發(fā)布時(shí)間：2024-05-10 22:43

　　疾病的治愈率隨醫(yī)學(xué)科技的發(fā)展逐漸提升,但總的死亡人數(shù)仍在上漲。有專(zhuān)家表明,慢性疾病的發(fā)病率在未來(lái)十年內(nèi)都會(huì)有顯著地增長(zhǎng)。由于早期疾病診斷與多數(shù)患者的性命密切相關(guān),因此越來(lái)越多的科學(xué)家們對(duì)這方面予以足夠的重視。甚至提出了許多適用于該領(lǐng)域的檢測(cè)方法,為前線(xiàn)醫(yī)護(hù)人員在確定和排除疑似患者方面,提供了強(qiáng)有力的輔助。其中,核酸檢測(cè)作為一種精準(zhǔn)有效的檢測(cè)手段,在食品安全、環(huán)境監(jiān)測(cè)、疾病診斷等領(lǐng)域中得到了廣泛的應(yīng)用。眾多研究表明,基于分子水平的核酸檢測(cè)在分析應(yīng)用中有著快速、簡(jiǎn)單、靈敏等優(yōu)勢(shì),應(yīng)用前景極為廣闊。其中,熒光DNA生物傳感器作為一種非常有效的核酸檢測(cè)手段,廣泛適用于多種疾病標(biāo)志物的分析研究中。并且該傳感平臺(tái)在分析檢測(cè)中的優(yōu)勢(shì)顯著,如省時(shí)、便捷、靈敏、成本低等。然而,由于待測(cè)樣品中的目標(biāo)物濃度在實(shí)際分析研究檢測(cè)中常常處于較低水平,因此通常需要借助一些信號(hào)放大策略的輔助來(lái)完成這樣低濃度下的樣品檢測(cè)。本文以三磷酸腺苷(ATP)、凝血酶以及microRNA-1246為疾病標(biāo)志物模型,在酶或DNAzyme的輔助下,巧妙地結(jié)合環(huán)介導(dǎo)的等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)、滾環(huán)擴(kuò)增(RCA)和toehold鏈置換(TSD...

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 熒光DNA生物傳感器
        1.1.1 研究背景
        1.1.2 信號(hào)導(dǎo)入
        1.1.3 應(yīng)用分類(lèi)
    1.2 熒光傳感器的信號(hào)放大
        1.2.1 酶輔助放大技術(shù)
        1.2.2 納米材料輔助放大技術(shù)
        1.2.3 DNAzyme輔助信號(hào)放大技術(shù)
        1.2.4 DNA自組裝放大技術(shù)
        1.2.5 Toehold介導(dǎo)的信號(hào)放大技術(shù)
    1.3 本文研究思路
第二章 聚合切口酶觸發(fā)的LAMP循環(huán)放大策略用于人血清中的微量蛋白質(zhì)檢測(cè)
    2.1 前言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 材料和試劑
        2.2.2 凝血酶的放大檢測(cè)過(guò)程
        2.2.3 聚丙烯酰胺凝膠電泳實(shí)驗(yàn)(PAGE)
        2.2.4 熒光測(cè)量
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 實(shí)驗(yàn)原理
        2.3.2 可行性研究
        2.3.3 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
        2.3.4 線(xiàn)性與選擇性研究
    2.4 結(jié)論
第三章 高效的指數(shù)滾環(huán)擴(kuò)增分子網(wǎng)用于超靈敏且無(wú)標(biāo)記檢測(cè)Micro RNA
    3.1 前言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 化學(xué)藥品和試劑
        3.2.2 環(huán)形探針(CP)的制備
        3.2.3 基于PNR和 RCA的整合擴(kuò)增檢測(cè)mi RNA-1246
        3.2.4 非變性PAGE試驗(yàn)
        3.2.5 人血清中miRNA的測(cè)定
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 實(shí)驗(yàn)原理
        3.3.2 可行性研究
        3.3.3 優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件
        3.3.4 線(xiàn)性和選擇性分析
    3.4 結(jié)論
第四章 目標(biāo)物催化組裝形成的金屬離子DNAzyme用于放大檢測(cè)ATP
    4.1 前言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 化學(xué)品和試劑
        4.2.2 ATP熒光擴(kuò)增檢測(cè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程
        4.2.3 非變性PAGE試驗(yàn)
        4.2.4 熒光強(qiáng)度測(cè)量
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 提出的ATP熒光傳感策略的原理
        4.3.2 ATP檢測(cè)策略的可行性研究
        4.3.3 優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件
        4.3.4 檢測(cè)策略的性能分析
    4.4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
研究生期間發(fā)表的論文
致謝



本文編號(hào)：3969124