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基于熒光聚合物碳點(diǎn)的酶活性檢測(cè)和酶聯(lián)免疫分析應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2024-02-15 17:01
  酶是一種高效的生物催化劑,參與生物體新陳代謝中的生化反應(yīng)。血清中酶的活性可以特異性反映組織或器官的健康狀態(tài),因此,酶可以作為某些疾病早期診斷的生物標(biāo)志物。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)是一種重要的固相免疫分析方法,主要依賴(lài)于抗原抗體的特異性識(shí)別和酶的催化放大。ELISA在環(huán)境監(jiān)測(cè)、臨床診斷、食品安全檢測(cè)、實(shí)驗(yàn)室研究、生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用等領(lǐng)域中有著重要的應(yīng)用價(jià)值。酶活性傳感方法的研究將促進(jìn)ELSIA平臺(tái)的發(fā)展。酶活性檢測(cè)的光學(xué)傳感方法中最常用的兩種方法是比色法和熒光法。相比于比色法,熒光傳感方法具有靈敏度高、分析速度快、操作簡(jiǎn)單以及選擇性好等優(yōu)點(diǎn)。熒光傳感方法的構(gòu)建需要選擇對(duì)分析物有響應(yīng)的信號(hào)單元作為分析探針。碳點(diǎn)呈現(xiàn)出其他常規(guī)分析探針不具備的優(yōu)越特性,例如,優(yōu)異的熒光性能、高化學(xué)穩(wěn)定性、容易制備、低毒性以及出色的生物相容性等。本論文中,我們將三種碳點(diǎn)作為分析探針引入到熒光傳感方法中用于酶活性的檢測(cè)或ELISA平臺(tái)的構(gòu)建,并進(jìn)一步研究了所提出的熒光傳感方法在實(shí)際樣品中的應(yīng)用。具體內(nèi)容如下:一、我們首次發(fā)現(xiàn),在室溫下甲基多巴和乙醇胺的混合溶液可以發(fā)生綠色熒光反應(yīng)。通過(guò)紫外-可見(jiàn)吸收光譜、透射電子...

【文章頁(yè)數(shù)】:119 頁(yè)

【部分圖文】:

圖1-1?TYR催化反應(yīng)的示意圖

圖1-1?TYR催化反應(yīng)的示意圖

?第一章文獻(xiàn)綜述???1.2.2酪氨酸酶活性分析??TYR有兩個(gè)銅離子活性位點(diǎn)1211,廣泛分布于動(dòng)植物,微生物和人體組織中。??因TYR有兩個(gè)活性位點(diǎn),其催化作用可以分為兩步。首先,TYR可以將單酚氧??化為雙酚,接著TYR可以將雙酚氧化為相應(yīng)的鄰苯醌(如圖1-1),因此,TY....


圖1-3?(A),?(B)?DA功能化量子點(diǎn)和碳點(diǎn)用于檢測(cè)TYR活性示意圖丨3*.41丨;(C),??(D)?g-C3N4和碳點(diǎn)基于FRET過(guò)程用于檢測(cè)TYR活性以及抑制劑示意圖|42’471

圖1-3?(A),?(B)?DA功能化量子點(diǎn)和碳點(diǎn)用于檢測(cè)TYR活性示意圖丨3*.41丨;(C),??(D)?g-C3N4和碳點(diǎn)基于FRET過(guò)程用于檢測(cè)TYR活性以及抑制劑示意圖|42’471

X?^?OH??—_HS.?\?十..—>?#%。^〇??TYR?+?Oz?+?lnhlbltor??OH?P????5?+?w..r〇-w?^?w?°??CQDs?TYR?Inhibitor?DO?PA?Dopaquinone??hV?X?〇?FRET??::::產(chǎn):::0:?....


圖1-4?(A)比率熒光用于檢測(cè)TYR活性示意圖l?l;?(B)原位生成熒光團(tuán)用于檢測(cè)??TYR活性示意圖l?l;?(C)基于水楊酸噠嗪的TYR響應(yīng)探針Ml;?(D)基于半花菁的??TYR響應(yīng)探針丨50丨

圖1-4?(A)比率熒光用于檢測(cè)TYR活性示意圖l?l;?(B)原位生成熒光團(tuán)用于檢測(cè)??TYR活性示意圖l?l;?(C)基于水楊酸噠嗪的TYR響應(yīng)探針Ml;?(D)基于半花菁的??TYR響應(yīng)探針丨50丨

?第一章文獻(xiàn)綜述???醌,多巴醌可以通過(guò)FRET機(jī)制將熒光團(tuán)的熒光猝滅[42]。基于這一現(xiàn)象,You等??人利用石墨烯量子點(diǎn)作為發(fā)光物質(zhì),發(fā)展了一種猝滅型TYR活性分析法(圖1-??3D)?[47]。??Wang等人以谷胱甘肽保護(hù)的金簇(AuNCs)作為熒光探針,開(kāi)發(fā)了一種TYR....


圖1-5?ALP催化反應(yīng)的示意圖

圖1-5?ALP催化反應(yīng)的示意圖

熒光,并且該過(guò)程可以避免活性氧物種(ROS)的干擾。該探針在細(xì)??胞成像中的應(yīng)用表明,B16細(xì)胞中的TYR活性明顯高于Hela細(xì)胞,此外,該探??針也可用于在斑馬魚(yú)中TYR的成像I%。??1.2.?3堿性磷酸酶活性分析??ALP參與生命活動(dòng)的多個(gè)方面,包括代謝、分子運(yùn)輸、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)....



本文編號(hào):3900034

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