本文關(guān)鍵詞：高效液相色譜及質(zhì)譜技術(shù)在植物激素和有機酸分析中的研究與應(yīng)用

  更多相關(guān)文章： 植物激素 高效液相 質(zhì)譜 衍生化 檢測 有機酸

【摘要】：植物激素作為一類小分子化合物,在植物的生長發(fā)育調(diào)控中發(fā)揮著非常重要的作用,根據(jù)它們結(jié)構(gòu)和生理功能的不同主要分為以下五類:生長素(IAA)、細胞分裂素(CKS)、脫落酸(ABA)、赤霉素(GAs)和乙烯(ET)。它們在植物的整個生命周期中起著關(guān)鍵的作用,包括細胞的分裂、擴大和分化,器官的發(fā)育,種子的休眠和萌發(fā),葉子的衰老和脫落等。植物激素在植物組織中的含量往往為超痕量水平,通常在pg/g-ng/g鮮重(FW)范圍內(nèi),而且周圍共存的基體成分非常復(fù)雜,幾乎不可能同時分析所有植物激素。因此,如何精確可靠地對超微量的植物激素進行定性和定量分析,已成為目前植物激素作用機理研究中的重要問題之一。色譜技術(shù)憑借其簡單快速而且高效的特征得到了廣泛的應(yīng)用,色譜與質(zhì)譜結(jié)合,特別是液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用的方法不僅提供了高效的分離手段和基于碎片模式的結(jié)構(gòu)信息,同時也顯著提高了檢測靈敏度。本論文基于以上理論,建立了高效液相及高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測植物激素的方法,以及一種基于化學衍生化技術(shù)的LC-MS分析有機酸的方法。對水果蔬菜中的部分植物激素和有機酸進行了分析檢測,取得了較滿意的結(jié)果。具體研究內(nèi)容如下:1.3-吲哚乙酸,3-吲哚丁酸,1-萘乙酸,脫落酸等四種植物激素的HPLC分析條件的研究及應(yīng)用建立了一種高效液相色譜法(HPLC)用于分離和測定吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)、脫落酸(ABA)、萘乙酸(NAA)等4種植物激素,采用Eclipse XDB-C8(4.6 mm×250 mm,5μm)反相色譜柱,V(甲醇):V(甲酸-甲酸銨水溶液)=70:30,流速為1.0 m L/min,進樣量為5μL;柱溫25℃,檢測器波長設(shè)置為280 nm,結(jié)果表明,四種激素的分離效果理想,在線性范圍內(nèi)的相關(guān)系數(shù)(R)為0.9979-0.9983,檢出限為0.03-0.1μg/mL,加標回收率達到95.8%-104.6%,相對標準偏差均不高于0.53%,用該方法檢測到豆芽中的3-吲哚乙酸為16.8 mg/kg,鴨梨中的脫落酸為5.0 mg/kg。2.HPLC-MS聯(lián)用技術(shù)對兩種赤霉素類植物激素分析方法的研究本方法使用Hilic C18(2.1 mm×50 mm,2.6μm)色譜柱,以甲醇:水(0.01 mol/L醋酸銨)=80:20,流速0.2 m L/min條件下分離,采用電噴霧-負離子多反應(yīng)監(jiān)測模式,外標法定量。選擇確定GA3、GA12母離子依次為m/z 345.3、331.4,定量子離子依次為m/z 143、220.9,201、269.2,結(jié)果表明:該方法在0.05~10.0μg/mL線性范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系(R20.99),檢測限為0.01μg/m L,在0.2、1.5、8μg/mL 3個添加水平下,平均回收率在81.7%~103.2%之間,相對標準偏差(RSD)在0.26%~1.9%之間。3.基于化學衍生化技術(shù)的LC-MS方法在有機酸分析中的研究與應(yīng)用本方法首先對2種有機酸進行化學衍生,取有機酸,Na2CO3,2-溴苯乙酮(摩爾比1:1:1)各500μL加入到50 mL的燒瓶中,混合均勻,于55℃油浴下反應(yīng)24 h,反應(yīng)冷卻后取樣進LC-MS分析。使用Agilent C18(2.1 mm×150 mm,5μm)反相色譜柱,流動相V(甲醇):V(0.1%乙酸水溶液)=60:40;流速為0.2 mL/min,進樣量為5μL,采用電噴霧-正離子監(jiān)測模式,結(jié)果表明:兩種有機酸經(jīng)衍生化后在各自線性范圍內(nèi)的相關(guān)系數(shù)(R)為0.9754-0.9966,檢出限各為6.67μg/mL和2.33μg/m L,回收率在81.9%-91.0%之間,用本衍生方法測得蘋果汁的蘋果酸為15.3μg/mL,檸檬汁中的檸檬酸為19.4μg/mL。
