mPEG-PLA-PAAs用作藥物載體和基因載體的可能性。
【關(guān)鍵詞】：超支化聚酰胺胺 氧化還原響應(yīng) 靶向作用 基因 藥物 血液相容性
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：O631.3
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-10
• 第一章 緒論10-23
• 1.1 引言10-11
• 1.2 基因治療11-14
• 1.2.1 基因治療的發(fā)展及現(xiàn)狀11
• 1.2.2 基因治療的遞送體系11-13
• 1.2.3 陽離子聚合物非病毒基因載體13-14
• 1.3 超支化聚合物14-17
• 1.3.1 超支化聚合物的結(jié)構(gòu)優(yōu)勢14-15
• 1.3.2 環(huán)境敏感型超支化聚合物15-17
• 1.3.3 腫瘤主動靶向型超支化聚合物17
• 1.4 化療藥物和基因藥物的聯(lián)合治療17-20
• 1.4.1 傳統(tǒng)的藥物治療存在的問題17-18
• 1.4.2 藥物和基因聯(lián)合治療的優(yōu)勢18
• 1.4.3 藥物和基因共載體18-20
• 1.5 本研究課題的提出20-22
• 1.6 本課題的創(chuàng)新之處22-23
• 第二章 葉酸靶向的氧化還原響應(yīng)性超支化聚酰胺胺用于基因載體的研究23-45
• 2.1 引言23-24
• 2.2 實(shí)驗(yàn)部分24-31
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器24-25
• 2.2.2 N,N雙丙烯酰胱胺（CBA）的合成與表征25-26
• 2.2.3 氧化還原響應(yīng)型超支化聚酰胺胺（PAAs）的合成與表征26
• 2.2.4 葉酸靶向的氧化還原響應(yīng)型超支化聚酰胺胺（PAAs-FA）的合成與表征26
• 2.2.5 FA-PAAs氧化還原響應(yīng)性的探究26-27
• 2.2.6 FA-PAAs/DNA復(fù)合物的制備27
• 2.2.7 FA-PAAs/DNA復(fù)合物的電位和粒徑的表征27
• 2.2.8 凝膠電泳實(shí)驗(yàn)27
• 2.2.9 FA-PAAs/DNA復(fù)合物表面形貌的表征27-28
• 2.2.10 體外毒性實(shí)驗(yàn)28
• 2.2.11 FA-PAAs的細(xì)胞內(nèi)吞28-29
• 2.2.12 體外細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)29
• 2.2.13 Western Blot29
• 2.2.14 細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)29-30
• 2.2.15 紅細(xì)胞體外溶血實(shí)驗(yàn)30
• 2.2.16 活化部分凝血活酶時間（APTT）和凝血酶原時間（PT）實(shí)驗(yàn)30-31
• 2.3 結(jié)果與討論31-44
• 2.3.1 FA-PAAs的合成與表征31-33
• 2.3.2 FA-PAAs氧化還原響應(yīng)性的探究33-34
• 2.3.3 FA-PAAs/DNA復(fù)合物的電位和粒徑的表征34-35
• 2.3.4 FA-PAAs/DNA復(fù)合物表面形貌的表征35-36
• 2.3.5 凝膠電泳實(shí)驗(yàn)36
• 2.3.6 FA-PAAs的細(xì)胞毒性36-37
• 2.3.7 FA-PAAs的細(xì)胞內(nèi)吞37-38
• 2.3.8 FA-PAAs的細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)38-40
• 2.3.9 Western Blot40-41
• 2.3.10 FA-PAAs的細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)41-42
• 2.3.11 體外溶血實(shí)驗(yàn)42-43
• 2.3.12 活化部分凝血活酶時間（APTT）和凝血酶原時間（PT）分析43-44
• 2.4 本章小結(jié)44-45
• 第三章 聚乙二醇-聚乳酸-超支化聚酰胺胺嵌段共聚物用于藥物和基因共載體的研究45-60
• 3.1 引言45-46
• 3.2 實(shí)驗(yàn)部分46-51
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器46-47
• 3.2.2 mPEG-PLA-PAAs的合成47-48
• 3.2.3 mPEG-PLA-PAAs/DNA復(fù)合物制備48
• 3.2.4 凝膠電泳實(shí)驗(yàn)48
• 3.2.5 mPEG-PLA-PAAs/DNA復(fù)合物的電位和粒徑的表征48
• 3.2.6 mPEG-PLA-PAAs/DNA復(fù)合物表面形貌的表征48-49
• 3.2.7 mPEG-PLA-PAAs負(fù)載多烯紫杉醇49
• 3.2.8 mPEG-PLA-PAAs體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)49-50
• 3.2.9 體外細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)50-51
• 3.3 結(jié)果與討論51-59
• 3.3.1 mPEG-PLA-PAAs的合成與表征51-53
• 3.3.2 mPEG-PLA-PAAs/DNA復(fù)合物的Zeta電位和粒徑53
• 3.3.3 FA-PAAs/DNA復(fù)合物表面形貌的表征53-54
• 3.3.4 凝膠電泳實(shí)驗(yàn)54
• 3.3.5 mPEG-PLA-PAAs的細(xì)胞毒性54-55
• 3.3.6 mPEG-PLA-PAAs負(fù)載多烯紫杉醇和細(xì)胞毒性研究55-56
• 3.3.7 mPEG-PLA-PAAs的體外細(xì)胞轉(zhuǎn)染分析56-59
• 3.4 本章小結(jié)59-60
• 第四章 全文總結(jié)60-62
• 4.1 本論文的主要研究內(nèi)容如下60-61
• 4.2 本文存在的問題及工作展望61-62
• 參考文獻(xiàn)62-68
• 縮略詞表68-69
• 攻讀學(xué)位期間主要科研成果69-70
• 致謝70-71

