發(fā)布時間：2017-07-29 03:17

  本文關(guān)鍵詞：熒光法快速檢測氨基酸的含量及應(yīng)用

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【摘要】：氨基酸是一類同時含有氨基和羧基的有機化合物的統(tǒng)稱。他是組成生物大分子：蛋白質(zhì)的基本單元,是生物體的一種重要的營養(yǎng)物質(zhì)。作為一種生物體的必須的營養(yǎng)物質(zhì),氨基酸不僅用來合成蛋白質(zhì),它還是動物飼料和食品的一種重要的營養(yǎng)成分,在臨床醫(yī)學上還可以用來預(yù)防和治療各種疾病,在一些化工產(chǎn)品中氨基酸也是一種重要的有效成分。但是氨基酸也不是補充的越多越好,因為氨基酸和蛋白質(zhì)無法在人體內(nèi)長時間儲存,所以過量的氨基酸會增加肝腎的負擔,長時間的氨基酸過剩會引發(fā)糖尿病。因此建立一種有效的氨基酸的測定方法就顯得十分的重要。目前比較成熟的氨基酸測定方法有化學法：凱氏定氮法和甲醛滴定法,光化學方法：分光光度法,色譜法：薄層色譜法、紙上色譜法、液相色譜法、氣象色譜法及毛細管電泳色譜法,還有電化學分析法和氨基酸自動分析儀法。但是這些方法普遍存在測定過程繁瑣,測定花費比較高和測定靈敏度低等問題。相對來說,熒光光譜法具有測定時間短、操作簡單、靈敏度高、檢出限低和線性范圍寬等優(yōu)點,所以建立一種熒光光譜法來實現(xiàn)對氨基酸的定量測定是一件十分有意義的事情。本文主要分為以下三個主要的內(nèi)容：1：簡述氨基酸的不同分類和在日常生活中用途,概括總結(jié)原始的氨基酸的測定方法原理和優(yōu)缺點,介紹熒光光譜法測定氨基酸的基本原理。2：建立了幾種熒光光譜法對實現(xiàn)對氨基酸的定量檢測：(1)在B-R緩沖溶液中(pH=9.6)的環(huán)境中,鈣黃綠素和Ni~(2+)發(fā)生絡(luò)合反應(yīng),鈣黃綠素發(fā)生熒光猝滅的現(xiàn)象,當再向該體系中加入一定量的甘氨酸后,體系的熒光強度隨著加入的甘氨酸的量的增加而增加,且熒光強度的增加量和加入的甘氨酸的量在一定范圍內(nèi)成正比。基于這種發(fā)現(xiàn),我們建立了一種新的熒光檢測方法來檢測甘氨酸的含量。(2)在pH為2.8的Clark-Lubs和CTMAB的環(huán)境中,熒光探針水揚基熒光酮可以和Cu~(2+)發(fā)生絡(luò)合反應(yīng),致使熒光探針發(fā)生熒光猝滅,但是在加入一定量的甲硫氨酸后體系的熒光強度又開始增大,而且熒光強度的增加量和甲硫氨酸的加入量在一定范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,由此我們建立了一個用熒光法來測定甲硫氨酸方法。(3)在pH=10.8的Kolthoff的緩沖溶液中和CTMAB存在的條件下,熒光探針鈣黃綠素可以和Cu~(2+)發(fā)生反應(yīng)使鈣黃綠素發(fā)生熒光猝滅,但是在加入一定量濃度的脯氨酸以后,在相同的條件下測定體系的熒光值,可以發(fā)現(xiàn)在加入一定量的脯氨酸后體系的熒光強度明顯的增大,并且在一定的范圍內(nèi)熒光強度的增大量和加入的脯氨酸的量呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,在此基礎(chǔ)上我們建立了一種熒光光譜法來測定脯氨酸的含量。3：運用等摩爾連續(xù)變換分光光度法,探究了熒光探針和金屬離子之間的作用機理并測定了生成物的絡(luò)合比和絡(luò)合物的穩(wěn)定常數(shù)。
【關(guān)鍵詞】：熒光光譜法 氨基酸 絡(luò)合比 反應(yīng)機理 穩(wěn)定常數(shù)
【學位授予單位】：河南師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：O657.3
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-11
• 第一章 緒論11-21
• 1.1 氨基酸的類型和分析意義11-12
• 1.1.1 氨基酸的類型11-12
• 1.1.2 氨基酸的功效和分析意義12
• 1.2 氨基酸的檢測分析技術(shù)12-18
• 1.2.1 氨基酸的凈化分離技術(shù)13-16
• 1.2.2 現(xiàn)階段氨基酸測定技術(shù)16-18
• 1.3 熒光光譜法18-19
• 1.4 論文的設(shè)想和主要研究內(nèi)容19-21
• 第二章 復(fù)合熒光探針Ni~(2+)—鈣黃綠素和甘氨酸相互作用的研究21-35
• 2.1 引言21-22
• 2.2 試驗22-23
• 2.2.1 試劑和儀器22
• 2.2.2 試驗方法22
• 2.2.3 樣品的制備22-23
• 2.3 方法和討論23-32
• 2.3.1 熒光圖譜23
• 2.3.2 反應(yīng)體系選擇及反應(yīng)條件優(yōu)化23-28
• 2.3.3 工作曲線及精密度的測定28-29
• 2.3.4 共存物質(zhì)的影響29-30
• 2.3.5 Ni~(2+)和鈣黃綠素的絡(luò)合比及其熒光猝滅機理的探討30-31
• 2.3.6 甘氨酸和Ni~(2+)的絡(luò)合比的測定31
• 2.3.7 機理研究31-32
• 2.4 應(yīng)用32-33
• 2.4.1 樣品的測定32-33
• 2.4.2 加標回收率的測定33
• 2.5 結(jié)論33-35
• 第三章 運用復(fù)合熒光探針Cu~(2+)—水揚基熒光酮檢測甲硫氨酸含量及其機理研究35-49
• 3.1 前言35-36
• 3.2 實驗36-37
• 3.2.1 儀器與試劑36
• 3.2.2 實驗方法36-37
• 3.2.3 樣品的制備37
• 3.3 實驗結(jié)果37-47
• 3.3.1 紫外圖譜37-38
• 3.3.2 熒光圖譜38-39
• 3.3.3 實驗條件的選擇和優(yōu)化39-43
• 3.3.4 標準工作曲線43
• 3.3.5 共存物質(zhì)的影響43-44
• 3.3.6 Cu~(2+)和水揚基熒光酮的絡(luò)合比以及絡(luò)合物Cu~(2+)-水揚基熒光酮的穩(wěn)定常數(shù)44-45
• 3.3.7 Cu~(2+)和甲硫氨酸的絡(luò)合比以及絡(luò)合物Cu~(2+)-甲硫氨酸的穩(wěn)定常數(shù)45-46
• 3.3.8 反應(yīng)機理研究46-47
• 3.4 應(yīng)用47-48
• 3.4.1 樣品測定47
• 3.4.2 加標回收率測定47-48
• 3.5 結(jié)論48-49
• 第四章 熒光法快速測定脯氨酸的含量49-61
• 4.1 前言49-50
• 4.2 試驗50-51
• 4.2.1 儀器與試劑50
• 4.2.2 試驗方法50
• 4.2.3 樣品溶液的制備50-51
• 4.3 試驗結(jié)果51-59
• 4.3.1 熒光圖譜51
• 4.3.2 反應(yīng)體系選擇和反應(yīng)條件優(yōu)化51-56
• 4.3.3 標準工作曲線56-57
• 4.3.4 共存物質(zhì)對測定結(jié)果的影響57-58
• 4.3.5 鈣黃綠素和Cu~(2+)之間的絡(luò)合比58
• 4.3.6 反應(yīng)機理58-59
• 4.4 應(yīng)用59-60
• 4.4.1 樣品的測定59-60
• 4.4.2 加標回收率的測定60
• 4.5 結(jié)論60-61
• 第五章 總結(jié)與展望61-65
• 參考文獻65-75
• 攻讀學位期間發(fā)表論文情況75-77
• 致謝77-78

