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陣列紙芯片比色法檢測堿性磷酸酶

發(fā)布時間:2017-08-17 11:34

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【摘要】:采用5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸鹽(BCIP)/氯化硝基四氮唑藍(lán)(NBT)顯色體系,構(gòu)建了陣列紙芯片比色檢測堿性磷酸酶(ALP)的方法。首先,借助烘干處理方式在光刻法制備的陣列紙芯片微孔中固定顯色試劑,然后加入ALP進(jìn)行顯色反應(yīng),最后,采用凝膠成像儀和普通照相機(jī)成像,讀取顯色強(qiáng)度(灰度值)進(jìn)行比色檢測。詳細(xì)考察了顯色條件對檢測結(jié)果的影響,探討了人血清白蛋白對ALP檢測的增色效應(yīng),在最佳實(shí)驗(yàn)條件下,ALP檢測的線性范圍為1.5~20 U/L,檢出限(3#)為0.78 U/L(n=18),比文獻(xiàn)報(bào)道中紙芯片上檢測ALP方法的檢出限低約兩個數(shù)量級。本方法成功用于實(shí)際血清樣品檢測,測定結(jié)果與臨床值一致。在此基礎(chǔ)上,構(gòu)建了雙色陣列紙芯片,通過顏色的變化實(shí)現(xiàn)了ALP的可視化半定量檢測。
【作者單位】: 生物醫(yī)學(xué)分析化學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室武漢大學(xué)化學(xué)與分子科學(xué)學(xué)院;武漢大學(xué)中南醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【關(guān)鍵詞】陣列紙芯片 比色法 堿性磷酸酶
【基金】:國家自然科學(xué)基金(No.21205089) 教育部高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金(No.20120141120036)資助項(xiàng)目~~
【分類號】:TN492;O657.3
【正文快照】: 1引言堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)是一種水解酶,可催化水解底物分子中的磷酸單酯,廣泛存在于細(xì)菌、真菌及動物中[1]。血清中ALP水平是診斷肝癌、肝硬化、慢性肝炎等肝類疾病的指標(biāo),也是原發(fā)性肝癌的腫瘤標(biāo)志物之一[2,3]。ALP也是酶聯(lián)免疫吸附分析中常用的一種標(biāo)記酶

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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2 張娜;邊瑋瑋;李耀輝;;熒光光度法測定血清中堿性磷酸酶[J];分析化學(xué);2009年05期

3 郭勇;麥迪霉素對枯草桿菌堿性磷酸酶的作用[J];抗生素;1982年05期

4 顏思旭,陳清西;文昌魚堿性磷酸酶的分子量及氨基酸組成的初步研究[J];廈門大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1985年03期

5 史國利,馬建標(biāo),何炳林;微球載體固定化堿性磷酸酶的底物/產(chǎn)物吸附現(xiàn)象[J];高等學(xué);瘜W(xué)學(xué)報(bào);1996年02期

6 惠永華;韓立強(qiáng);楊國宇;王路;;熒光檢測堿性磷酸酶活力方法的建立[J];化學(xué)與生物工程;2008年03期

7 彭憲寶;用乙二胺四乙酸抑制法測定胎盤堿性磷酸酶[J];國外醫(yī)學(xué).臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊;1986年04期

8 ;市場動態(tài)[J];化學(xué)世界;1981年06期

9 高舉;趙欣平;詹付鳳;程凱;;鉛對鯽魚堿性磷酸酶和酸性磷酸酶活性的影響[J];四川動物;2008年02期

10 陳文勇;一種改良的堿性磷酸酶的化學(xué)發(fā)光檢測[J];國外醫(yī)學(xué).預(yù)防.診斷.治療用生物制品分冊;1991年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 _5克煇;杝秀芳;;家兔大乫皮\d表\dd P豐醆 深\d酸性及堿性磷酸酶的影,

本文編號:688817


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