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孫靜;;超支化聚酰胺合成與研究進(jìn)展[J];上海化工;2011年06期

2 秦君;張愛清;李琳;劉漢范;翟豪;;超支化聚酰胺負(fù)載鉑納米簇雜化膜催化苯加氫反應(yīng)[J];功能高分子學(xué)報(bào);2011年03期

3 梁志彬;趙殊;王興寧;郭超;吳寧;王婧;;新型水溶性超支化聚酰胺-酯的合成[J];合成化學(xué);2012年01期

4 黃芽;孫麗嬌;殷花;陳曉婷;;含磷超支化聚酰胺的合成與表征[J];天津科技大學(xué)學(xué)報(bào);2013年01期

5 胡明;徐德增;郭靜;;超支化聚酰胺對聚丙烯及其纖維的性能影響[J];合成纖維工業(yè);2007年04期

6 張新荔;張可青;;超支化聚酰胺酯應(yīng)用研究進(jìn)展[J];中國膠粘劑;2009年07期

7 霍紅亞;張瑜;陳彥模;閻惠至;;超支化聚酰胺酯/聚丙烯共混體系性質(zhì)研究[J];合成纖維;2009年09期

8 陳榮國;房小明;肖荔人;陳慶華;;超支化聚酰胺酯的研究進(jìn)展[J];材料工程;2009年11期

9 林希;吳江渝;;超支化聚酰胺胺的合成及季胺化修飾[J];武漢工程大學(xué)學(xué)報(bào);2010年11期

10 壽崇琦;林棟;楊文;徐磊;劉冰;蔣大慶;;超支化聚酰胺酯的合成及在聚氨酯中的應(yīng)用[J];高分子材料科學(xué)與工程;2012年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 陳育明;錢慶榮;蔣霞;劉欣萍;肖荔人;許兢;黃寶銓;陳慶華;;超支化聚酰胺酯/聚乙烯醇納米纖維的制備[A];中國化學(xué)會第27屆學(xué)術(shù)年會第01分會場摘要集[C];2010年

2 房小明;陳榮國;肖荔人;陳慶華;;超支化聚酰胺酯釤(Ⅲ)配合物的合成與表征[A];中國化學(xué)會第27屆學(xué)術(shù)年會第08分會場摘要集[C];2010年

3 黃衛(wèi);張永文;顏德岳;;交聯(lián)型超支化聚酰胺胺電解質(zhì)膜的合成與表征[A];2009年全國高分子學(xué)術(shù)論文報(bào)告會論文摘要集（上冊）[C];2009年

4 曹亮;楊武利;汪長春;府壽寬;;超支化聚酰胺胺的制備、熒光性質(zhì)及其內(nèi)部氫鍵效應(yīng)[A];2005年全國高分子學(xué)術(shù)論文報(bào)告會論文摘要集[C];2005年

5 高超;吳佳燕;劉翠華;顏德岳;;兩親性超支化聚酰胺胺的合成、封裝及自組裝[A];2007年全國高分子學(xué)術(shù)論文報(bào)告會論文摘要集（上冊）[C];2007年

6 楊武利;曹亮;謝yN榮;汪長春;府壽寬;;超支化聚酰胺胺及其共聚物的合成與性質(zhì)[A];上海市化學(xué)化工學(xué)會2005年度學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2005年

7 周紅軍;謝山;尹國強(qiáng);林軒;郭清兵;;聚丙烯/超支化聚酰胺接枝納米Y_2O_3復(fù)合材料的力學(xué)性能[A];2012年全國高分子材料科學(xué)與工程研討會學(xué)術(shù)論文集（下冊）[C];2012年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 陳慶華;超支化聚酰胺酯金屬鹽（氧化物）反應(yīng)型助劑及其在橡膠中的應(yīng)用研究[D];福建師范大學(xué);2009年

2 張永文;超支化聚酰胺胺的合成及其功能化研究[D];上海交通大學(xué);2008年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李夢藝;氧化還原響應(yīng)性超支化聚酰胺胺衍生物在腫瘤治療中的應(yīng)用[D];暨南大學(xué);2016年

2 郭宏;超支化聚酰胺的合成與表征[D];遼寧師范大學(xué);2004年

3 秦君;超支化聚酰胺負(fù)載納米貴金屬雜化膜的制備及其催化苯加氫反應(yīng)[D];中南民族大學(xué);2012年

4 王曉宇;超支化聚酰胺的合成與表征[D];遼寧師范大學(xué);2005年

5 郭哲;端基改性制備超支化聚酰胺胺功能材料[D];上海交通大學(xué);2009年

6 張青海;超支化聚酰胺酯金屬氧化物反應(yīng)型助劑在丁苯橡膠中的應(yīng)用研究[D];福建師范大學(xué);2009年

7 謝嵩;含磷超支化聚酰胺改性尼龍6的研究[D];天津科技大學(xué);2012年

8 霍紅亞;超支化聚酰胺酯/PP共混體系結(jié)構(gòu)、性能的研究[D];東華大學(xué);2010年

9 黃芽;含磷超支化聚酰胺的合成及尼龍6共混體系性能研究[D];天津科技大學(xué);2013年

10 楊浩;超支化聚酰胺酯及其在粒子填充丁苯橡膠中動態(tài)流變行為的研究[D];福建師范大學(xué);2009年

，

本文編號：694805