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基于目標循環(huán)放大及背景抑制策略構建靈敏的DNA熒光生物傳感器的研究

發(fā)布時間:2024-06-28 19:20
  生物傳感器是由分析化學、生物化學、生物醫(yī)學和生物技術等領域相互滲透而形成的一個新興的研究課題。生物傳感器憑借其設備簡單、易于攜帶、測試成本低廉、檢測快速方便、結果靈敏可靠以及易于實現(xiàn)原位活體檢測等優(yōu)勢,躋身當前的研究熱點之一。DNA熒光傳感器便是其中一種。DNA熒光生物傳感器通過DNA生物傳感器將目標物的信號轉換成熒光信號進行輸出和檢測,進而對目標物進行定性及定量分析。這種分析方法將生物傳感器的特異性、易于實現(xiàn)多種放大策略的優(yōu)點和熒光傳感器的高靈敏度、高選擇性和較高的儀器普及率等特點結合起來,大大提高了分析測試的靈敏度、準確度和可操作性。這些特點使得DNA熒光生物傳感器吸引了大量研究者的目光,因而該技術也得到了不斷的發(fā)展。然而隨著基因測序、疾病診斷、食品藥品監(jiān)控、環(huán)境保護等領域對于分析檢測技術的要求不斷提高,DNA熒光傳感器的研究也迫切需要更加深入,以期發(fā)展出更加靈敏快速、準確可靠、簡易、實惠的測定方法,服務科研和社會。本文以DNA熒光傳感技術為基礎結合多種酶利用目標循環(huán)放大策略來提高方法的靈敏度,同時采用核酸外切酶Ⅲ和氧化石墨烯(GO)以實現(xiàn)對熒光背景信號的降低,構建了三種生物傳感器...

【文章頁數】:75 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第1章 緒論
    1.1 DNA生物傳感器
        1.1.1 DNA
        1.1.2 生物傳感器
        1.1.3 DNA熒光型生物傳感器的優(yōu)點及應用
    1.2 賽博綠 Ⅰ 熒光染料
        1.2.1 賽博綠 Ⅰ 熒光染料簡介
        1.2.2 賽博綠 Ⅰ 熒光染料在DNA熒光傳感器中的應用
    1.3 提高DNA傳感器靈敏度的方法
        1.3.1 DNA傳感器的信號放大策略
        1.3.2 DNA傳感器的背景抑制策略
    1.4 本文的研究思路
第2章 基于toehold鏈置換反應驅動的目標循環(huán)放大以及外切酶 Ⅲ 輔助背景信號降低原理構建熒光傳感器用于突變DNA序列的檢測
    2.1 前言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 試劑及材料
        2.2.2 儀器裝置
        2.2.3 DNA傳感過程
        2.2.4 熒光測定過程
        2.2.5 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳
        2.2.6 在血清樣品中進行回收率試驗
    2.3 結果與討論
        2.3.1 機理及其驗證
        2.3.2 實驗條件的優(yōu)化
        2.3.3 靈敏度的研究
        2.3.4 檢測目標DNA的選擇性和重復性探究
        2.3.5 實際應用前景的探究
    2.4 結論
第3章 基于toehold鏈置換反應驅動的目標循環(huán)放大以及外切酶 Ⅲ 輔助背景信號降低原理構建熒光傳感器用于凝血酶的檢測
    3.1 前言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 試劑及材料
        3.2.2 儀器裝置
        3.2.3 DNA傳感過程
        3.2.4 熒光測定過程
        3.2.5 在血清樣品中進行回收率試驗
    3.3 結果與討論
        3.3.1 機理及其驗證
        3.3.2 實驗條件的優(yōu)化
        3.3.3 靈敏度的研究
        3.3.4 檢測凝血酶的選擇性探究
        3.3.5 實際應用前景的探究
    3.4 結論
第4章 基于脫氧核酶和Klenow Fragment, Exo- 聚合酶的雙重信號循環(huán)放大和氧化石墨烯輔助的背景信號降低策略檢測L-組氨酸
    4.1 前言
    4.2 實驗部分
        4.2.1 試劑及材料
        4.2.2 儀器裝置
        4.2.3 DNA傳感過程
        4.2.4 熒光測定過程
        4.2.5 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳
        4.2.6 在血清樣品中進行回收率試驗
    4.3 結果與討論
        4.3.1 機理及其驗證
        4.3.2 實驗條件的優(yōu)化
        4.3.3 靈敏度的研究
        4.3.4 檢測L-組氨酸的選擇性探究
        4.3.5 實際應用前景的探究
    4.4 結論
參考文獻
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致謝



本文編號:3996557

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