疾病的治愈率隨醫(yī)學科技的發(fā)展逐漸提升,但總的死亡人數(shù)仍在上漲。有專家表明,慢性疾病的發(fā)病率在未來十年內(nèi)都會有顯著地增長。由于早期疾病診斷與多數(shù)患者的性命密切相關(guān),因此越來越多的科學家們對這方面予以足夠的重視。甚至提出了許多適用于該領(lǐng)域的檢測方法,為前線醫(yī)護人員在確定和排除疑似患者方面,提供了強有力的輔助。其中,核酸檢測作為一種精準有效的檢測手段,在食品安全、環(huán)境監(jiān)測、疾病診斷等領(lǐng)域中得到了廣泛的應用。眾多研究表明,基于分子水平的核酸檢測在分析應用中有著快速、簡單、靈敏等優(yōu)勢,應用前景極為廣闊。其中,熒光DNA生物傳感器作為一種非常有效的核酸檢測手段,廣泛適用于多種疾病標志物的分析研究中。并且該傳感平臺在分析檢測中的優(yōu)勢顯著,如省時、便捷、靈敏、成本低等。然而,由于待測樣品中的目標物濃度在實際分析研究檢測中常常處于較低水平,因此通常需要借助一些信號放大策略的輔助來完成這樣低濃度下的樣品檢測。本文以三磷酸腺苷(ATP)、凝血酶以及microRNA-1246為疾病標志物模型,在酶或DNAzyme的輔助下,巧妙地結(jié)合環(huán)介導的等溫擴增(LAMP)、滾環(huán)擴增(RCA)和toehold鏈置換(TSD...

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 熒光DNA生物傳感器
        1.1.1 研究背景
        1.1.2 信號導入
        1.1.3 應用分類
    1.2 熒光傳感器的信號放大
        1.2.1 酶輔助放大技術(shù)
        1.2.2 納米材料輔助放大技術(shù)
        1.2.3 DNAzyme輔助信號放大技術(shù)
        1.2.4 DNA自組裝放大技術(shù)
        1.2.5 Toehold介導的信號放大技術(shù)
    1.3 本文研究思路
第二章 聚合切口酶觸發(fā)的LAMP循環(huán)放大策略用于人血清中的微量蛋白質(zhì)檢測
    2.1 前言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 材料和試劑
        2.2.2 凝血酶的放大檢測過程
        2.2.3 聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗(PAGE)
        2.2.4 熒光測量
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 實驗原理
        2.3.2 可行性研究
        2.3.3 實驗條件的優(yōu)化
        2.3.4 線性與選擇性研究
    2.4 結(jié)論
第三章 高效的指數(shù)滾環(huán)擴增分子網(wǎng)用于超靈敏且無標記檢測Micro RNA
    3.1 前言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 化學藥品和試劑
        3.2.2 環(huán)形探針(CP)的制備
        3.2.3 基于PNR和 RCA的整合擴增檢測mi RNA-1246
        3.2.4 非變性PAGE試驗
        3.2.5 人血清中miRNA的測定
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 實驗原理
        3.3.2 可行性研究
        3.3.3 優(yōu)化實驗條件
        3.3.4 線性和選擇性分析
    3.4 結(jié)論
第四章 目標物催化組裝形成的金屬離子DNAzyme用于放大檢測ATP
    4.1 前言
    4.2 實驗部分
        4.2.1 化學品和試劑
        4.2.2 ATP熒光擴增檢測實驗過程
        4.2.3 非變性PAGE試驗
        4.2.4 熒光強度測量
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 提出的ATP熒光傳感策略的原理
        4.3.2 ATP檢測策略的可行性研究
        4.3.3 優(yōu)化實驗條件
        4.3.4 檢測策略的性能分析
    4.4 結(jié)論
參考文獻
研究生期間發(fā)表的論文
致謝



本文編號：3969124