【關(guān)鍵詞】：植物激素 高效液相 質(zhì)譜 衍生化 檢測 有機酸
【學位授予單位】：河南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：Q946;O657.63
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-12
• 第一章 緒論12-34
• 1.1 植物激素概述12-14
• 1.2 植物激素的種類14-16
• 1.2.1 生長素類14
• 1.2.2 細胞分裂素類14-15
• 1.2.3 赤霉素類15
• 1.2.4 脫落酸類15
• 1.2.5 乙烯類15-16
• 1.3 植物激素的樣品預(yù)處理方法16-21
• 1.3.1 樣品的提取17
• 1.3.2 樣品的純化17-21
• 1.4 植物激素檢測分析方法研究21-25
• 1.4.1 常用分析方法21-22
• 1.4.2 氣相色譜法22
• 1.4.3 液相色譜法22-23
• 1.4.4 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)23-24
• 1.4.5 高效液相-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)24-25
• 1.4.6 植物激素檢測方法的發(fā)展趨勢25
• 1.5 課題的提出及意義25-26
• 參考文獻26-34
• 第二章 3-吲哚乙酸，3-吲哚丁酸，1-萘乙酸，脫落酸等四種植物激素的HPLC分析條件的研究及應(yīng)用34-52
• 2.1 引言34-36
• 2.2 實驗部分36-37
• 2.2.1 儀器36
• 2.2.2 材料與試劑36
• 2.2.3 標準溶液的配制36
• 2.2.4 色譜條件36-37
• 2.2.5 樣品前處理37
• 2.3 結(jié)果與討論37-49
• 2.3.1 色譜條件的優(yōu)化37-42
• 2.3.2 定量分析42-46
• 2.3.3 實際樣品的測定46-49
• 2.4 結(jié)論49-50
• 參考文獻50-52
• 第三章 HPLC-MS聯(lián)用技術(shù)對兩種赤霉素類植物激素分析方法的研究52-66
• 3.1 引言52-54
• 3.2 實驗部分54-56
• 3.2.1 儀器54
• 3.2.2 材料與試劑54
• 3.2.3 標準溶液的配制54
• 3.2.4 LC-MS分析條件54-56
• 3.2.5 樣品前處理56
• 3.3 結(jié)果與討論56-62
• 3.3.1 相關(guān)譜圖56-59
• 3.3.2 兩種赤霉素的線性關(guān)系及檢出限59-61
• 3.3.3 回收率61-62
• 3.3.4 實際樣品的檢測62
• 3.4 結(jié)論62-63
• 參考文獻63-66
• 第四章 基于化學衍生化技術(shù)的LC-MS方法在有機酸分析中的研究與應(yīng)用66-82
• 4.1 引言66-67
• 4.2 實驗部分67-69
• 4.2.1 儀器67-68
• 4.2.2 材料與試劑68
• 4.2.3 標準樣品溶液的配制68
• 4.2.4 衍生化反應(yīng)68-69
• 4.2.5 色譜質(zhì)譜條件69
• 4.3 結(jié)果與討論69-78
• 4.3.1 檸檬酸相關(guān)譜圖69-72
• 4.3.2 蘋果酸相關(guān)譜圖72-74
• 4.3.3 定量分析74-76
• 4.3.4 實際樣品的測定76-78
• 4.4 結(jié)論78-79
• 參考文獻79-82
• 碩士期間發(fā)表的學術(shù)論文及會議論文82-84
• 致謝84-85

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