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2 袁旭;趙永煥;;對幾種食物混合后蛋白質(zhì)的氨基酸分的質(zhì)疑[J];黑龍江八一農(nóng)墾大學學報;2005年06期

3 劉宇紅;;氨基酸分離提純的研究進展[J];內(nèi)蒙古石油化工;2006年05期

4 曲建翹,姚雅琳;環(huán)境除臭:永久的課題[J];健康大視野;1998年02期

5 徐積恩;;氨基酸工業(yè)生產(chǎn)現(xiàn)況[J];江蘇食品與發(fā)酵;1984年03期

6 唐桂芬,蘭尊海,彭愛娟;用非氨基酸專用柱分離17種氨基酸的研究[J];鄭州牧業(yè)工程高等�？茖W校學報;2000年04期

7 劉艷梅,周美華;氨基酸的分離與提純[J];浙江化工;2004年07期

8 劉秀萍;毛細管氣相色譜分析氨基酸[J];晉中師專學報;1989年02期

9 李永春,榮曉花;L-氨基酸生產(chǎn)的新技術(shù)——酶法拆分[J];山東食品科技;2004年06期

10 曹寧軍,倫世儀;制備性配位交換樹脂的合成[J];無錫輕工業(yè)學院學報;1992年01期

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1 張建偉;;氨基酸偽肽化合物的研究[A];中國化學會第26屆學術(shù)年會化學生物分會場論文集[C];2008年

2 甄玉國;馬寧;盧德勛;;反芻動物氨基酸營養(yǎng)研究進展[A];2000’動物營養(yǎng)研究進展——全國畜禽飼養(yǎng)標準學術(shù)討論會暨營養(yǎng)研究會成立大會論文集[C];2000年

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1 本報記者 李穎;高考生需不需要注射氨基酸？[N];科技日報;2012年

2 本報記者 蔡玉冰;氨基酸也存在木桶效應(yīng)[N];廣東科技報;2012年

3 石軍;全球氨基酸市場年均增長6.8%[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2008年

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2 李娜;貝類中氨基酸、脂肪酸和重金屬的含量分析及其產(chǎn)品質(zhì)量評價[D];河北農(nóng)業(yè)大學;2011年

3 李牧;新型D-aminoacylase生產(chǎn)菌的分離及分類學鑒定[D];長春理工大學;2008年

4 尤曉蒙;飼料中氨基酸的HPLC檢測方法研究[D];河北農(nóng)業(yè)大學;2015年

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本文編號：587262